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江浙蝮蛇毒凝血因子IX/X结合蛋白的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一章 绪论-蛇毒凝血因子IX/X结合蛋白家族和血浆凝血系统第11-31页
 第一节 血液凝固过程第11-13页
 第二节 蛇毒凝血因子IX/X结合蛋白家族研究进展第13-17页
  一、蛇毒的组成第13-14页
  二、蛇毒C-型凝集素类似蛋白第14-15页
  三、蛇毒凝血因子IX/X结合蛋白家族第15-17页
 第三节 金属蛋白的常用研究方法第17-22页
  一、等温滴定微量热(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)第18-19页
  二、荧光分光光度法第19-20页
  三、差示扫描微量热(DSC)第20页
  四、表面等离子体共振技术(SPR)第20-22页
 参考文献第22-31页
第二章 江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白的分离纯化第31-42页
   ·引言第31页
   ·实验部分第31-33页
     ·仪器和材料第31-32页
     ·江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白分离纯化第32-33页
     ·抗凝血活性测定第33页
   ·江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白的纯度和分子量测定第33-34页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第33页
     ·毛细管等电聚焦测定等电点(pI)和纯度第33-34页
     ·MALDI-TOF-MS(激光辅助解析飞行时间质谱)第34页
   ·结果与讨论第34-40页
     ·江浙蝮蛇毒凝血因子IX结合蛋白(AHP IX-bp)的分离纯化第34-37页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳验证纯度第37-38页
     ·毛细管等电聚焦(CIEF)测定AHP IX-bp的等电点和纯度第38-39页
     ·MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解吸飞行时间质谱)测定分子量第39-40页
   ·小结第40-41页
 参考文献第41-42页
第三章 AHP IX-bp的抗凝作用靶点研究第42-54页
   ·引言第42页
   ·实验部分第42-44页
     ·仪器和材料第42-43页
     ·AHP IX-bp结合的金属离子鉴定第43页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定AHP IX-bp与凝血因子X结合第43页
     ·表面等离子体共振法(SPR)测定AHP IX-bp与凝血因子X结合第43-44页
     ·等温滴定微量热法(ITC)测定金属离子与AHP IX-bp的相互作用第44页
   ·结果与讨论第44-51页
     ·江浙蝮蛇毒AHP IX-bp中金属离子测定第44-45页
     ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测镁离子诱导AHP IX-bp与凝血因子Xa的结合第45-46页
     ·表面等离子体共振(SPR)分析AHP IX-bp与凝血因子X结合第46-48页
     ·等温滴定微量热法(ITC)检测apo-AHP IX-bp与镁离子结合第48-50页
     ·镁离子调节AHP IX-bp与FXa结合机理的探讨第50-51页
   ·小结第51-52页
 参考文献第52-54页
第四章 钙、锌离子与AHP IX/X-bp的结合性质以及对其结构和稳定性的影响第54-78页
   ·引言第54-55页
   ·实验部分第55-58页
     ·仪器和材料第55页
     ·apo-AHP IX/X-bp的制备第55-56页
     ·等温滴定微量热(ITC)实验第56页
     ·蛋白质分子荧光测定第56页
     ·盐酸胍(GdnHCl)诱导AHP IX/X-bp实验第56-57页
     ·差示扫描微量热法(DSC)检测AHP IX/X-bp热变性第57页
     ·圆二色谱(CD)实验第57-58页
   ·结果与讨论第58-75页
     ·等温滴定微量热(ITC)实验检测钙离子和锌离子与apo-AHP IX/X-bp的结合第58-61页
     ·通过AHP IX/X-bp内源荧光的变化检测钙、锌离子对AHP IX/X-bp结构的影响第61-65页
     ·钙、锌离子对AHP IX/X-bp二级结构的影响第65-66页
     ·铽离子滴定验证金属离子结合位点个数第66-68页
     ·钙离子和锌离子对盐酸胍诱导AHP IX/X-bp解折叠的影响第68-72页
     ·金属离子对AHP IX/X-bp热稳定性的影响第72-75页
   ·小结第75-77页
 参考文献第77-78页
第五章 凝血因子IX/X的分离纯化第78-85页
   ·引言第78页
   ·实验部分第78-80页
     ·仪器和材料第78页
     ·猪凝血因子IX的分离纯化第78-80页
   ·结果与讨论第80-83页
     ·猪血浆提纯物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第80-82页
     ·猪血浆提纯物的ESI电喷雾质谱分析第82-83页
     ·猪血凝血因子IX的分离结果第83页
   ·小结第83页
 参考文献第83-85页
硕士期间发表和参与的主要论文第85-86页
致谢第86页

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