| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 注释表 | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第10-21页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·固定化金属亲和层析 | 第10-19页 |
| ·固定化金属亲和层析法的原理 | 第10-12页 |
| ·固定化金属离子亲和层析柱的制法 | 第12-13页 |
| ·固定化金属亲合层析介质的组成 | 第13-16页 |
| ·适用于IMAC中的样品要求 | 第16-17页 |
| ·固定化金属亲合层析技术的发展历程 | 第17-18页 |
| ·固定化金属亲合层析技术的应用 | 第18-19页 |
| ·本文的研究思路和研究内容 | 第19-21页 |
| 2 金属离子螯合琼脂糖凝胶介质的制备 | 第21-33页 |
| ·试剂与仪器 | 第21-22页 |
| ·实验试剂 | 第21-22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·实验内容 | 第22-25页 |
| ·Ni~(2+)离子螯合琼脂糖凝胶介质的制备 | 第22-24页 |
| ·Co~(2+)离子螯合琼脂糖凝胶介质的制备 | 第24-25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-30页 |
| ·金属离子螯合琼脂糖凝胶介质的扫描显微镜图 | 第25-26页 |
| ·红外谱图 | 第26-29页 |
| ·Sepharose CL-6B-IDA-Ni~(2+)和Sepharose CL-6B-CM-ASP-Co~(2+)介质螯合金属离子量的测定 | 第29-30页 |
| ·镍离子亲和层析介质的影响因素 | 第30-32页 |
| ·环氧氯丙烷的用量对活化效率的影响 | 第30页 |
| ·反应时间对活化效率的影响 | 第30-31页 |
| ·亚氨基二乙酸(IDA)的用量对活化效率的影响 | 第31-32页 |
| ·本章小结 | 第32-33页 |
| 3 N-(5-氨基-1-羧戊基)-亚氨基二乙酸螯合配基的制备 | 第33-42页 |
| ·实验步骤 | 第33-34页 |
| ·反应方程式 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-41页 |
| ·产物N~ε-苄氧羰基赖氨酸铜络合物的确定 | 第34-37页 |
| ·产物N~ε-苄氧羰基赖氨酸的确定 | 第37-39页 |
| ·N-[5-苄氧羰基氨基-1-羧戊基]-亚氨基二乙酸的结构分析 | 第39-41页 |
| ·N-(5-氨基-1-羧戊基)-亚氨基二乙酸核磁分析 | 第41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 4 金属离子螯合合琼脂糖微球用于纯化DNA聚合酶的研究 | 第42-50页 |
| ·DNA聚合酶的纯化 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·Sepharose CL-6B-Ni~(2+)-IDA的纯化原理 | 第42页 |
| ·Sepharose CL-6B-Ni~(2+)-IDA的纯化DNA聚合酶的实验步骤 | 第42-43页 |
| ·DNA聚合酶的SDS-PAGE检测 | 第43-45页 |
| ·SDS-PAGE电泳的机理 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE电泳的实验试剂 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE电泳的实验步骤 | 第44-45页 |
| ·自制Sepharose-CL-6B-IDA-Ni~(2+),Sepharose-CM-ASP-Co~(2+)介质与商业化Ni-NTA介质对比 | 第45页 |
| ·结论与分析 | 第45-49页 |
| ·蛋白吸附动力学曲线 | 第45-47页 |
| ·螯合树脂最大纯化量 | 第47页 |
| ·电泳分析 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
