摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
·木霉菌的生防作用机制 | 第12-13页 |
·竞争作用 | 第12页 |
·重寄生作用 | 第12-13页 |
·抗生作用 | 第13页 |
·诱导抗性 | 第13页 |
·协同拮抗作用 | 第13页 |
·木霉菌的生防应用现状 | 第13-14页 |
·木霉菌的分子生物学研究进展 | 第14-15页 |
·丝状真菌基因功能研究的方法 | 第15-19页 |
·丝状真菌遗传转化系统 | 第15-16页 |
·基因表达时空性分析 | 第16-17页 |
·基因敲除技术 | 第17页 |
·RNAi技术 | 第17页 |
·超表达技术 | 第17-18页 |
·转座子标签技术 | 第18页 |
·酵母单/双杂交技术 | 第18页 |
·T-DNA标签技术 | 第18-19页 |
·T-DNA标签技术在木霉菌中的研究进展 | 第19-22页 |
·ATMT转化木霉菌形成T-DNA标签的机理 | 第19页 |
·T-DNA标签基因的分离克隆方法 | 第19-22页 |
·T-DNA标签法在木霉菌功能基因研究中的应用 | 第22页 |
·丝状真菌突变子筛选的研究 | 第22-23页 |
·本研究的目的意义、主要内容及技术路线 | 第23-24页 |
·本研究的目的意义 | 第23页 |
·本研究的主要内容 | 第23页 |
·本研究的技术路线 | 第23-24页 |
第二章 根癌农杆菌介导的哈茨木霉菌Th-33 T-DNA插入突变体库的构建 | 第24-29页 |
·材料与方法 | 第24-27页 |
·菌株 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要培养基 | 第24-26页 |
·农杆菌EHA105 转化哈茨木霉菌Th-33 及转化子的保存 | 第26-27页 |
·结果与分析 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第三章 表型突变株的筛选 | 第29-34页 |
·材料与方法 | 第29-30页 |
·菌株材料 | 第29页 |
·突变株产分生孢子数量的检测 | 第29页 |
·产孢突变株分生孢子器形态观察 | 第29-30页 |
·哈茨木霉菌T-DNA插入突变体库中拮抗能力变异突变株的筛选 | 第30页 |
·实验结果与分析 | 第30-33页 |
·哈茨木霉菌T-DNA插入突变体库中产孢突变株的获得 | 第30-31页 |
·哈茨木霉菌T-DNA插入突变体库中拮抗能力变异突变株的获得 | 第31-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第四章 突变株的分子生物学鉴定 | 第34-43页 |
·材料与方法 | 第34-40页 |
·菌株材料 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·引物 | 第34页 |
·主要溶液的配制 | 第34-35页 |
·根癌农杆菌EHA105 菌株的培养及质粒的提取 | 第35-36页 |
·木霉菌菌丝体的培养和收集 | 第36页 |
·木霉菌基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
·木霉菌基因组DNA的紫外比色检测 | 第37页 |
·木霉菌基因组 DNA的电泳检测 | 第37页 |
·T-DNA插入的PCR检测 | 第37-38页 |
·T-DNA插入的Southern blot检测 | 第38-40页 |
·结果与分析 | 第40-42页 |
·表型突变子和野生型木霉菌DNA的提取 | 第40页 |
·表型突变子中T-DNA插入的PCR验证 | 第40-41页 |
·转化子中T-DNA插入情况分析 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第五章 产孢突变相关基因的克隆 | 第43-51页 |
·材料与方法 | 第43-47页 |
·试剂 | 第43页 |
·引物 | 第43-44页 |
·T-DNA标签基因的克隆 | 第44-45页 |
·标签基因的回收 | 第45-46页 |
·回收产物的克隆、测序、比对 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-50页 |
·产孢突变株侧翼序列的获得 | 第47-48页 |
·产孢突变株侧翼序列的分析 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第六章全文结论 | 第51-52页 |
·结论 | 第51页 |
·后续工作 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |