| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-18页 |
| 1 艾滋病的发生及危害 | 第12页 |
| 2 人类免疫缺陷病毒(HIV) | 第12-13页 |
| 3 逆转录酶 | 第13页 |
| 4 HIV-1逆转录过程 | 第13-16页 |
| ·负链强力终止DNA的合成 | 第15页 |
| ·第一次链转移 | 第15页 |
| ·长负链DNA的合成 | 第15页 |
| ·正链DNA合成的起始 | 第15-16页 |
| ·第二次链转移和双链DNA的合成 | 第16页 |
| 5 逆转录酶抑制剂 | 第16页 |
| 6 立题依据 | 第16-18页 |
| 实验材料 | 第18-21页 |
| 1 药品与化合物 | 第18页 |
| 2 细胞株 | 第18页 |
| 3 质粒 | 第18页 |
| 4 试剂 | 第18-19页 |
| 5 仪器 | 第19-21页 |
| 实验方法 | 第21-32页 |
| 1 细胞培养 | 第21页 |
| ·无血清DMEM培养基配制 | 第21页 |
| ·含胎牛血清及青链霉素培养基的配制 | 第21页 |
| ·10×磷酸盐缓冲液(无Ca~(2+),Mg~(2+))配制 | 第21页 |
| ·293细胞培养 | 第21页 |
| 2 质粒提取 | 第21-22页 |
| ·培养基的配制 | 第21-22页 |
| ·LB细菌培养基配制 | 第21-22页 |
| ·LB细菌培养平板制备 | 第22页 |
| ·外源DNA转化大肠杆菌 | 第22页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第22页 |
| 3 引物设计 | 第22-24页 |
| ·R/U5引物对 | 第22-23页 |
| ·U3引物对 | 第23页 |
| ·R/PBS引物对 | 第23-24页 |
| ·LTR/Gag引物对 | 第24页 |
| ·β-globin | 第24页 |
| 4 VSVG/HIV假病毒的制备 | 第24-26页 |
| ·转染用试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·细胞瞬时转染制备假病毒 | 第25-26页 |
| ·假病毒滴度的检测 | 第26页 |
| 5 应用聚合酶链反应(PCR)检测药物EFV,AZT及化合物JL2、EPHCL、EBZQ对HIV-1逆转录过程各环节的抑制作用 | 第26-30页 |
| ·药物及化合物溶液的配制 | 第26-27页 |
| ·给药及加入假病毒溶液 | 第27页 |
| ·细胞基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·提取细胞基因组DNA溶液的配制 | 第27页 |
| ·DNA提取 | 第27-28页 |
| ·DNA的电泳检测和定量 | 第28页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳溶液的配制 | 第28页 |
| ·DNA的电泳检测 | 第28页 |
| ·DNA的定量 | 第28页 |
| ·PCR实验 | 第28-30页 |
| ·引物的PCR退火温度 | 第28-29页 |
| ·PCR反应体系 | 第29页 |
| ·PCR反应条件 | 第29-30页 |
| ·PCR反应结果的检测 | 第30页 |
| 6 药物EFV和化合物JL2、EPHCL、EBZQ对小鼠白血病病毒(MLV)复制的影响 | 第30-32页 |
| ·药物及化合物溶液的配制 | 第30页 |
| ·制备VSVG/MLV-GFP假病毒 | 第30-31页 |
| ·加入药物及假病毒溶液 | 第31-32页 |
| 实验结果 | 第32-38页 |
| 1 药物EFV、AZT及化合物JL2、EPHCL、EBZQ对HIV-1逆转录过程各环节的抑制作用结果 | 第32-33页 |
| ·药物EFV、AZT对HIV-1逆转录过程的抑制结果 | 第32页 |
| ·化合物JL2、EPHCL和EBZQ对HIV-1逆转录过程的抑制结果 | 第32-33页 |
| 2 药物EFV及化合物JL2、EPHCL、EBZQ对MLV复制的作用结果 | 第33-38页 |
| 讨论 | 第38-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录1 | 第48-50页 |
