| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 中文文摘 | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 绪论 | 第10-28页 |
| 1. 课题背景 | 第10-11页 |
| 2. 理想的燃料乙醇生产菌──酿酒酵母 | 第11-13页 |
| ·酿酒酵母生活史 | 第11页 |
| ·酿酒酵母基因组 | 第11-12页 |
| ·在科学研究中的作用 | 第12-13页 |
| 3. 酿酒酵母基因工程菌构建研究进展 | 第13-18页 |
| ·菌种选育 | 第13-14页 |
| ·发酵工艺优化 | 第14-16页 |
| ·特殊需要的基因工程菌构建 | 第16-18页 |
| 4. 基因敲除技术在构建酿酒酵母基因工程菌中的应用 | 第18-22页 |
| ·利用同源重组达到基因敲除 | 第18-19页 |
| ·以PCR方法为基础的基因敲除组件的构建 | 第19-21页 |
| ·基因敲除技术展望 | 第21-22页 |
| 5. 基因过表达技术的应用 | 第22-24页 |
| ·酵母表达的启动子 | 第22-23页 |
| ·酵母表达载体系统 | 第23-24页 |
| 6. 乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶关键基因分析及在发酵过程中的作用 | 第24-25页 |
| ·乙醇脱氢酶 | 第24页 |
| ·乙醛脱氢酶 | 第24-25页 |
| 7. 酿酒酵母己糖转运蛋白 | 第25-26页 |
| 8. 本研究立题依据与意义 | 第26-28页 |
| 第1章 酿酒酵母adh2、ald6双基因缺失突变株的构建 | 第28-46页 |
| 1. 材料和方法 | 第28-35页 |
| ·材料 | 第28-31页 |
| ·方法 | 第31-35页 |
| 2. 实验结果 | 第35-43页 |
| ·YS2-Δadh2基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·ald6基因的PCR验证 | 第36页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第36-37页 |
| ·基因敲除组件的构建 | 第37-38页 |
| ·突变株的转化、筛选及验证 | 第38-39页 |
| ·Kan~r筛选标记的去除和验证 | 第39页 |
| ·筛选标记重复利用敲除另一条等位基因 | 第39-40页 |
| ·突变株的生理特性试验 | 第40-43页 |
| 3. 讨论 | 第43-46页 |
| 第2章 Hxt1基因在adh2、ald6双基因缺失突变株的过表达 | 第46-62页 |
| 1. 材料与方法 | 第46-53页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·方法 | 第48-53页 |
| 2.实验结果 | 第53-59页 |
| ·hxt7启动子和hxt1基因片段的扩增 | 第53-54页 |
| ·pSHG1载体构建 | 第54页 |
| ·pSRG17载体构建 | 第54-55页 |
| ·pSHGK17载体构建 | 第55页 |
| ·过表达载体pSHGK17转化酿酒酵母YS2-Δadh2-Δald6菌株 | 第55-56页 |
| ·突变株的生理特性试验 | 第56-59页 |
| 3. 讨论 | 第59-62页 |
| 第3章 结论 | 第62-64页 |
| 附录 1 | 第64-68页 |
| 附录 2 | 第68-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 个人简历 | 第86-87页 |
