摘要 | 第1-15页 |
Abstract | 第15-17页 |
第一章 引言 | 第17-40页 |
1 植物基因工程研究进展 | 第17-21页 |
·植物基因分离方法研究进展 | 第17-18页 |
·植物遗传转化方法 | 第18页 |
·利用转基因技术改良植物性状 | 第18页 |
·植物基因工程主要研究成果 | 第18页 |
·转基因植物的检测与检验 | 第18-20页 |
·转基因植物的安全性评价 | 第20-21页 |
2 农杆菌介导的单子叶植物遗传转化研究进展 | 第21-24页 |
·农杆菌介导的遗传转化机理及特点 | 第21-22页 |
·影响农杆菌转化单子叶植物的因素 | 第22-24页 |
3 果树遗传转化研究进展 | 第24-29页 |
·研究概况 | 第24-25页 |
·果树基因工程的遗传转化系统 | 第25-26页 |
·果树基因工程的应用 | 第26-28页 |
·果树基因工程面临的问题及解决途径 | 第28-29页 |
4 香蕉生物技术研究进展 | 第29-35页 |
·香蕉植株再生研究进展 | 第30-32页 |
·香蕉相关功能基因的克隆研究 | 第32-33页 |
·香蕉遗传转化研究进展 | 第33-35页 |
5 ACS 基因研究进展 | 第35-36页 |
·ACS 基因的生物学功能 | 第35页 |
·ACS 基因的克隆 | 第35-36页 |
·ACS 基因在植物遗传转化中的应用 | 第36页 |
6 反义RNA 技术研究进展 | 第36-39页 |
·反义RNA 技术 | 第36页 |
·反义RNA 技术的原理 | 第36-38页 |
·反义RNA 技术的特点 | 第38页 |
·反义RNA 技术的应用 | 第38-39页 |
7 本研究的内容与意义 | 第39-40页 |
·研究内容 | 第39页 |
·研究意义 | 第39-40页 |
第二章 香蕉离体再生体系的优化 | 第40-53页 |
第一节 香蕉茎尖离体繁殖的优化研究 | 第40-46页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
·材料 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
2 结果与分析 | 第42-45页 |
·香蕉外植体取材时期的最佳选择 | 第42页 |
·香蕉吸芽消毒方法的筛选 | 第42-43页 |
·防止香蕉褐变不同类型培养基及其附加物的选择 | 第43-44页 |
·香蕉试管苗的增殖培养 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
·外植体取材时期和消毒方法的选择是前提 | 第45页 |
·防止褐变的最佳培养基及其附加物的选择 | 第45-46页 |
第二节 香蕉不同外植体诱导愈伤组织的初步研究 | 第46-53页 |
1 材料与方法 | 第46-48页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46-48页 |
2 结果与分析 | 第48-51页 |
·香蕉幼嫩花序诱导的不同愈伤组织 | 第48-50页 |
·香蕉幼嫩果实诱导出胚珠 | 第50页 |
·香蕉多芽体茎尖中诱导出胚性愈伤组织 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
·香蕉愈伤组织继代难度较大 | 第51-52页 |
·良好的受体系统有利于转化 | 第52-53页 |
第三章 根癌农杆菌介导ACS 反义基因转化香蕉的研究 | 第53-75页 |
第一节 香蕉转基因受体系统的抗生素敏感性试验 | 第53-58页 |
1 材料与方法 | 第53-55页 |
·材料 | 第53-54页 |
·方法 | 第54-55页 |
2 结果与分析 | 第55-57页 |
·香蕉横切薄片培养卡那霉素适宜浓度的选择 | 第55页 |
·香蕉横切薄片培养头孢霉素适宜浓度的选择 | 第55-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
·卡那霉素适宜做香蕉遗传转化的抗生素选择剂 | 第57-58页 |
·头孢霉素适宜做香蕉遗传转化的抗生素抑菌剂 | 第58页 |
第二节 根癌农杆菌介导ACS 反义基因转化香蕉的研究 | 第58-75页 |
1 材料与方法 | 第59-62页 |
·材料 | 第59页 |
·方法 | 第59-62页 |
2 结果与分析 | 第62-71页 |
·农杆菌LBA4404 对头孢霉素的耐性验证 | 第62-63页 |
·农杆菌介导香蕉横切薄片遗传转化的影响因子 | 第63-71页 |
3 讨论 | 第71-75页 |
·根癌农杆菌介导香蕉遗传转化的参数优化 | 第71-73页 |
·农杆菌介导的单子叶植物遗传转化效果 | 第73-74页 |
·选择转化体的策略 | 第74-75页 |
第四章 抗性芽的筛选、植株再生及检测 | 第75-85页 |
1 材料与方法 | 第75-82页 |
·材料 | 第75-77页 |
·方法 | 第77-82页 |
2 结果与分析 | 第82-83页 |
·香蕉抗性芽筛选情况 | 第82页 |
·香蕉抗性植株再生 | 第82页 |
·香蕉抗性植株的移栽 | 第82页 |
·抗性植株的检测 | 第82-83页 |
·抗性再生植株叶片的PCR 检测 | 第83页 |
3 讨论 | 第83-85页 |
·转化体的嵌合体问题 | 第83页 |
·遗传转化过程中的基因沉默现象 | 第83-84页 |
·转基因再生植株的基因表达问题 | 第84页 |
·从抗性芽到转基因植株的效率问题 | 第84页 |
·关于没有对再生植株进行Southern 检测的说明 | 第84-85页 |
第五章 初代转基因试管苗继代增殖及移栽 | 第85-91页 |
1 材料与方法 | 第85-86页 |
·材料 | 第85页 |
·方法 | 第85-86页 |
2 结果与分析 | 第86-89页 |
·不同培养基对转基因香蕉苗继代增殖的影响 | 第86-87页 |
·不同培养基对转基因香蕉苗生根的影响 | 第87-88页 |
·不同移栽时期、不同移栽基质对瓶苗过渡移栽的影响 | 第88-89页 |
·再生植株的GUS 组织化学法检测与gus 及ACS 基因的PCR 检测 | 第89页 |
3 讨论 | 第89-91页 |
·转基因香蕉苗继代增殖培养基的选择 | 第89页 |
·转基因香蕉苗生根需要适宜的激素和蔗糖浓度 | 第89-90页 |
·移栽时期和移栽基质是瓶苗移栽成活的关键 | 第90-91页 |
第六章 “天宝蕉”ACS 基因的分离及克隆 | 第91-102页 |
第一节 香蕉叶片总RNA 的提取与分离 | 第91-95页 |
1 材料和方法 | 第91-93页 |
·材料 | 第91页 |
·试剂 | 第91-92页 |
·叶片总RNA 提取方法 | 第92-93页 |
·RNA 纯度及完整性检测 | 第93页 |
2 结果与分析 | 第93-94页 |
·改良CTAB 法提取总RNA 的结果分析 | 第93页 |
·TRIZOL 试剂盒法提取总RNA 的结果分析 | 第93-94页 |
3 讨论 | 第94-95页 |
·高质量香蕉叶片总RNA 提取方法的选取 | 第94页 |
·高质量香蕉叶片总RNA 提取应注意的问题 | 第94-95页 |
第二节 香蕉 ACS 基因的克隆 | 第95-102页 |
1 材料和方法 | 第95-98页 |
·材料和试剂 | 第95页 |
·方法 | 第95-98页 |
2 结果与分析 | 第98-99页 |
·香蕉ACS 基因保守区序列的获得 | 第98-99页 |
·香蕉ACS 基因核苷酸序列同源性分析 | 第99页 |
3 讨论 | 第99-102页 |
·克隆ACS 基因的意义 | 第99-101页 |
·克隆得到目的序列的意义 | 第101-102页 |
第七章 小结 | 第102-106页 |
1 香蕉离体再生体系的优化 | 第102-103页 |
2 香蕉转基因受体系统的抗生素敏感性试验 | 第103页 |
3 根癌农杆菌介导ACS 反义基因转化香蕉的研究 | 第103页 |
4 香蕉抗性芽的筛选、植株再生及检测 | 第103-104页 |
5 初代转基因香蕉试管苗快速繁殖及移栽 | 第104页 |
6 天宝蕉ACS 基因的克隆 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-124页 |
附录 图版及其说明 | 第124-140页 |
在学期间发表论文及参加学术活动 | 第140-141页 |
致谢 | 第141页 |