| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-29页 |
| ·胶原蛋白 | 第9-12页 |
| ·胶原蛋白的结构特点和组成 | 第9页 |
| ·胶原蛋白的存在与分类 | 第9页 |
| ·胶原蛋白的功能和应用 | 第9-12页 |
| ·类人胶原蛋白 | 第12页 |
| ·大肠杆菌高密度发酵 | 第12-17页 |
| ·高密度发酵 | 第12-14页 |
| ·大肠杆菌高密度发酵的影响因素 | 第14-17页 |
| ·大肠杆菌表达系统研究进展 | 第17页 |
| ·实验设计与响应面优化法 | 第17-20页 |
| ·蛋白质的分离纯化 | 第20-24页 |
| ·生物分离工程概述 | 第20-21页 |
| ·发酵液的预处理 | 第21页 |
| ·蛋白质的分离纯化 | 第21-24页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-29页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第29-37页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·菌种 | 第29页 |
| ·实验仪器设备 | 第29-30页 |
| ·实验试剂 | 第30页 |
| ·菌种培养方法 | 第30页 |
| ·菌种活化 | 第30页 |
| ·摇瓶培养 | 第30页 |
| ·发酵罐发酵 | 第30页 |
| ·分析测定方法 | 第30-36页 |
| ·菌体浓度(OD)测定方法 | 第30-31页 |
| ·菌体湿重的测定 | 第31页 |
| ·菌体干重测定 | 第31页 |
| ·发酵液中糖含量测定 | 第31页 |
| ·甘油含量的测定方法 | 第31-33页 |
| ·氨基氮的测定 | 第33页 |
| ·类人胶原蛋白的定性与定量测定 | 第33-36页 |
| 参考文献 | 第36-37页 |
| 第三章 发酵培养基的优化 | 第37-47页 |
| ·实验方法与实验设计 | 第37页 |
| ·单因素实验筛选优化 | 第37页 |
| ·Plackett-Burman实验设计 | 第37页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第37页 |
| ·Box-Behnken设计 | 第37页 |
| ·试验结果与分析 | 第37-45页 |
| ·不同碳源对菌体生长和HLCⅢ产量的影响 | 第37-38页 |
| ·不同氮源对菌体生长和类人胶原蛋白产量的影响 | 第38-39页 |
| ·通过Plackett-Burman设计筛选主要影响因素 | 第39-41页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第41页 |
| ·Box-Behnken设计实验 | 第41-45页 |
| ·验证试验 | 第45页 |
| ·结果讨论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
| 第四章 发酵过程参数的优化 | 第47-56页 |
| ·实验方法和实验设计 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-55页 |
| ·Plackett-Burman设计实验 | 第47-49页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第49页 |
| ·Box-Behnken设计实验 | 第49-53页 |
| ·验证试验 | 第53页 |
| ·实验结果与讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 第五章 补料策略研究与优化 | 第56-59页 |
| ·实验方案 | 第56-57页 |
| ·补糖方式的选择 | 第56页 |
| ·补氮方式的选择 | 第56页 |
| ·比生长速率的选择 | 第56-57页 |
| ·实验结果与讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第六章 类人胶原蛋白Ⅲ的分离纯化初步研究 | 第59-65页 |
| ·发酵液的预处理 | 第59页 |
| ·菌体细胞破碎 | 第59页 |
| ·沉淀 | 第59-61页 |
| ·透析和电泳 | 第61页 |
| ·层析 | 第61-62页 |
| ·吸附条件的确定 | 第61页 |
| ·洗脱条件的确定 | 第61-62页 |
| ·纯化结果 | 第62-63页 |
| ·结果讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 第七章 总结与展望 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |