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人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)假病毒检测体系的建立与应用

内容提要第1-10页
第一章 前言第10-38页
   ·HIV 病毒简介第10-13页
     ·HIV-1 的生活周期和致病机制第10-12页
     ·HIV-1 感染受体及其细胞亲嗜性第12-13页
   ·中和抗体的研究现状第13-28页
     ·中和抗体的产生机制及其意义第13-17页
     ·单克隆中和抗体第17-21页
     ·中和抗体检测第21-28页
   ·抗HIV-1 药物第28-34页
     ·核苷类逆转录酶抑制剂第28-29页
     ·非核苷类逆转录酶抑制剂第29页
     ·蛋白酶抑制剂第29-30页
     ·抗HIV 药物的检测方法第30-34页
   ·本论文设计的构思第34-38页
     ·实验思路第34-36页
     ·实验程序第36-38页
第二章 实验材料和方法第38-58页
   ·材料、仪器和试剂第38-41页
     ·材料第38-40页
     ·主要仪器第40页
     ·常用试剂配置第40-41页
   ·实验方法第41-58页
     ·质粒的小量提取第41-43页
     ·大肠杆菌E.coli 化学感受态的制备第43页
     ·RNA 模板的制备第43-44页
     ·cDNA 的获得第44-45页
     ·套式PCR第45-46页
     ·琼脂糖凝胶回收第46-47页
     ·将 ENV 基因克隆入 pcDNA~(TM)3.1 D/V5-His-TOPO 载体第47-49页
     ·质粒的大量提取第49-50页
     ·质粒的定量第50-51页
     ·利用LIPOFECTAMINE 2000 进行转染第51页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第51-52页
     ·Western Blot第52页
     ·功能性假病毒的获得第52-53页
     ·功能性假病毒的滴度测定第53-54页
     ·假病毒体系检测单克隆抗体的方法第54页
     ·中和抗体检测操作流程第54-55页
     ·抗HIV-1 药物的检测第55-58页
第一部分 假病毒检测体系的建立第58-75页
   ·PCDNA3.1-ENV 质粒的构建及鉴定第58-60页
     ·ENV 基因片段的获得第58-59页
     ·pcDNA3.1-ENV 质粒的鉴定第59-60页
   ·ENV 蛋白的表达鉴定第60-61页
   ·功能性假病毒的获得第61-62页
   ·可形成功能性假病毒的ENV 序列分析第62-67页
   ·假病毒株中和特性的分析第67-73页
     ·单克隆抗体2G12第69-70页
     ·单克隆抗体IgG1b12第70页
     ·单克隆抗体2F5第70-71页
     ·单克隆抗体4E10第71-73页
   ·小结第73-75页
第二部分 假病毒检测体系的应用第75-92页
   ·应用假病毒检测体系检测血清样本第75-80页
     ·血清样本检测结果第75-78页
     ·小结第78-80页
   ·假病毒检测体系检测抗HIV 药物第80-92页
     ·应用假病毒检测体系检测抗HIV-1 药物第80-88页
     ·假病毒检测体系与活病毒法在检测抗HIV 药物的比较第88-90页
     ·小结第90-92页
参考文献第92-109页
博士期间论文发表情况第109-110页
致谢第110-111页
中文摘要第111-115页
ABSTRACT第115-121页
导师简介第121-123页
作者简历第123页

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