| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1. 植物光周期现象极其机制的研究 | 第11-15页 |
| ·光周期现象 | 第11页 |
| ·光周期与光周期敏感概念的提出 | 第11-12页 |
| ·植物光周期现象的研究 | 第12-15页 |
| ·光期和暗期的作用 | 第12页 |
| ·光周期刺激的感受和发生作用的部位 | 第12-13页 |
| ·光周期刺激的感受和发生作用的部位 | 第13-14页 |
| ·光周期作用于花时的形态发生研究 | 第14-15页 |
| 2. 光周期作用分子机理的研究 | 第15-22页 |
| ·拟南芥光周期作用分子机理的研究 | 第15-16页 |
| ·光受体的类别及功能 | 第16-17页 |
| ·生物钟成分与基因的振荡表达调控 | 第17-19页 |
| ·生物钟输出基因GI | 第19-20页 |
| ·CO 基因的研究进展 | 第20-22页 |
| ·开花素FT 基因的研究进展 | 第22页 |
| 3. 水稻光周期作用分子机理的研究 | 第22-24页 |
| ·水稻中的光受体 | 第23页 |
| ·水稻的生物钟研究进展 | 第23页 |
| ·水稻的生物钟下游基因研究进展 | 第23-24页 |
| 4 玉米光周期敏感研究的进展 | 第24-27页 |
| ·不同生态类型的玉米种质对光周期的敏感程度不同 | 第25页 |
| ·玉米光周期敏感相关性状的遗传特点及相关基因的定位研究 | 第25-26页 |
| ·玉米光周期相关基因的克隆研究 | 第26-27页 |
| 5 基于基因序列的基因克隆方法与荧光定量PCR | 第27-29页 |
| ·利用 EST 进行基因克隆的方法 | 第27页 |
| ·基因序列同源克隆法 | 第27页 |
| ·RACE 技术 | 第27-28页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| ·实时定量PCR 技术优点 | 第28页 |
| ·技术原理 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的应用及前景 | 第29页 |
| 6 拟南芥转基因方法的研究 | 第29-31页 |
| 第二章 ZmGI 基因的克隆和分析 | 第31-43页 |
| 1. 前言 | 第31页 |
| 2. 材料与方法 | 第31-39页 |
| ·材料与处理 | 第31页 |
| ·茎端分生组织的观察 | 第31页 |
| ·光周期处理方法和取样 | 第31-32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-39页 |
| ·总 RNA 提取 | 第32页 |
| ·总 RNA 中 DNA 的去除 | 第32-33页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第33页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·ZmGI 基因片段的PCR 扩增 | 第33页 |
| ·产物的回收、连接及转化 | 第33-34页 |
| ·ZmGI 基因的5’端序列克隆 | 第34-37页 |
| ·ZmGI 基因的3’端序列克隆 | 第37-38页 |
| ·ZmGI 基因全长的获得与分析 | 第38-39页 |
| 3. 结果与分析 | 第39-43页 |
| ·RNA 提取、纯化、第一链合成及检测 | 第39页 |
| ·目的基因的CDS 序列克隆 | 第39-41页 |
| ·ZmGI 基因的克隆和分析 | 第39页 |
| ·ZmGI 基因的同源性比较 | 第39-41页 |
| ·ZmGI 基因的染色体初步定位 | 第41页 |
| 4 结论与讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 玉米 ZmGI 基因的定量表达分析 | 第43-49页 |
| 1. 前言 | 第43页 |
| 2 材料与方法 | 第43-44页 |
| ·供试材料 | 第43页 |
| ·试剂与仪器 | 第43页 |
| ·光周期处理与取样 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·总RNA 的提取与纯化 | 第43-44页 |
| ·荧光定量PCR 引物的设计 | 第44页 |
| ·标准品制备和标准曲线的建立 | 第44页 |
| ·荧光定量 PCR 体系与数据计算 | 第44页 |
| 3. 结果与分析 | 第44-46页 |
| ·RNA 提取、反转录合成及检测 | 第44页 |
| ·荧光定量 PCR 引物的优化和确定 | 第44-45页 |
| ·标准品和标准曲线 | 第45页 |
| ·ZmGI 在不同时期和处理下mRNA 转录水平比较 | 第45页 |
| ·ZmGI 基因在3-8 叶期的表达情况 | 第45-46页 |
| ·茎尖6-8 叶期的电镜观察 | 第46页 |
| 4 结论与讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 ZmGI 基因转拟南芥 | 第49-59页 |
| 1. 前言 | 第49页 |
| 2 材料与仪器 | 第49页 |
| ·植物材料与栽培方法 | 第49页 |
| ·菌株与质粒载体 | 第49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| 3 实验方法 | 第49-54页 |
| ·植物表达载体PBI-ZmGI 的构建 | 第49-51页 |
| ·引物设计 | 第50页 |
| ·基因序列的扩增 | 第50页 |
| ·表达载体构建 | 第50-51页 |
| ·拟南芥转化 | 第51-52页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第51页 |
| ·PBI-ZmGI 的农杆菌电击转化 | 第51页 |
| ·拟南芥转化 | 第51-52页 |
| ·转基因拟南芥的筛选鉴定 | 第52-53页 |
| ·拟南芥T0代种子的筛选 | 第52页 |
| ·转基因拟南芥 RT-PCR 鉴定 | 第52-53页 |
| ·拟南芥转化株的表型鉴定和分析 | 第53页 |
| ·拟南芥转化株 T1的观察及其后代的获得 | 第53页 |
| ·拟南芥ZmGI 转化株 T2代花期的观察 | 第53页 |
| ·T2代转化株中光周期CO、GI 基因的表达分析 | 第53-54页 |
| ·光周期处理和取样 | 第53-54页 |
| ·QRT-PCR 检测相关基因表达 | 第54页 |
| 4. 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·植物表达载体PBI-ZmGI 的构建 | 第54-55页 |
| ·重组质粒PBI-ZmGI 的转化农杆菌 | 第55页 |
| ·转基因拟南芥的筛选 | 第55-56页 |
| ·ZmGI-ox 的PCR 验证 | 第56页 |
| ·转基因拟南芥的表型观察和比较 | 第56-57页 |
| ·转化株与野生型GI、CO 基因的表达比较分析 | 第57-58页 |
| 5. 结论与讨论 | 第58-59页 |
| 研究与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| abstract | 第72-73页 |