| 致谢 | 第1-12页 |
| 摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-20页 |
| 缩略词表 | 第20-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-48页 |
| 第一节 干细胞概述 | 第22-34页 |
| ·干细胞的起源 | 第22-23页 |
| ·干细胞的定义 | 第23-24页 |
| ·干细胞的分类 | 第24-26页 |
| ·干细胞的生物学特性 | 第26-29页 |
| ·ES细胞的形态学特征 | 第26页 |
| ·ES细胞的高端粒酶活性 | 第26-27页 |
| ·碱性磷酸酶的表达 | 第27页 |
| ·体内形成组织瘤 | 第27页 |
| ·ES细胞体外分化的潜能 | 第27-28页 |
| ·ES细胞的嵌合体功能 | 第28页 |
| ·遗传上的可操作性 | 第28-29页 |
| ·ES细胞自我更新的调控 | 第29-34页 |
| ·LIF-STAT3信号通路 | 第30-31页 |
| ·BMP4-Id信号通路 | 第31页 |
| ·Wnt途径 | 第31-32页 |
| ·Oct4 | 第32页 |
| ·同源蛋白转录因子Nanog | 第32-33页 |
| ·Foxd3 | 第33页 |
| ·Sox2 | 第33-34页 |
| 第二节 干细胞体外诱导分化 | 第34-39页 |
| ·诱导胚胎源性干细胞分化的分子调控 | 第34-36页 |
| ·细胞因子/化学物质诱导法 | 第35页 |
| ·选择性标记基因筛选目的细胞法 | 第35页 |
| ·特异性转录因子异位表达法 | 第35-36页 |
| ·体外定向诱导分化的细胞类型 | 第36-39页 |
| ·诱导分化为神经细胞 | 第36页 |
| ·诱导分化为脂肪细胞 | 第36-37页 |
| ·诱导分化为造血细胞 | 第37页 |
| ·诱导分化为心肌细胞和其他肌肉细胞 | 第37-38页 |
| ·诱导分化为肝细胞 | 第38页 |
| ·诱导分化为胰岛细胞 | 第38页 |
| ·诱导分化为其它类型的细胞 | 第38-39页 |
| 第三节 禽类原始生殖细胞和胚胎生殖细胞 | 第39-46页 |
| ·PGC的起源、迁移及增殖 | 第39-42页 |
| ·禽类PGC的起源 | 第39-40页 |
| ·PGC的迁移 | 第40-41页 |
| ·PGC的体外获取 | 第41-42页 |
| ·PGC的形态和特征 | 第42页 |
| ·PGC体外培养及增殖的调控 | 第42-45页 |
| ·干细胞生长因子(SCF) | 第43-44页 |
| ·碱性成纤维生长因子 | 第44页 |
| ·白细胞介素11(interleukin-11,IL-11) | 第44-45页 |
| ·胚胎生殖细胞 | 第45-46页 |
| 第四节 本研究的目的和内容 | 第46-48页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第46页 |
| ·研究目标及内容 | 第46-48页 |
| 第二章 鸡胚胎生殖细胞的分离培养及鉴定 | 第48-70页 |
| 第一节 鸡胚胎生殖细胞的分离培养及鉴定 | 第48-62页 |
| ·引言 | 第48-49页 |
| ·材料与方法 | 第49-56页 |
| ·实验动物 | 第49-50页 |
| ·主要器材 | 第50页 |
| ·主要试剂及配制 | 第50-51页 |
| ·生殖嵴PGC的分离及培养 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR检测PGC特异基因的表达 | 第52-54页 |
| ·鸡胚EG细胞传代培养 | 第54-55页 |
| ·鸡胚EG细胞的鉴定 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-58页 |
| ·鸡胚PGC体外分离培养及鉴定 | 第56页 |
| ·EG细胞的传代培养及形态学变化 | 第56-57页 |
| ·鸡胚EG细胞的鉴定 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·PGC的分离及培养 | 第58-59页 |
| ·鸡胚EG细胞的体外培养 | 第59-60页 |
| ·鸡胚EG细胞的鉴定 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第二节 鸡胚胎生殖细胞体内分化的潜能 | 第62-70页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料和方法 | 第62-65页 |
| ·实验动物 | 第62-63页 |
| ·主要器材 | 第63页 |
| ·主要试剂及配制 | 第63页 |
| ·EG细胞体内注射形成组织瘤 | 第63-64页 |
| ·组织瘤切片HE染色及观察 | 第64页 |
| ·切片免疫组织化学染色 | 第64-65页 |
| ·结果 | 第65-67页 |
| ·鸡胚EG细胞体内可分化形成组织瘤 | 第65页 |
| ·组织瘤形态学检查 | 第65-66页 |
| ·组织瘤免疫组织化学染色 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67页 |
| ·小结 | 第67-70页 |
| 第三章 鸡胚胎生殖细胞体外形成类胚体 | 第70-82页 |
| ·引言 | 第70-71页 |
| ·材料与方法 | 第71-74页 |
| ·实验动物与主要器材 | 第71页 |
| ·主要试剂及配制 | 第71页 |
| ·EG的分离培养及鉴定 | 第71页 |
| ·EB的形成 | 第71-72页 |
| ·EB吖啶橙染色及激光共聚焦显微镜观察 | 第72页 |
| ·EB切片及HE染色 | 第72页 |
| ·RT-PCR检测类胚体标志基因的表达 | 第72-73页 |
| ·半定量RT-PCR检测多能性转录调控因子在EB形成中表达的变化 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-79页 |
| ·EB的形成 | 第74页 |
| ·AO染色观察EB内部结构 | 第74-75页 |
| ·EB切片HE染色观察 | 第75-76页 |
| ·RT-PCR检测类胚体标志基因的表达 | 第76页 |
| ·不同浓度的血清对EB形成的影响 | 第76-77页 |
| ·不同浓度的谷氨酰胺对EB形成的影响 | 第77-78页 |
| ·RT-PCR检测多能相关基因在EB中表达的变化 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-82页 |
| 第四章 鸡胚胎生殖细胞的体外定向诱导分化 | 第82-112页 |
| 第一节 鸡胚胎生殖细胞定向诱导分化为神经细胞 | 第82-89页 |
| ·引言 | 第82-83页 |
| ·材料与方法 | 第83-86页 |
| ·主要试剂及配制 | 第83-84页 |
| ·鸡胚EG的传代培养及EB的形成 | 第84页 |
| ·RA诱导鸡胚EG细胞分化为神经细胞 | 第84页 |
| ·诱导后的细胞形态学观察 | 第84页 |
| ·免疫细胞化学和免疫荧光细胞化学染色 | 第84-85页 |
| ·半定量RT-PCR检测神经细胞相关基因表达的变化 | 第85-86页 |
| ·结果 | 第86-88页 |
| ·RA诱导后细胞形态变化 | 第86页 |
| ·免疫细胞化学和免疫荧光细胞化学鉴定 | 第86-87页 |
| ·RT-PCR鉴定神经特异基因表达的变化 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| 第二节 鸡胚胎生殖细胞定向诱导分化为脂肪细胞 | 第89-95页 |
| ·引言 | 第89-90页 |
| ·材料与方法 | 第90-92页 |
| ·实验动物 | 第90页 |
| ·主要试剂及配制 | 第90页 |
| ·鸡胚EG的传代培养及EB的形成 | 第90页 |
| ·诱导鸡胚EG细胞分化为脂肪细胞 | 第90页 |
| ·诱导后的细胞形态学观察 | 第90-91页 |
| ·油红O组织化学染色鉴定 | 第91页 |
| ·半定量RT-PCR检测脂肪细胞相关基因表达的变化 | 第91-92页 |
| ·结果 | 第92-93页 |
| ·诱导后细胞形态变化 | 第92页 |
| ·油红O组织化学染色鉴定 | 第92页 |
| ·RT-PCR鉴定脂肪相关基因表达的变化 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-94页 |
| ·小结 | 第94-95页 |
| 第三节 鸡胚胎生殖细胞定向诱导分化为肝细胞 | 第95-101页 |
| ·引言 | 第95页 |
| ·材料与方法 | 第95-98页 |
| ·实验动物 | 第95-96页 |
| ·主要试剂及配制 | 第96页 |
| ·鸡胚EG的传代培养及EB的形成 | 第96页 |
| ·鸡胚胎肝脏细胞的分离培养 | 第96页 |
| ·鸡胚肝脏细胞条件培养液诱导EG细胞 | 第96页 |
| ·分化细胞鉴定 | 第96-97页 |
| ·半定量RT-PCR检测肝脏细胞相关基因的表达 | 第97-98页 |
| ·结果 | 第98-100页 |
| ·诱导后细胞形态变化 | 第98页 |
| ·PAS组织化学染色鉴定 | 第98页 |
| ·免疫细胞化学检测肝细胞标志蛋白的表达 | 第98-99页 |
| ·RT-PCR鉴定肝细胞相关基因表达的变化 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-101页 |
| 第四节 鸡胚胎生殖细胞定向诱导分化为心肌细胞 | 第101-112页 |
| ·引言 | 第101-102页 |
| ·材料与方法 | 第102-106页 |
| ·实验动物 | 第102页 |
| ·主要器材 | 第102-103页 |
| ·主要试剂及配制 | 第103-104页 |
| ·鸡胚EG的传代培养及鉴定 | 第104页 |
| ·5-氮杂胞苷诱导EG细胞 | 第104页 |
| ·分化细胞免疫荧光染色 | 第104-105页 |
| ·分化细胞透射电镜观察 | 第105页 |
| ·RT-PCR检测心肌细胞特异性基因的表达 | 第105-106页 |
| ·结果 | 第106-110页 |
| ·5-aza诱导及EB的形成 | 第106-107页 |
| ·诱导后分化细胞的形态观察 | 第107-108页 |
| ·诱导后分化细胞的超微结构观察 | 第108页 |
| ·免疫细胞化学检测心肌细胞标志蛋白的表达 | 第108-109页 |
| ·RT-PCR鉴定心肌细胞相关基因的表达 | 第109-110页 |
| ·讨论 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 结论和创新点 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-127页 |
| 读博士期间发表及待发表的文章 | 第127-128页 |
| 个人简介 | 第128页 |
