| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 1 绪论 | 第14-43页 |
| ·水传播疾病和病原体概述 | 第14-22页 |
| ·水传播疾病的现状 | 第14-15页 |
| ·水环境中的病原体 | 第15-22页 |
| ·病原体在水环境中的存活和分布 | 第22-26页 |
| ·影响病原体存活的因素 | 第22-23页 |
| ·病原体在各种水体中的分布 | 第23-25页 |
| ·病原体与指示物的关系 | 第25-26页 |
| ·我国的水传播疾病和水环境病原性污染状况 | 第26-28页 |
| ·我国主要的水传播疾病 | 第26-27页 |
| ·我国的水环境病原性污染状况 | 第27-28页 |
| ·环境水体中病原体的浓缩和检测技术概况 | 第28-37页 |
| ·病原体浓缩技术 | 第28-31页 |
| ·病原体检测技术 | 第31-37页 |
| ·病原体健康风险评价的研究现状 | 第37-40页 |
| ·环境风险评价的概念和分类 | 第37页 |
| ·健康风险评价的发展 | 第37-38页 |
| ·病原体健康风险评价的步骤和标准 | 第38-40页 |
| ·研究目的与内容 | 第40-43页 |
| ·问题的提出 | 第40页 |
| ·研究目的 | 第40-41页 |
| ·研究内容 | 第41页 |
| ·技术路线 | 第41-43页 |
| 2 环境水体中肠道病毒浓缩方法的建立 | 第43-54页 |
| ·病毒在滤膜上的吸附-洗脱机理 | 第43-44页 |
| ·试验材料和计算方法 | 第44-45页 |
| ·参考病毒株 | 第44页 |
| ·主要试剂和设备 | 第44-45页 |
| ·病毒回收率的计算 | 第45页 |
| ·微孔滤膜吸附-洗脱法的建立 | 第45-51页 |
| ·方法的流程 | 第45页 |
| ·微孔滤膜孔径对病毒浓缩的影响 | 第45-46页 |
| ·微孔滤膜材质对病毒浓缩的影响 | 第46-47页 |
| ·洗脱方式的改进与洗脱剂的比较 | 第47-48页 |
| ·洗脱液浓缩方法的比较与选择 | 第48-49页 |
| ·PEG对病毒回收率的影响 | 第49-50页 |
| ·浓缩方法与各步骤病毒回收率的确定 | 第50-51页 |
| ·病毒浓缩方法的比较 | 第51-52页 |
| ·滑石粉-硅藻土絮凝沉淀法 | 第51页 |
| ·化学絮凝沉淀法 | 第51页 |
| ·滑石粉-硅藻土吸附层吸附-洗脱法 | 第51-52页 |
| ·微孔滤膜吸附-洗脱法对环境水样的适应性 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 3 肠道病毒RT-PCR检测方法的建立 | 第54-65页 |
| ·试验材料 | 第54-55页 |
| ·参考病毒株 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·仪器设备 | 第54-55页 |
| ·肠道病毒RT-PCR检测方法的建立 | 第55-64页 |
| ·肠道病毒通用引物设计 | 第55-56页 |
| ·RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·RT-PCR反应步骤的选择 | 第57-58页 |
| ·RT-PCR反应体系的优化 | 第58-61页 |
| ·首轮PCR的灵敏度与实际问题 | 第61页 |
| ·肠道病毒巢式RT-PCR检测方法 | 第61-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 4 肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第65-77页 |
| ·实时荧光定量PCR的特征值含义和定量的数学原理 | 第65-67页 |
| ·试验材料 | 第67-68页 |
| ·参考病毒株和主要试剂 | 第67页 |
| ·仪器设备 | 第67-68页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR标准品的构建 | 第68-72页 |
| ·试剂准备 | 第69-70页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第70页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第70页 |
| ·克隆的筛选和重组质粒标准品的制备 | 第70-72页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR体系的优化 | 第72-76页 |
| ·各组分浓度的优化 | 第72-73页 |
| ·扩增循环参数的优化 | 第73-74页 |
| ·标准曲线的测定及方法学评价 | 第74-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 5 典型肠道病原菌PCR检测方法的建立 | 第77-91页 |
| ·试验材料 | 第77-78页 |
| ·参考菌株 | 第77页 |
| ·主要试剂 | 第77页 |
| ·仪器设备 | 第77-78页 |
| ·环境水体样品的病原菌浓缩方法 | 第78页 |
| ·伤寒沙门菌PCR检测方法的建立 | 第78-82页 |
| ·伤寒沙门菌引物性质 | 第78-79页 |
| ·伤寒沙门菌常规PCR检测方法 | 第79-80页 |
| ·伤寒沙门菌实时荧光定量PCR检测方法 | 第80-82页 |
| ·志贺菌PCR检测方法的建立 | 第82-85页 |
| ·志贺菌引物性质 | 第82页 |
| ·志贺菌常规PCR检测方法 | 第82-83页 |
| ·志贺菌实时荧光定量PCR检测方法 | 第83-85页 |
| ·大肠埃希菌PCR检测方法的建立 | 第85-88页 |
| ·大肠埃希菌引物性质 | 第85页 |
| ·大肠埃希菌常规PCR检测方法 | 第85-86页 |
| ·大肠埃希菌实时荧光定量PCR检测方法 | 第86-88页 |
| ·霍乱弧菌PCR检测方法的建立 | 第88-90页 |
| ·霍乱弧菌引物性质 | 第88-89页 |
| ·霍乱弧菌常规PCR检测方法 | 第89-90页 |
| ·霍乱弧菌实时荧光定量PCR检测方法 | 第90页 |
| ·小结 | 第90-91页 |
| 6 水环境中肠道病原体分布变化规律及相关因素研究 | 第91-133页 |
| ·试验材料与方法 | 第91-97页 |
| ·采样点的布设及水体基本状况 | 第91-93页 |
| ·采样方法和监测时间 | 第93页 |
| ·PCR检测 | 第93页 |
| ·细菌学指标的培养法检测 | 第93-95页 |
| ·理化指标的测定 | 第95页 |
| ·检测结果处理分析方法 | 第95-97页 |
| ·结果分析与讨论 | 第97-132页 |
| ·各水体中肠道病毒的分布特征和变化规律 | 第97-103页 |
| ·各水体中肠道病毒的类型 | 第103-104页 |
| ·各水体中细菌的分布特征和变化规律 | 第104-108页 |
| ·理化因子的变化规律 | 第108-114页 |
| ·微生物学指标之间的关系 | 第114-121页 |
| ·微生物指标与理化因子的关系 | 第121-132页 |
| ·小结 | 第132-133页 |
| 7 水环境肠道病原体健康风险评价 | 第133-150页 |
| ·水体病原性污染情况及危害鉴别 | 第133-137页 |
| ·地表水环境质量标准存在的不足 | 第133-136页 |
| ·病原体危害鉴别 | 第136-137页 |
| ·不同使用方式的暴露评价 | 第137-138页 |
| ·病原体剂量反应关系的确定 | 第138-139页 |
| ·肠道病原体健康风险计算 | 第139-141页 |
| ·肠道病原体分布参数 | 第139页 |
| ·假设条件以及可接受年风险值的选取 | 第139-140页 |
| ·健康风险的计算方法 | 第140-141页 |
| ·肠道病原体健康风险与水质安全性评价 | 第141-148页 |
| ·黑河 | 第141-142页 |
| ·兴庆湖 | 第142-143页 |
| ·北湖 | 第143-144页 |
| ·浐河 | 第144-146页 |
| ·二级处理出水 | 第146-148页 |
| ·不确定性因素分析 | 第148-149页 |
| ·小结 | 第149-150页 |
| 8 结论与建议 | 第150-154页 |
| ·结论 | 第150-152页 |
| ·本论文的创新点 | 第152-153页 |
| ·建议 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
| 参考文献 | 第155-167页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及所获奖励 | 第167-168页 |