黑麦草抗冻蛋白基因的克隆、原核表达及植物转基因研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-12页 |
| 1. 绪论 | 第12-28页 |
| ·抗冻蛋白的类别及活性 | 第12-18页 |
| ·抗冻蛋白的类别及特性 | 第12-15页 |
| ·抗冻蛋白的活性及检测 | 第15-18页 |
| ·植物抗冻蛋白的结构及冰晶结合位点的研究 | 第18-22页 |
| ·抗冻蛋白的作用模型--表面结合模型 | 第18-19页 |
| ·胡萝卜抗冻蛋白的结构及其冰晶结合位点分析 | 第19-21页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白的结构和冰晶结合位点分析 | 第21-22页 |
| ·植物抗冻蛋白的应用研究 | 第22-25页 |
| ·植物抗冻蛋白的基因工程运用 | 第22-23页 |
| ·植物抗冻蛋白在果蔬、食品、医学中的应用 | 第23-25页 |
| ·本课题的目的、意义及技术路线 | 第25-28页 |
| 2 黑麦草抗冻蛋白基因的CDNA克隆 | 第28-44页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-36页 |
| ·材料与试剂 | 第28-31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·黑麦草总RNA提取 | 第36-37页 |
| ·黑麦草抗冻基因的RT-PCR扩增 | 第37页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白基因的T-A克隆 | 第37页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白基因的序列分析 | 第37-41页 |
| ·结论与讨论 | 第41-44页 |
| 3 黑麦草抗冻蛋白的原核表达与纯化 | 第44-64页 |
| ·前言 | 第44页 |
| ·材料与方法 | 第44-55页 |
| ·材料与试剂 | 第44-50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-61页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白的表达载体构建及鉴定 | 第55-56页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白原核表达诱导条件的优化 | 第56-59页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白的纯化 | 第59-61页 |
| ·小结与讨论 | 第61-64页 |
| 4 黑麦草抗冻蛋白冰晶结合位点的分析 | 第64-76页 |
| ·前言 | 第64页 |
| ·材料与方法 | 第64-68页 |
| ·材料与试剂 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-74页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白理论三维结构的分析与分析 | 第68-70页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白可能冰晶结合位点分析 | 第70页 |
| ·定点突变引物的设计和突变体载体的构建 | 第70-73页 |
| ·系列黑麦草抗冻蛋白的突变体的表达和活性检测 | 第73-74页 |
| ·结论与讨论 | 第74-76页 |
| 5 黑麦草抗冻蛋白基因的烟草转化 | 第76-90页 |
| ·前言 | 第76-77页 |
| ·材料与方法 | 第77-82页 |
| ·材料与试剂 | 第77-78页 |
| ·实验方法 | 第78-82页 |
| ·结果与分析 | 第82-88页 |
| ·黑麦草抗冻蛋白基因的植物过量表达载体的构建 | 第82-86页 |
| ·抗冻基因的烟草遗传转化 | 第86-87页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第87-88页 |
| ·结论与讨论 | 第88-90页 |
| 6 结论与创新 | 第90-94页 |
| ·结论 | 第90-91页 |
| ·创新点 | 第91页 |
| ·有待进一步研究 | 第91页 |
| ·研究展望 | 第91-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
| 附录A:测序图 | 第102-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 附表 | 第108页 |
