| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-16页 |
| 1 绪论 | 第16-47页 |
| ·课题背景(或引言) | 第16-17页 |
| ·猫泛白细胞减少症病毒研究概况 | 第17-30页 |
| ·病毒演化及分类学地位 | 第18-20页 |
| ·FPV的形态学特征及理化学性质 | 第20-21页 |
| ·FPV的细胞嗜性及其体外培养 | 第21-23页 |
| ·FPV基因组结构 | 第23-24页 |
| ·FPV基因组的复制与转录 | 第24-26页 |
| ·FPV编码蛋白 | 第26-30页 |
| ·猫泛白细胞减少症研究概况 | 第30-40页 |
| ·流行病学 | 第30-31页 |
| ·临床症状 | 第31-32页 |
| ·诊断 | 第32-36页 |
| ·防制 | 第36-40页 |
| ·葡萄球菌A蛋白研究概况 | 第40-43页 |
| ·SPA生物学特性 | 第40-42页 |
| ·SPA应用 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体在细小病毒研究上的应用 | 第43-45页 |
| ·单克隆抗体概述 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体在肉食兽细小病毒研究上的应用 | 第44-45页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第45-47页 |
| 2 虎源猫泛白细胞减少症病毒的分离和鉴定 | 第47-60页 |
| ·实验材料 | 第47-49页 |
| ·细胞株及菌株 | 第47页 |
| ·病料 | 第47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第47-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| ·金标记FPV试纸条检测 | 第49页 |
| ·病毒分离 | 第49页 |
| ·毒株的鉴定 | 第49-52页 |
| ·结果 | 第52-56页 |
| ·病毒分离 | 第52页 |
| ·血凝试验 | 第52页 |
| ·电镜试验 | 第52-53页 |
| ·VP2基因序列测定 | 第53-54页 |
| ·人工感染幼猫试验 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·病毒的分离 | 第56-57页 |
| ·病毒的鉴定 | 第57-58页 |
| ·本章小节 | 第58-60页 |
| 3 虎源FPV VP2基因的原核表达及其抗原特性研究 | 第60-79页 |
| ·实验材料 | 第60-65页 |
| ·病毒 | 第60页 |
| ·质粒载体与菌种 | 第60页 |
| ·抗体和血清 | 第60-61页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第61-64页 |
| ·主要仪器 | 第64-65页 |
| ·方法 | 第65-70页 |
| ·VP2基因原核表达载体(PGEX-6P-VP2)的构建 | 第65-66页 |
| ·重组VP2蛋白的诱导表达 | 第66页 |
| ·重组VP2蛋白的纯化 | 第66-67页 |
| ·重组VP2蛋白的Western blot分析 | 第67-68页 |
| ·纯化重组VP2蛋白抗原特性研究 | 第68-70页 |
| ·结果 | 第70-75页 |
| ·虎源FPV VP2基因原核表达载体的构建和鉴定 | 第70页 |
| ·重组VP2蛋白的诱导表达 | 第70-71页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第71页 |
| ·表达产物的可溶性分析 | 第71-72页 |
| ·重组VP2蛋白的纯化 | 第72-73页 |
| ·纯化重组VP2蛋白Western blot分析 | 第73-74页 |
| ·纯化重组VP2蛋白抗原特性研究 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| ·表达基因的选择 | 第75页 |
| ·表达载体的选择 | 第75-76页 |
| ·VP2蛋白纯化 | 第76-77页 |
| ·VP2蛋白抗原特性研究 | 第77-78页 |
| ·纯化重组蛋白中的E.coli菌体成分 | 第78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 4 检测二种猫科动物猫瘟热抗体SPA-ELISA方法的建立及应用研究 | 第79-95页 |
| ·实验材料 | 第79页 |
| ·实验动物 | 第79页 |
| ·抗体和血清 | 第79页 |
| ·主要试剂 | 第79页 |
| ·主要仪器 | 第79页 |
| ·方法 | 第79-82页 |
| ·虎抗FPV阳性血清的制备 | 第79-80页 |
| ·SPA-ELISA方法的建立 | 第80-82页 |
| ·结果 | 第82-90页 |
| ·虎抗FPV阳性血清的制备 | 第82页 |
| ·SPA-ELISA方法的建立 | 第82-90页 |
| ·讨论 | 第90-94页 |
| ·关于FPV检测法 | 第90-91页 |
| ·SPA-ELISA结果判定标准的确定 | 第91页 |
| ·SPA-ELISA试验条件优化 | 第91-93页 |
| ·ELISA操作规范 | 第93-94页 |
| ·本章小结 | 第94-95页 |
| 5 虎源FPV VP2蛋白特异性单克隆抗体的制备 | 第95-107页 |
| ·实验材料 | 第95-96页 |
| ·免疫抗原、检测抗原及细胞系 | 第95页 |
| ·抗体和血清 | 第95页 |
| ·实验动物 | 第95页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第95-96页 |
| ·主要设备 | 第96页 |
| ·方法 | 第96-101页 |
| ·动物免疫 | 第96-97页 |
| ·单克隆抗体筛选方法的建立 | 第97页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第97页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏与培养 | 第97页 |
| ·脾细胞的制备 | 第97-98页 |
| ·细胞融合 | 第98页 |
| ·融合细胞的检测 | 第98-99页 |
| ·阳性细胞的克隆 | 第99页 |
| ·细胞冻存 | 第99页 |
| ·细胞复苏 | 第99页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第99页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第99-101页 |
| ·结果 | 第101-104页 |
| ·免疫小鼠血清抗体效价 | 第101页 |
| ·ELISA检测抗原最佳包被浓度的确定 | 第101-102页 |
| ·细胞融合与杂交瘤细胞株的建立 | 第102页 |
| ·单抗腹水效价的测定和亚型鉴定 | 第102-103页 |
| ·间接免疫荧光(IFA)鉴定试验 | 第103-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·免疫抗原的制备 | 第104页 |
| ·单克隆抗体筛选方法的建立 | 第104-105页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第105页 |
| ·关于单抗制备影响因素 | 第105-106页 |
| ·本章小结 | 第106-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-121页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
