| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 前言 | 第12-13页 |
| 1.2 替代毒理学概述 | 第13-14页 |
| 1.3 替代毒理学检测方法 | 第14-18页 |
| 1.3.1 模式生物线虫 | 第14-15页 |
| 1.3.2 生物信息学 | 第15-16页 |
| 1.3.3 体外细胞试验 | 第16-18页 |
| 1.3.3.1 体外细胞毒性实验常用细胞 | 第16-17页 |
| 1.3.3.2 体外细胞毒性实验检测方法 | 第17-18页 |
| 1.4 3D细胞培养技术 | 第18-26页 |
| 1.4.1 3D细胞培养含义 | 第18-19页 |
| 1.4.2 3D细胞培养优势 | 第19-21页 |
| 1.4.3 3D细胞发展史 | 第21-23页 |
| 1.4.4 3D细胞培养影响因素 | 第23-24页 |
| 1.4.4.1 细胞来源 | 第23页 |
| 1.4.4.2 生长因子 | 第23页 |
| 1.4.4.3 细胞培养模型 | 第23-24页 |
| 1.4.5 3D细胞培养应用 | 第24-26页 |
| 1.4.5.1 癌症生物学应用研究 | 第25页 |
| 1.4.5.2 药物毒性检测 | 第25页 |
| 1.4.5.3 器官再生 | 第25-26页 |
| 1.5 研究概述 | 第26-30页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第26-27页 |
| 1.5.2 研究方法 | 第27-28页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第28-30页 |
| 第2章 材料与方法 | 第30-46页 |
| 2.1 细胞系 | 第30页 |
| 2.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.3 主要器材 | 第31页 |
| 2.4 实验方法 | 第31-46页 |
| 2.4.1 2D细胞培养 | 第31页 |
| 2.4.2 A_L细胞CD59基因自发突变率的降低 | 第31-32页 |
| 2.4.3 3D细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.4.4 细胞团筛选 | 第33页 |
| 2.4.5 酶解细胞团 | 第33页 |
| 2.4.6 细胞团形态参数分析 | 第33-34页 |
| 2.4.7 细胞活性检测 | 第34-35页 |
| 2.4.8 CD59基因突变检测 | 第35-36页 |
| 2.4.9 基因表达检测 | 第36-39页 |
| 2.4.10 蛋白表达检测 | 第39-43页 |
| 2.4.11 条件刺激处理 | 第43-44页 |
| 2.4.12 细胞内砷和银元素含量的测定 | 第44-45页 |
| 2.4.13 细胞周期分析 | 第45页 |
| 2.4.14 数据分析 | 第45-46页 |
| 第3章 构建3D遗传毒性培养模型 | 第46-56页 |
| 3.1 前言 | 第46-48页 |
| 3.2 实验结果 | 第48-52页 |
| 3.2.1 低黏附琼脂糖培养建立3D细胞培养模型 | 第48-50页 |
| 3.2.2 细胞筛选及特性 | 第50-52页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第52-56页 |
| 第4章 3D遗传毒性培养模型表征分析 | 第56-68页 |
| 4.1 前言 | 第56-57页 |
| 4.2 实验结果 | 第57-64页 |
| 4.2.1 3D细胞形态学观察 | 第57-59页 |
| 4.2.2 3D细胞团直径及单细胞团中细胞数目分析 | 第59-60页 |
| 4.2.3 3D细胞基因表达水平 | 第60-63页 |
| 4.2.4 3D细胞蛋白表达水平 | 第63-64页 |
| 4.2.5 细胞活性与CD59本底突变率 | 第64页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第64-68页 |
| 第5章 3D遗传毒性培养模型毒理学效应研究 | 第68-82页 |
| 5.1 前言 | 第68-69页 |
| 5.2 实验结果 | 第69-78页 |
| 5.2.1 环境污染物对A_L细胞的存活率影响 | 第69-71页 |
| 5.2.2 环境污染物对A_L细胞遗传毒性影响 | 第71-73页 |
| 5.2.3 3D细胞污染物抗性分析 | 第73-74页 |
| 5.2.4 辐射对A_L细胞影响 | 第74-76页 |
| 5.2.5 3D细胞辐射抵抗性研究 | 第76-78页 |
| 5.3 小结与讨论 | 第78-82页 |
| 第6章 总结与展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第104页 |