| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 缩略词表 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-45页 |
| 1 棉花原生质体培养研究进展 | 第17-24页 |
| ·棉花原生质体培养研究的发展历程 | 第18-19页 |
| ·棉花原生质体再生植株体系 | 第19-21页 |
| ·外植体的选择 | 第20页 |
| ·原生质体分离 | 第20-21页 |
| ·原生质体培养 | 第21页 |
| ·原生质体的应用 | 第21-24页 |
| ·原生质体融合 | 第21-22页 |
| ·原生质体转化 | 第22页 |
| ·无性系变异筛选和突变育种 | 第22-23页 |
| ·原生质体在分子生物学中的应用 | 第23-24页 |
| 2 原生质体不对称融合 | 第24-35页 |
| ·植物不对称融合杂种的获得 | 第25-26页 |
| ·自发形成的不对称性杂种 | 第25-26页 |
| ·经诱导形成的不对称性杂种 | 第26页 |
| ·不对称融合杂种的筛选 | 第26-28页 |
| ·利用或人为地造成两亲本原生质的物理特异性差异进行选择 | 第27页 |
| ·利用或创造各种缺陷型或抗性互补选择 | 第27-28页 |
| ·利用或人为地造成细胞生长或分化能力的差异进行选择 | 第28页 |
| ·不对称融合杂种的鉴定 | 第28-31页 |
| ·形态学鉴定 | 第28-29页 |
| ·细胞学研究 | 第29页 |
| ·同工酶鉴定 | 第29-30页 |
| ·分子标记手段 | 第30-31页 |
| ·原位杂交技术 | 第31页 |
| ·不对称融合杂种的核质基因的遗传 | 第31-33页 |
| ·核基因的遗传 | 第31-32页 |
| ·胞质基因的遗传 | 第32-33页 |
| ·叶绿体基因组 | 第32-33页 |
| ·线粒体基因组 | 第33页 |
| ·植物原生质体不对称融合在育种上的应用 | 第33-35页 |
| ·克服生殖障碍，创造新种质 | 第34页 |
| ·转移有利性状，改善作物品质 | 第34-35页 |
| ·转移细胞质基因组，得到胞质杂种 | 第35页 |
| 3 细胞壁合成相关基因的表达研究 | 第35-43页 |
| ·高等植物细胞壁的成分和结构 | 第36-39页 |
| ·细胞壁的化学组成 | 第36-37页 |
| ·高等植物细胞壁的形成及分子组装模型 | 第37-39页 |
| ·植物细胞壁的生理功能 | 第39-41页 |
| ·细胞壁对细胞生长扩大的控制作用 | 第40页 |
| ·物质运输和信息传递 | 第40页 |
| ·防御与抗性 | 第40页 |
| ·其他功能 | 第40-41页 |
| ·细胞壁发育的分子生物学研究进展 | 第41-43页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第43-45页 |
| ·棉花原生质体培养和不对称融合研究 | 第43页 |
| ·原生质体再生细胞壁相关基因的研究 | 第43-45页 |
| 第二章 棉花原生质体培养和不对称融合研究 | 第45-76页 |
| 1 材料和方法 | 第47-53页 |
| ·植物材料 | 第47-53页 |
| ·原生质体分离、纯化和培养 | 第47-49页 |
| ·供体的处理 | 第49-50页 |
| ·原生质体融合、培养与植株再生 | 第50-51页 |
| ·Coker201和 G.klotzschianum原生质体融合与植株再生 | 第50-51页 |
| ·Ekang8与 G.stockii对称和不对称融合 | 第51页 |
| ·流式细胞仪倍性分析 | 第51页 |
| ·染色体压片观察 | 第51页 |
| ·RAPD和SSR检测再生植株基因组DNA | 第51-52页 |
| ·胞质基因组的鉴定 | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-73页 |
| ·戴维逊氏棉原生质体培养与植株再生 | 第53-57页 |
| ·紫外线对克劳茨基棉原生质体核失活的效果 | 第57-59页 |
| ·Coker 201和 G.klotzschianum不对称融合及杂种鉴定 | 第59-66页 |
| ·不对称融合及植株再生 | 第59-63页 |
| ·染色体压片记数 | 第63页 |
| ·再生植株核基因组分析 | 第63-65页 |
| ·再生植株胞质基因组分析 | 第65-66页 |
| ·Ekang8与 G.stockii融合及体细胞杂种的分析 | 第66-73页 |
| ·融合后原生质体培养和植株再生 | 第66-68页 |
| ·杂种植株的倍性分析和细胞学检测 | 第68-70页 |
| ·再生植株RAPD检测和SSR检测 | 第70-71页 |
| ·再生植株的胞质基因组分析 | 第71-73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| 第三章 原生质体再生细胞壁相关基因的表达谱分析 | 第76-106页 |
| 1 材料和方法 | 第77-82页 |
| ·实验材料 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-82页 |
| ·原生质体再生细胞壁的检测 | 第77-78页 |
| ·SSH文库构建 | 第78-79页 |
| ·差异筛选及表达谱分析 | 第79页 |
| ·测序及生物信息学分析 | 第79-80页 |
| ·RT-PCR和实时定量 PCR(qRT-PCR)分析 | 第80-82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-97页 |
| ·棉花原生质体在培养48h内再生细胞壁 | 第82-83页 |
| ·SSH文库的构建 | 第83-92页 |
| ·差异表达基因的表达谱分析 | 第92-95页 |
| ·代表基因的RT-PCR和qRT-PCR验证 | 第95-97页 |
| 3 讨论 | 第97-106页 |
| ·细胞壁构建和修饰相关的ESTs | 第97-99页 |
| ·糖代谢酶类在细胞壁合成过程中大量表达 | 第99-100页 |
| ·转运相关基因的分离 | 第100-101页 |
| ·与抗胁迫和防御相关基因的分离 | 第101-102页 |
| ·细胞壁与钙第二信使相互依存 | 第102-103页 |
| ·原生质体是研究细胞壁合成的理想材料 | 第103-104页 |
| ·SSH法分离植物差异表达基因及差异基因的验证 | 第104-106页 |
| 第四章 四个棉花类膨胀素基因的分子克隆及初步表达分析 | 第106-125页 |
| 1 材料和方法 | 第109-112页 |
| ·植物材料 | 第109页 |
| ·实验方法 | 第109-112页 |
| ·cDNA及基因组全长的扩增 | 第109页 |
| ·序列分析及生物信息学预测 | 第109-110页 |
| ·RNAi抑制表达载体的构建 | 第110页 |
| ·GFP融合表达载体的构建 | 第110页 |
| ·农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化 | 第110-111页 |
| ·农杆菌侵染拟南芥花序的遗传转化 | 第111-112页 |
| 2 实验结果 | 第112-121页 |
| ·四个类膨胀素基因的全长cDNA扩增 | 第112页 |
| ·潜在修饰位点的预测 | 第112-113页 |
| ·信号肤分析 | 第113-115页 |
| ·进化树分析 | 第115-116页 |
| ·多重序列比较 | 第116-117页 |
| ·基因组序列扩增以及内含子分析 | 第117页 |
| ·RNAi抑制表达载体的构建及转基因 | 第117-119页 |
| ·GFP融合表达载体的构建及转基因 | 第119-121页 |
| 3 讨论 | 第121-125页 |
| ·生物信息学在基因结构和功能预测中的应用 | 第121-122页 |
| ·expansin-like蛋白质的结构 | 第122-123页 |
| ·蛋白质的翻译后修饰 | 第123页 |
| ·基因的功能验证 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-153页 |
| 学术论文和会议摘要 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154页 |
