| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 英文缩略符及其中英文对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 1 水稻硝态氮营养生理 | 第15-18页 |
| 2 植物硝态氮跨膜运输的生理机制 | 第18-20页 |
| 3 植物硝态氮跨膜运输的分子机制 | 第20-25页 |
| 4 植物体内硝态氮的利用与再利用 | 第25-27页 |
| 5 RNAi干扰技术及其应用 | 第27-30页 |
| 6 基因芯片技术及其应用 | 第30-33页 |
| 第二章 水稻硝运输蛋白及其辅助蛋白基因的表达特征 | 第33-49页 |
| 1 材料方法 | 第34-38页 |
| ·水稻品种 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-46页 |
| ·OsNRT2.3a和OsNRT2.3b基因鉴定 | 第38-43页 |
| ·OsNAR2s和OsNRT2s在水稻体内表达部位 | 第43-44页 |
| ·不同浓度的硝态氮和铵态氮对OsNAR2s和OsNRT2s表达的影响 | 第44-45页 |
| ·氮代谢物对OsNAR2.1和OsNRT2s表达的影响 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 水稻硝态氮运输双组份系统 | 第49-61页 |
| 1 材料与方法 | 第49-55页 |
| ·材料与主要试剂 | 第49页 |
| ·蛙卵表达载体构建 | 第49-53页 |
| ·mRNA体外合成 | 第53页 |
| ·蛙卵预处理及微注射 | 第53-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-59页 |
| ·NAR2家族蛋白序列分析 | 第55-56页 |
| ·蛙卵异源表达OsNAR2s和OsNRT2s | 第56-58页 |
| ·OsNRT2.1/OsNRT2.2、OsNRT2.3a对硝态氮的亲和力 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 水稻osnar2.1突变体获得及其功能分析 | 第61-89页 |
| 1. 材料方法 | 第62-76页 |
| ·材料与主要试剂 | 第62页 |
| ·RNAi载体及亚细胞定位载体构建 | 第62-68页 |
| ·水稻转化 | 第68-71页 |
| ·植物总DNA和蛋白提取 | 第71页 |
| ·植株氮素吸收分析 | 第71-72页 |
| ·水稻根系细胞膜电位的测定 | 第72页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第72-75页 |
| ·抗体制备及Western杂交 | 第75-76页 |
| 2. 结果与分析 | 第76-86页 |
| ·OsNAR2.1沉默转基因苗T_1代分子鉴定 | 第76-78页 |
| ·OsNAR2.1沉默对OsNRT2s,OsNAR2s和OsNRT1.1表达的影响 | 第78-80页 |
| ·OsNAR2.1-mGFP融合蛋白洋葱表皮定位分析 | 第80-81页 |
| ·OsNAR2.1沉默对水稻植株生长和总氮积累的影响 | 第81-84页 |
| ·OsNAR2.1沉默对水稻植株硝态氮吸收速率的影响 | 第84-85页 |
| ·OsNAR2.1沉默对水稻根系细胞膜电位的影响 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-89页 |
| 第五章 OsNAR2.1沉默对水稻生长的影响 | 第89-99页 |
| 1 材料方法 | 第90页 |
| ·材料 | 第90页 |
| ·根系生长分析 | 第90页 |
| ·硝酸还原酶活性测定 | 第90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-96页 |
| ·OsNAR2.1沉默对水稻根系的影响 | 第90-91页 |
| ·与拟南芥ANR1同源基因OsMADS的表达特征 | 第91-92页 |
| ·OsNAR2.1沉默对水稻硝酸还原酶活性的影响 | 第92-93页 |
| ·OsNAR2.1沉默对水稻产量的影响 | 第93-96页 |
| 3 讨论 | 第96-99页 |
| 第六章 水稻osnar2.1突变体全基因组表达分析 | 第99-109页 |
| 1 材料与方法 | 第99-103页 |
| ·材料与试验设计 | 第99页 |
| ·RNA提取与双链cDNA合成 | 第99-102页 |
| ·体外转录合成生物素标记cRNA | 第102页 |
| ·芯片杂交与数据分析 | 第102-103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-107页 |
| ·硝态氮处理根系差异基因体现的显著性功能分析 | 第103-105页 |
| ·硝态氮处理叶片差异基因体现的显著性功能分析 | 第105-106页 |
| ·控制通气组织形成相关基因表达特征 | 第106-107页 |
| 3 讨论 | 第107-109页 |
| 全文总结 | 第109-111页 |
| 创新点 | 第111-113页 |
| 展望 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-125页 |
| 附录 | 第125-141页 |
| 文章和专利 | 第141-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
