摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
第一章 绪论-蛇毒凝血因子IX/X结合蛋白家族和血浆凝血系统 | 第11-31页 |
第一节 血液凝固过程 | 第11-13页 |
第二节 蛇毒凝血因子IX/X结合蛋白家族研究进展 | 第13-17页 |
一、蛇毒的组成 | 第13-14页 |
二、蛇毒C-型凝集素类似蛋白 | 第14-15页 |
三、蛇毒凝血因子IX/X结合蛋白家族 | 第15-17页 |
第三节 金属蛋白的常用研究方法 | 第17-22页 |
一、等温滴定微量热(Isothermal Titration Calorimetry, ITC) | 第18-19页 |
二、荧光分光光度法 | 第19-20页 |
三、差示扫描微量热(DSC) | 第20页 |
四、表面等离子体共振技术(SPR) | 第20-22页 |
参考文献 | 第22-31页 |
第二章 江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白的分离纯化 | 第31-42页 |
·引言 | 第31页 |
·实验部分 | 第31-33页 |
·仪器和材料 | 第31-32页 |
·江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白分离纯化 | 第32-33页 |
·抗凝血活性测定 | 第33页 |
·江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白的纯度和分子量测定 | 第33-34页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第33页 |
·毛细管等电聚焦测定等电点(pI)和纯度 | 第33-34页 |
·MALDI-TOF-MS(激光辅助解析飞行时间质谱) | 第34页 |
·结果与讨论 | 第34-40页 |
·江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白(AHP IX-bp)的分离纯化 | 第34-37页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳验证纯度 | 第37-38页 |
·毛细管等电聚焦(CIEF)测定AHP IX-bp的等电点和纯度 | 第38-39页 |
·MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解吸飞行时间质谱)测定分子量 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-42页 |
第三章 AHP IX-bp的抗凝作用靶点研究 | 第42-54页 |
·引言 | 第42页 |
·实验部分 | 第42-44页 |
·仪器和材料 | 第42-43页 |
·AHP IX-bp结合的金属离子鉴定 | 第43页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定AHP IX-bp与凝血因子X结合 | 第43页 |
·表面等离子体共振法(SPR)测定AHP IX-bp与凝血因子X结合 | 第43-44页 |
·等温滴定微量热法(ITC)测定金属离子与AHP IX-bp的相互作用 | 第44页 |
·结果与讨论 | 第44-51页 |
·江浙蝮蛇毒AHP IX-bp中金属离子测定 | 第44-45页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测镁离子诱导AHP IX-bp与凝血因子Xa的结合 | 第45-46页 |
·表面等离子体共振(SPR)分析AHP IX-bp与凝血因子X结合 | 第46-48页 |
·等温滴定微量热法(ITC)检测apo-AHP IX-bp与镁离子结合 | 第48-50页 |
·镁离子调节AHP IX-bp与FXa结合机理的探讨 | 第50-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-54页 |
第四章 钙、锌离子与AHP IX/X-bp的结合性质以及对其结构和稳定性的影响 | 第54-78页 |
·引言 | 第54-55页 |
·实验部分 | 第55-58页 |
·仪器和材料 | 第55页 |
·apo-AHP IX/X-bp的制备 | 第55-56页 |
·等温滴定微量热(ITC)实验 | 第56页 |
·蛋白质分子荧光测定 | 第56页 |
·盐酸胍(GdnHCl)诱导AHP IX/X-bp实验 | 第56-57页 |
·差示扫描微量热法(DSC)检测AHP IX/X-bp热变性 | 第57页 |
·圆二色谱(CD)实验 | 第57-58页 |
·结果与讨论 | 第58-75页 |
·等温滴定微量热(ITC)实验检测钙离子和锌离子与apo-AHP IX/X-bp的结合 | 第58-61页 |
·通过AHP IX/X-bp内源荧光的变化检测钙、锌离子对AHP IX/X-bp结构的影响 | 第61-65页 |
·钙、锌离子对AHP IX/X-bp二级结构的影响 | 第65-66页 |
·铽离子滴定验证金属离子结合位点个数 | 第66-68页 |
·钙离子和锌离子对盐酸胍诱导AHP IX/X-bp解折叠的影响 | 第68-72页 |
·金属离子对AHP IX/X-bp热稳定性的影响 | 第72-75页 |
·小结 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-78页 |
第五章 凝血因子IX/X的分离纯化 | 第78-85页 |
·引言 | 第78页 |
·实验部分 | 第78-80页 |
·仪器和材料 | 第78页 |
·猪凝血因子IX的分离纯化 | 第78-80页 |
·结果与讨论 | 第80-83页 |
·猪血浆提纯物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第80-82页 |
·猪血浆提纯物的ESI电喷雾质谱分析 | 第82-83页 |
·猪血凝血因子IX的分离结果 | 第83页 |
·小结 | 第83页 |
参考文献 | 第83-85页 |
硕士期间发表和参与的主要论文 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |