| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1. 蛋白质分离与纯化的一般原则 | 第12页 |
| 2. 蛋白质分离纯化的色谱技术 | 第12-15页 |
| ·凝胶排阻色谱 | 第13页 |
| ·疏水作用层析 | 第13-14页 |
| ·金属偶联色谱 | 第14-15页 |
| ·共价作用色谱 | 第15页 |
| ·等电聚焦层析 | 第15页 |
| 3. 离子交换色谱 | 第15-18页 |
| ·工作原理 | 第15-16页 |
| ·影响保留的因素 | 第16-17页 |
| ·离子交换色谱分离小分子溶质与生物大分子的差别 | 第17-18页 |
| ·离子交换层析条件的选择 | 第18页 |
| 4. 红细胞代用品研究 | 第18-21页 |
| ·红细胞代用品研究概况 | 第18-19页 |
| ·血红蛋白的提取、分离与纯化的研究状况 | 第19-20页 |
| ·全血中血红蛋白的提取和分离 | 第19-20页 |
| ·超高纯度血红蛋白的纯化 | 第20页 |
| ·血红蛋白修饰产物的分离纯化 | 第20-21页 |
| 5. 本文研究内容、目的和创新点 | 第21-23页 |
| 第二章 双组分及三组分混合物在离子交换层析中的分离纯化策略 | 第23-52页 |
| 1. 引言 | 第23页 |
| 2. 蛋白在离子交换层析上的分离纯化策略 | 第23-31页 |
| ·离子交换层析纯化蛋白质需考虑的五个方面 | 第24-25页 |
| ·离子交换层析中蛋白质洗脱曲线的突跃区 | 第25-26页 |
| ·双组分及三组分混合物中目标蛋白在离子交换层析上纯化模式 | 第26-31页 |
| ·双组分混合物分离纯化模式 | 第26-27页 |
| ·三组分混合物分离纯化策略 | 第27-31页 |
| 3. 实验设计 | 第31-36页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·实验试剂 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31-32页 |
| ·双组分蛋白混合物离子交换柱层析实验设计 | 第32-33页 |
| ·溶菌酶的分离纯化及浓缩 | 第32页 |
| ·猪血红蛋白的分离纯化 | 第32-33页 |
| ·三组分蛋白混合物离子交换柱层析实验设计 | 第33-34页 |
| ·纯化策略Ⅰ实验设计 | 第33-34页 |
| ·纯化策略Ⅱ实验设计 | 第34页 |
| ·纯化策略Ⅲ实验设计 | 第34页 |
| ·蛋白质检测分析方法 | 第34-36页 |
| ·高效液相色谱法检测 | 第34-35页 |
| ·紫外(UV)吸收法测定蛋白质浓度 | 第35-36页 |
| 4. 结果与分析 | 第36-50页 |
| ·双组分蛋白混合物离子交换柱层析 | 第36-42页 |
| ·溶菌酶的分离纯化及浓缩 | 第36-39页 |
| ·猪血红蛋白的分离纯化 | 第39-42页 |
| ·三组分蛋白混合物离子交换柱层析实验设计 | 第42-50页 |
| ·纯化策略Ⅰ实验设计 | 第42-45页 |
| ·纯化策略Ⅱ实验设计 | 第45-47页 |
| ·纯化策略Ⅲ实验设计 | 第47-50页 |
| 5. 本章小结 | 第50-52页 |
| 第三章 猪全血中分离纯化高纯度猪血红蛋白的工艺 | 第52-72页 |
| 1. 引言 | 第52页 |
| 2. 实验材料 | 第52-53页 |
| ·实验试剂 | 第52-53页 |
| ·仪器设备 | 第53页 |
| 3. 实验方法 | 第53-58页 |
| ·猪血蛋白粗品制备 | 第53-54页 |
| ·猪血红细胞的洗涤和血红蛋白的释放 | 第53-54页 |
| ·超滤 | 第54页 |
| ·层析柱处理 | 第54页 |
| ·阴离子交换层析 pH值的选择 | 第54页 |
| ·阴离子交换层析缓冲体系的选择 | 第54页 |
| ·阴离子交换层析离子强度的选择 | 第54页 |
| ·穿透曲线和动态柱容量的测定 | 第54-55页 |
| ·工艺路线的选择和优化 | 第55页 |
| ·分析检测 | 第55-58页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第55-57页 |
| ·猪血红蛋白纯度检测 | 第57页 |
| ·血红蛋白浓度及高铁血红蛋白含量测定 | 第57-58页 |
| ·磷脂含量测定 | 第58页 |
| 4. 结果与分析 | 第58-71页 |
| ·血红蛋白的释放和粗纯 | 第58页 |
| ·缓冲液 pH值的选择 | 第58-60页 |
| ·pH值对血红蛋白分离的影响 | 第58-60页 |
| ·pH值对高铁血红蛋白生成的影响 | 第60页 |
| ·阴离子交换层析缓冲体系的选择 | 第60-61页 |
| ·缓冲液离子强度的选择 | 第61-64页 |
| ·离子强度对血红蛋白分离的影响 | 第61-63页 |
| ·离子强度对高铁血红蛋白生成的影响 | 第63-64页 |
| ·穿透曲线和有效柱容量测定 | 第64页 |
| ·磷酸盐缓冲体系中盐浓度与电导值关系的建立 | 第64-65页 |
| ·最适流穿浓度选择 | 第65-66页 |
| ·阴离子交换介质动态吸附容量测定 | 第66-67页 |
| ·工艺选择 | 第67-68页 |
| ·分析检测试验结果 | 第68-71页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第68页 |
| ·高效液相色谱分析 | 第68-70页 |
| ·磷脂检测 | 第70-71页 |
| 5. 本章小结 | 第71-72页 |
| 第四章 戊二醛聚合猪血红蛋白的制备及纯化 | 第72-83页 |
| 1. 引言 | 第72页 |
| 2. 实验材料 | 第72页 |
| ·实验试剂 | 第72页 |
| ·仪器设备 | 第72页 |
| 3. 实验方法 | 第72-74页 |
| ·猪血红蛋白的制备 | 第72-73页 |
| ·戊二醛聚合猪血红蛋白的制备 | 第73页 |
| ·戊二醛聚合猪血红蛋白的纯化 | 第73页 |
| ·工艺路线A | 第73页 |
| ·工艺路线B | 第73页 |
| ·工艺路线C | 第73页 |
| ·戊二醛聚合猪血红蛋白分子量的测定 | 第73-74页 |
| 4. 结果与分析 | 第74-82页 |
| ·工艺研究结果与讨论 | 第74-78页 |
| ·戊二醛聚合猪血红蛋白的分子量分布 | 第74页 |
| ·工艺路线A实验结果 | 第74-76页 |
| ·工艺路线B实验结果 | 第76页 |
| ·工艺路线C实验结果 | 第76-78页 |
| ·工艺选择 | 第78页 |
| ·工艺优化 | 第78-82页 |
| 5. 本章小结 | 第82-83页 |
| 第五章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 1. 主要结论 | 第83-84页 |
| 2. 展望 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |