摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
·胰蛋白酶 | 第9页 |
·胰蛋白酶的应用与研究 | 第9-14页 |
·固定化 | 第10-11页 |
·定点改造和体外定向进化 | 第11-12页 |
·化学修饰 | 第12-14页 |
·凝集素亲和层析 | 第14-15页 |
·本研究目的与意义 | 第15-17页 |
第二章 利用琼脂糖凝胶CL-6B纯化蓖麻凝集素 | 第17-24页 |
·实验用品 | 第17-18页 |
·材料与试剂 | 第17页 |
·实验仪器 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-20页 |
·蛋白粗提液的制备 | 第18-19页 |
·琼脂糖凝胶CL-6B亲和层析 | 第19页 |
·SDS-PAGE检测 | 第19页 |
·凝血活性与凝血活性抑制的测定 | 第19-20页 |
·实验结果与分析 | 第20-23页 |
·亲和层析结果 | 第20-21页 |
·SDS-PAGE结果 | 第21-22页 |
·凝血活性与凝血活性抑制测定结果 | 第22-23页 |
·结论 | 第23-24页 |
第三章 蓖麻凝集素亲和层析柱制备 | 第24-31页 |
·实验用品 | 第24页 |
·材料与试剂 | 第24页 |
·仪器 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-27页 |
·蓖麻凝集素亲和层析柱的制备 | 第24-26页 |
·蓖麻凝集素亲和层析住对半乳糖基化蛋白质分离效果检测 | 第26-27页 |
·实验结果与分析 | 第27-29页 |
·蓖麻凝集素偶联效果 | 第27页 |
·蓖麻凝集素亲和层析柱对半乳糖基化BSA的分离效果 | 第27-29页 |
·SDS-PAGE结果 | 第29页 |
·结论 | 第29-31页 |
第四章 利用半乳糖修饰胰蛋白酶及其性质检测 | 第31-43页 |
·实验用品 | 第31页 |
·材料与试剂 | 第31页 |
·仪器 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-35页 |
·末端基团胺化半乳糖的合成 | 第31-32页 |
·胰蛋白酶的化学修饰(半乳糖基化胰蛋白酶的制备) | 第32页 |
·反应产物浓度测定 | 第32-33页 |
·苯酚-硫酸显色法测定修饰后产物的半乳糖含量 | 第33-34页 |
·各反应时间下修饰产物酶活性检测 | 第34页 |
·最佳反应时间下修饰产物的分离纯化 | 第34-35页 |
·修饰前后的胰蛋白酶光学检测 | 第35页 |
·半乳糖基化胰蛋白酶半乳糖含量测定 | 第35页 |
·修饰前后的胰蛋白酶热稳定性检测 | 第35页 |
·实验结果与分析 | 第35-41页 |
·各反应时间下修饰产物浓度测定 | 第35-36页 |
·各反应时间下修饰产物半乳糖含量测定 | 第36-37页 |
·各反应时间下修饰产物的相对活性 | 第37-38页 |
·最佳反应时间下修饰产物的分离纯化 | 第38-39页 |
·修饰前后的胰蛋白酶光学检测 | 第39-40页 |
·修饰后的胰蛋白酶半乳糖含量 | 第40-41页 |
·修饰前后的胰蛋白酶热稳定性比较 | 第41页 |
·结论 | 第41-43页 |
第五章 小结与展望 | 第43-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附录 | 第51-53页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53-54页 |
致谢 | 第54页 |