| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-28页 |
| 1 金属螯合亲和层析技术 | 第9-10页 |
| 2 金属螯合亲和层析作用原理 | 第10-12页 |
| 3 金属螯合亲和层析介质的组成 | 第12-20页 |
| ·固相载体 | 第12-18页 |
| ·配基 | 第18-20页 |
| ·金属离子 | 第20页 |
| 4 影响蛋白质在IMAC介质上吸附与解吸的因素 | 第20-23页 |
| ·蛋白质表面配体的影响 | 第20-21页 |
| ·溶液pH的影响 | 第21-22页 |
| ·离子强度的影响 | 第22页 |
| ·竞争洗脱剂的影响 | 第22-23页 |
| 5 金属螯合亲和层析技术的应用 | 第23-27页 |
| ·金属螯合亲和层析用于生物分离纯化 | 第23-24页 |
| ·金属螯合亲和层析用于蛋白质的复性 | 第24-25页 |
| ·金属螯合亲和层析用于蛋白质的识别和鉴定 | 第25-26页 |
| ·金属螯合亲和层析技术在其它领域的应用 | 第26-27页 |
| 论文的出发点和主要工作 | 第27-28页 |
| 第二章 钴螯合亲和介质的制备 | 第28-35页 |
| 1 实验材料 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| 2 试验方法 | 第28-31页 |
| ·金属螯合琼脂糖微球的制备 | 第28-30页 |
| ·金属螯合磁性微粒的制备 | 第30-31页 |
| 3 结果与讨论 | 第31-34页 |
| ·金属螯合琼脂糖微球电子扫描显微镜表征 | 第31-32页 |
| ·金属螯合亲和层析介质红外表征 | 第32-33页 |
| ·Agarose-CM-Asp-Co、Agarose-CM-Asp-Ni微球上螯合金属离子量的原子吸收分光 光度法测定 | 第33页 |
| ·钴螯合磁性微粒Affimag-CM-Asp-Co的透射电镜表征 | 第33页 |
| ·钴螯合磁性微粒Affimag-CM-Asp-Co的磁滞回曲线 | 第33-34页 |
| 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 钴螯合琼脂糖微球用于融合蛋白纯化 | 第35-44页 |
| 1 实验材料 | 第35-36页 |
| ·试剂与样品 | 第35页 |
| ·菌种与质粒 | 第35页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第35-36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-38页 |
| ·六聚组氨酸融合蛋白的诱导表达及细胞裂解液的制备 | 第36-37页 |
| ·金属螯合亲和层析 | 第37页 |
| ·Agarose-CM-Asp-Co, Agarose-CM-Asp-Ni与Ni-NTA树脂(Qiagen)比较 | 第37-38页 |
| 3 实验结果及讨论 | 第38-43页 |
| ·融合蛋白吸附动力学曲线 | 第38-39页 |
| ·螯合树脂最大纯化量 | 第39页 |
| ·缓冲液体系的选择 | 第39-40页 |
| ·金属螯合亲和层析 | 第40-41页 |
| ·Agarose-CM-Asp-Co, Agarose-CM-Asp-Ni与Ni-NTA与Ni-TA树脂(Qiagen)比较 | 第41-43页 |
| 本章小结 | 第43-44页 |
| 第四章 钴螯合二氧化硅磁性微粒用于融合蛋白纯化 | 第44-51页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·试剂与样品 | 第44页 |
| ·菌种与质粒 | 第44页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第44-45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-47页 |
| ·六聚组氨酸融合蛋白的诱导表达及细胞裂解液的制备 | 第45页 |
| ·纯化条件的优化 | 第45-47页 |
| 3 结果和讨论 | 第47-49页 |
| ·磁粒用量的确定 | 第47页 |
| ·孵育时间的确定 | 第47-48页 |
| ·缓冲液体系的选择 | 第48页 |
| ·阴性对照试验 | 第48-49页 |
| ·Affimag-CM-Asp-Co纯化容量 | 第49页 |
| 本章小结 | 第49-51页 |
| 全文总结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
