摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 引言 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-29页 |
·主要材料及试剂 | 第13-14页 |
·实验主要仪器和设备 | 第14-15页 |
·主要试剂的配制 | 第15-17页 |
·方法 | 第17-28页 |
·干扰目的基因AE3 的重组质粒pSilencer-AE3 系列的构建 | 第17-21页 |
·重组质粒的转化、鉴定 | 第21-22页 |
·心肌样细胞H9c2 的培养 | 第22-23页 |
·心肌样细胞H9c2 的转染 | 第23-24页 |
·RT-PCR 技术检测H9c2 细胞中AE3 的m RNA 含量 | 第24-26页 |
·Western blot 法检测H9c2 细胞中AE3 蛋白的表达 | 第26-28页 |
·数据处理 | 第28-29页 |
第三章 结果 | 第29-37页 |
·载体双酶切鉴定 | 第29页 |
·重组质粒筛选与鉴定 | 第29-32页 |
·氨苄青霉素抗性筛选重组质粒 | 第29-31页 |
·重组质粒测序鉴定 | 第31-32页 |
·荧光显微镜观察pEGFP-N2 转染结果 | 第32-34页 |
·转染siRNA 表达质粒对心肌样细胞AE3 表达的影响 | 第34-37页 |
·对H9c2 心肌细胞AE3 mRNA 表达水平的影响 | 第34-35页 |
·对H9c2 心肌细胞AE3 蛋白表达水平的影响 | 第35-37页 |
第四章 讨论 | 第37-42页 |
·AE3 蛋白的结构、分布及功能 | 第37-38页 |
·RNA 干扰技术 | 第38-41页 |
·本实验的不足之处及展望 | 第41-42页 |
第五章 结论 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
综述 | 第47-54页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第54页 |