内容提要 | 第1-10页 |
第一章 前言 | 第10-38页 |
·HIV 病毒简介 | 第10-13页 |
·HIV-1 的生活周期和致病机制 | 第10-12页 |
·HIV-1 感染受体及其细胞亲嗜性 | 第12-13页 |
·中和抗体的研究现状 | 第13-28页 |
·中和抗体的产生机制及其意义 | 第13-17页 |
·单克隆中和抗体 | 第17-21页 |
·中和抗体检测 | 第21-28页 |
·抗HIV-1 药物 | 第28-34页 |
·核苷类逆转录酶抑制剂 | 第28-29页 |
·非核苷类逆转录酶抑制剂 | 第29页 |
·蛋白酶抑制剂 | 第29-30页 |
·抗HIV 药物的检测方法 | 第30-34页 |
·本论文设计的构思 | 第34-38页 |
·实验思路 | 第34-36页 |
·实验程序 | 第36-38页 |
第二章 实验材料和方法 | 第38-58页 |
·材料、仪器和试剂 | 第38-41页 |
·材料 | 第38-40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·常用试剂配置 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-58页 |
·质粒的小量提取 | 第41-43页 |
·大肠杆菌E.coli 化学感受态的制备 | 第43页 |
·RNA 模板的制备 | 第43-44页 |
·cDNA 的获得 | 第44-45页 |
·套式PCR | 第45-46页 |
·琼脂糖凝胶回收 | 第46-47页 |
·将 ENV 基因克隆入 pcDNA~(TM)3.1 D/V5-His-TOPO 载体 | 第47-49页 |
·质粒的大量提取 | 第49-50页 |
·质粒的定量 | 第50-51页 |
·利用LIPOFECTAMINE 2000 进行转染 | 第51页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第51-52页 |
·Western Blot | 第52页 |
·功能性假病毒的获得 | 第52-53页 |
·功能性假病毒的滴度测定 | 第53-54页 |
·假病毒体系检测单克隆抗体的方法 | 第54页 |
·中和抗体检测操作流程 | 第54-55页 |
·抗HIV-1 药物的检测 | 第55-58页 |
第一部分 假病毒检测体系的建立 | 第58-75页 |
·PCDNA3.1-ENV 质粒的构建及鉴定 | 第58-60页 |
·ENV 基因片段的获得 | 第58-59页 |
·pcDNA3.1-ENV 质粒的鉴定 | 第59-60页 |
·ENV 蛋白的表达鉴定 | 第60-61页 |
·功能性假病毒的获得 | 第61-62页 |
·可形成功能性假病毒的ENV 序列分析 | 第62-67页 |
·假病毒株中和特性的分析 | 第67-73页 |
·单克隆抗体2G12 | 第69-70页 |
·单克隆抗体IgG1b12 | 第70页 |
·单克隆抗体2F5 | 第70-71页 |
·单克隆抗体4E10 | 第71-73页 |
·小结 | 第73-75页 |
第二部分 假病毒检测体系的应用 | 第75-92页 |
·应用假病毒检测体系检测血清样本 | 第75-80页 |
·血清样本检测结果 | 第75-78页 |
·小结 | 第78-80页 |
·假病毒检测体系检测抗HIV 药物 | 第80-92页 |
·应用假病毒检测体系检测抗HIV-1 药物 | 第80-88页 |
·假病毒检测体系与活病毒法在检测抗HIV 药物的比较 | 第88-90页 |
·小结 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-109页 |
博士期间论文发表情况 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
中文摘要 | 第111-115页 |
ABSTRACT | 第115-121页 |
导师简介 | 第121-123页 |
作者简历 | 第123页 |