摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
·粘细菌的发现及分类 | 第13-14页 |
·粘细菌的生物学特征 | 第14-19页 |
·粘细菌的生态 | 第15-16页 |
·粘细菌的生活周期 | 第16页 |
·粘细菌的分离 | 第16页 |
·粘细菌的菌落和共生 | 第16-17页 |
·基因组 | 第17页 |
·粘细菌噬菌体和粘菌素 | 第17页 |
·子实体 | 第17-18页 |
·溶解性行为和滑动行为 | 第18-19页 |
·大分子物质的降解能力 | 第19页 |
·粘细菌的生物活性物质 | 第19-23页 |
·粘细菌产活性物质的特征 | 第20-22页 |
·粘细菌产生活性物质的作用机制 | 第22-23页 |
·粘细菌研究的国内外现状 | 第23页 |
·本课题研究的主要内容 | 第23-25页 |
第二章 粘细菌WXNXJ-B 生物学特性及生长条件研究 | 第25-42页 |
·实验材料与仪器 | 第26-27页 |
·实验材料 | 第26页 |
·实验仪器与设备 | 第26页 |
·实验试剂 | 第26-27页 |
·培养基 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-30页 |
·菌种的活化 | 第27页 |
·单一菌种种子液的制备 | 第27页 |
·WXNXJ-B 细菌形态的观察 | 第27页 |
·WXNXJ-B 细菌生理生化特征的测定 | 第27-28页 |
·WXNXJ-B 细菌的分子生物学鉴定 | 第28-29页 |
·WXNXJ-B 细菌产生挥发性物质的测定 | 第29-30页 |
·生物量的测定 | 第30页 |
·碳源、氮源和无机盐的筛选 | 第30页 |
·初始pH 和培养温度对WXNXJ-B 菌株生长的影响 | 第30页 |
·结果与讨论 | 第30-40页 |
·菌株的形态特征 | 第30-31页 |
·生理生化特征 | 第31页 |
·WXNXJ-B 的165 rDNA 测定 | 第31-33页 |
·挥发性物质的测定 | 第33-36页 |
·粘细菌Stigmatella WXNXJ-B 生长曲线 | 第36-37页 |
·生长条件的筛选 | 第37-40页 |
·本章小结 | 第40-42页 |
第三章 Stigmatella WXNXJ-B 产生的抗肿瘤物质的分离纯化及结构鉴定 | 第42-61页 |
·实验材料与仪器 | 第43-44页 |
·实验材料 | 第43页 |
·实验仪器与设备 | 第43页 |
·实验试剂 | 第43-44页 |
·培养基 | 第44页 |
·肿瘤细胞株 | 第44页 |
·溶剂的配制 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-48页 |
·细胞培养 | 第44页 |
·细胞生长抑制的测定 | 第44-45页 |
·溶剂DMSO 对肿瘤细胞增殖的影响 | 第45页 |
·Stigmatella WXNXJ-B 发酵 | 第45-46页 |
·代谢产物的粗提 | 第46页 |
·活性物质稳定性的测定 | 第46页 |
·次级代谢产物的初步定性分析 | 第46页 |
·活性物质的分离纯化和鉴定 | 第46-48页 |
·结果与讨论 | 第48-60页 |
·DMSO 对肿瘤细胞增殖的损伤模型 | 第48页 |
·发酵产物的预处理 | 第48-49页 |
·活性物质的稳定性 | 第49-50页 |
·树脂提取物的初步定性分析 | 第50-51页 |
·活性物质的萃取 | 第51页 |
·葡聚糖凝胶Sephadex LH-20 柱分离 | 第51-52页 |
·低压C18 柱分离 | 第52-53页 |
·HPLC 分离和制备 | 第53页 |
·UPLC/MALDI-TOF MS/MS 分析 | 第53-55页 |
·IR 分析 | 第55-56页 |
·NMR 分析 | 第56-57页 |
·CF100-2 结构及其化学性质 | 第57-60页 |
·本章小结 | 第60-61页 |
第四章 Stigmatella WXNXJ-B 产喹乐霉素发酵条件的优化及大孔树脂的筛选 | 第61-80页 |
·材料与仪器 | 第61-62页 |
·材料 | 第61页 |
·实验仪器与设备 | 第61-62页 |
·实验试剂 | 第62页 |
·培养基 | 第62页 |
·实验方法 | 第62-64页 |
·粘细菌的发酵及喹乐霉素的提取 | 第62页 |
·喹乐霉素含量的测定 | 第62页 |
·蛋白浓度的测定 | 第62页 |
·还原糖的测定 | 第62页 |
·Plackett-Burman 和响应面实验设计 | 第62-63页 |
·大孔树脂的筛选 | 第63-64页 |
·结果与分析 | 第64-78页 |
·Stigmatella WXNXJ-B 摇瓶发酵过程 | 第64-65页 |
·摇瓶发酵条件的优化 | 第65-70页 |
·发酵培养基优化 | 第70-75页 |
·大孔吸附树脂的选择 | 第75-78页 |
·本章小结 | 第78-80页 |
第五章 喹乐霉素诱导肿瘤细胞凋亡及相关机制的研究 | 第80-96页 |
·实验材料与仪器 | 第80-81页 |
·实验材料 | 第80页 |
·实验设备与仪器 | 第80-81页 |
·实验方法 | 第81-82页 |
·喹乐霉素对肿瘤细胞和小鼠脾脏细胞生长状况的影响 | 第81页 |
·扫描电镜观察喹乐霉素对B16 细胞的形态影响 | 第81页 |
·荧光显微镜观察喹乐霉素对B16 细胞核的影响 | 第81-82页 |
·凝胶电泳检测喹乐霉素对B16 细胞DNA 的影响 | 第82页 |
·流式细胞仪检测喹乐霉素对B16 细胞周期的影响 | 第82页 |
·流式细胞仪检测喹乐霉素对B16 细胞的线粒体膜电位的影响 | 第82页 |
·流式细胞仪检测B16 细胞肿瘤基因相关蛋白和Caspase-3 的表达水平 | 第82页 |
·结果与讨论 | 第82-95页 |
·喹乐霉素对肿瘤细胞系的细胞毒作用 | 第82-83页 |
·喹乐霉素对肿瘤细胞生长的影响 | 第83-85页 |
·喹乐霉素对小鼠脾脏细胞生长的影响 | 第85-87页 |
·喹乐霉素对B16 细胞形态的影响 | 第87-88页 |
·喹乐霉素对B16 细胞核的影响 | 第88-89页 |
·DNA Ladder | 第89页 |
·喹乐霉素对B16 细胞周期的影响 | 第89-91页 |
·喹乐霉素对B16 细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)的影响 | 第91-92页 |
·喹乐霉素对B16 细胞肿瘤相关基因蛋白表达的影响 | 第92-95页 |
·本章小结 | 第95-96页 |
结论与展望 | 第96-98页 |
创新点 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-111页 |
附录 | 第111-115页 |