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日本血吸虫Argonaute蛋白的初步研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
符号说明第8-12页
上篇 文献综述第12-22页
 第一章 血吸虫生物学概论第12-15页
  1 血吸虫病第12页
  2 血吸虫生活史第12-13页
  3 血吸虫致病作用第13-14页
  4 血吸虫病的防治第14-15页
 第二章 RNA 干扰技术的研究概况第15-20页
  1 RNA 干扰现象的发现第15-16页
  2 RNA 干扰的原理第16-17页
  3 RNA 干扰技术的应用第17-20页
   ·RNAi 在基因组学中的应用第18页
   ·RNAi 在抗病毒治疗中的应用第18-19页
   ·药物开发第19-20页
 第三章 Argonaute 蛋白研究进展第20-22页
  1 Argonaute 蛋白家族第20页
  2 Argonaute 蛋白结构第20-22页
下篇 研究内容第22-82页
 第一章 日本血吸虫 AGO1 蛋白的研究第22-54页
  1 材料第22-23页
   ·实验动物第22页
   ·主要试剂第22-23页
   ·主要仪器第23页
  2 方法第23-39页
   ·溶液的配制第23-26页
   ·EST 来源和RACE 引物第26页
   ·总RNA 的提取第26-27页
   ·5' RACE 扩增第27-31页
   ·AGO1 生物信息学分析第31页
   ·实时荧光定量PCR 检测AGO1 期别转录差异第31-33页
   ·AGO1 保守功能域及全长的原核表达质粒的构建第33-36页
   ·AGO1 保守功能域及全长蛋白的原核表达第36-37页
   ·重组蛋白的纯化第37-38页
   ·AGO1 多克隆抗体的制备第38-39页
   ·免疫印迹分析AGO1 性别差异表达第39页
  3 结果第39-52页
   ·编码AGO1 基因全长cDNA 获得及生物信息学分析第39-45页
   ·AGO1 基因转录期别差异分析第45页
   ·AGO1 保守功能域和全长原核表达质粒的构建第45-47页
   ·AGO1 保守功能域和全长的原核表达及蛋白纯化第47-51页
   ·AGO1 多克隆抗体的制备及性别差异表达分析第51-52页
  4 讨论第52-54页
 第二章 日本血吸虫 AGO2 蛋白的研究第54-75页
  1 材料第54-55页
   ·实验动物第54页
   ·主要试剂第54页
   ·主要仪器第54-55页
  2 方法第55-64页
   ·EST 来源和RACE 引物第55页
   ·总RNA 的提取第55页
   ·RACE 扩增第55-60页
   ·生物信息学分析第60页
   ·AGO2 保守功能域原核表达载体的构建第60-62页
   ·AGO2 保守功能域的原核表达第62-63页
   ·重组蛋白的纯化第63页
   ·AGO2 多克隆抗体的制备第63页
   ·免疫印迹分析AGO2 性别和期别表达差异第63-64页
  3 结果第64-74页
   ·编码AGO2 基因全长cDNA 获得及生物信息学分析第64-69页
   ·AGO2 保守功能域原核表达质粒的构建第69-71页
   ·AGO2 保守功能域的原核表达及蛋白纯化第71-72页
   ·AGO2 多克隆抗体的制备及性别期别差异表达分析第72-74页
  4 讨论第74-75页
 第三章 RNA 干扰 AGO1 基因影响其转录表达的研究第75-82页
  1 材料第75-77页
   ·实验动物第75页
   ·主要试剂第75-76页
   ·siRNA第76页
   ·童虫培养基成分第76-77页
   ·主要仪器第77页
  2 方法第77-79页
   ·兔红细胞的制备第77页
   ·日本血吸虫14d 童虫的收集及体外培养第77-78页
   ·荧光定量PCR 分析干扰效果第78页
   ·免疫印迹分析干扰效果第78-79页
  3 结果第79-80页
   ·虫体成活率分析第79页
   ·荧光定量PCR 分析干扰效果第79页
   ·免疫印迹分析干扰效果第79-80页
  4 讨论第80-82页
参考文献第82-88页
全文结论第88-89页
攻读硕士学位期间发表的文章第89-90页
致谢第90-91页

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