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牛病毒性腹泻病毒E2蛋白和NS3蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-23页
   ·BVDV 的生物学特性第11-12页
     ·BVDV 的分类地位第11页
     ·BVDV 的形态特征第11-12页
     ·BVDV 的生物多样性第12页
   ·BVDV 的基因组结构第12-13页
     ·BVDV 的5'-UTR 和3'-UTR第12-13页
     ·BVDV 的ORF第13页
   ·BVDV 结构蛋白的研究进展第13-15页
   ·BVDV 非结构蛋白的研究进展第15-17页
   ·牛病毒性腹泻-黏膜病的临床类型第17-18页
     ·持续性感染第17页
     ·黏膜病第17页
     ·急性BVD第17-18页
     ·繁殖障碍第18页
     ·血小板减少和出血性综合征第18页
   ·BVD 病原学诊断方法的进展第18-20页
     ·病毒分离第18-19页
     ·电镜检查第19页
     ·免疫过氧化物酶(IP)技术第19页
     ·酶联免疫吸附试验检测抗原第19页
     ·反转录-多聚酶链式反应(RT–PCR)第19-20页
     ·核酸杂交试验(NAH)技术第20页
   ·牛病毒性腹泻病血清学检测方法进展第20-21页
     ·病毒中和试验第20页
     ·酶联免疫吸附试验检测抗体第20-21页
   ·BVDV 单克隆抗体的研究及应用第21-22页
   ·研究的目的与意义第22-23页
2 材料与方法第23-33页
   ·材料第23-25页
     ·病毒、质粒、菌株第23页
     ·实验动物与细胞第23页
     ·血清第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器和设备第23-24页
     ·主要溶液配制第24-25页
   ·方法第25-33页
     ·免疫原和筛选抗原的制备第25-28页
     ·动物免疫第28页
     ·单克隆抗体检测方法的建立第28-29页
     ·单克隆抗体的制备第29-30页
     ·杂交瘤细胞鉴定第30-31页
     ·单克隆抗体的鉴定第31-33页
3 结果第33-43页
   ·重组质粒pcDNA3.1-E2 酶切鉴定结果第33页
   ·大量提取的质粒pcDNA3.1-E2 的浓度及纯度第33-34页
   ·重组 BVDV-NS3 蛋白的 SDS-PAGE 分析第34-35页
   ·杂交瘤细胞间接ELISA 筛选方法的建立第35-36页
   ·阳性杂交瘤细胞的筛选结果第36页
   ·杂交瘤细胞株的鉴定第36-39页
     ·杂交瘤细胞染色体数分析第36-38页
     ·杂交瘤细胞稳定性分析第38-39页
   ·单克隆抗体的鉴定第39-43页
     ·单克隆抗体Ig 类型的鉴定第39-40页
     ·杂交瘤细胞上清Western blot 鉴定第40-41页
     ·E2 杂交瘤细胞上清与 BVDV 和 CSFV 的 IFA 鉴定第41-42页
     ·E2 单克隆抗体中和活性测定第42-43页
4 讨论第43-45页
   ·E2 单克隆抗体的制备及鉴定第43-44页
     ·免疫原和检测抗原的选择第43页
     ·单克隆抗体Western blot 分析第43页
     ·E2 单克隆抗体与BVDV 和CSFV 的间接免疫荧光鉴定第43-44页
   ·NS3 单克隆抗体的应用前景第44-45页
5 结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-53页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第53页

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