应用启动子替换技术构建香菇多糖高产菌株
| 摘要 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-15页 |
| 1.1 香菇 | 第8-9页 |
| 1.1.1 香菇的营养成分 | 第8页 |
| 1.1.2 香菇的药用价值 | 第8-9页 |
| 1.1.3 香菇的经济价值 | 第9页 |
| 1.2 香菇多糖的研究进展 | 第9-11页 |
| 1.2.1 香菇多糖的分子结构和理化性质 | 第9页 |
| 1.2.2 香菇多糖的生物活性 | 第9-10页 |
| 1.2.3 香菇多糖的临床应用 | 第10页 |
| 1.2.4 香菇多糖的提取方法 | 第10-11页 |
| 1.3 构建香菇多糖高产菌株 | 第11-13页 |
| 1.3.1 真菌中的转化方法 | 第11-12页 |
| 1.3.2 真菌的启动子 | 第12页 |
| 1.3.3 筛选标记 | 第12-13页 |
| 1.3.4 基因片段的连接 | 第13页 |
| 1.4 本研究的意义和主要内容 | 第13-15页 |
| 第二章 同源重组片段的构建 | 第15-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 培养基配方 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第16页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-25页 |
| 2.2.1 香菇L26基因组总DNA的提取 | 第16-17页 |
| 2.2.2 同源重组片段引物的设计 | 第17-18页 |
| 2.2.3 同源重组片段各序列的扩增 | 第18-19页 |
| 2.2.4 同源重组片段的连接 | 第19-22页 |
| 2.2.5 同源重组片段的保存与测序 | 第22-24页 |
| 2.2.6 Lhg-R质粒的转化 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.1 同源重组片段扩增结果 | 第25-26页 |
| 2.3.2 同源重组片段的融合 | 第26-27页 |
| 2.3.3 同源重组片段载体的连接 | 第27-28页 |
| 2.4 本章小结 | 第28-29页 |
| 第三章 同源重组片段转化体系构建 | 第29-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 菌种和质粒 | 第29页 |
| 3.1.2 试剂与培养基 | 第29页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第29-30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-33页 |
| 3.2.1 香菇对潮霉素耐受浓度的测定 | 第30页 |
| 3.2.2 原生质体的制备 | 第30页 |
| 3.2.3 DNA片段的转化 | 第30-31页 |
| 3.2.4 转化子的筛选 | 第31页 |
| 3.2.5 转化子基因组DNA的提取 | 第31页 |
| 3.2.6 转化子的PCR验证 | 第31-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-36页 |
| 3.3.1 香菇L26对潮霉素致死浓度的测定 | 第33-34页 |
| 3.3.2 香菇原生质体制备 | 第34页 |
| 3.3.3 转化子的筛选 | 第34-36页 |
| 3.4 本章小结 | 第36-37页 |
| 第四章 香菇多糖高产菌株验证 | 第37-46页 |
| 4.1 实验材料 | 第37页 |
| 4.1.1 菌种 | 第37页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-41页 |
| 4.2.1 香菇多糖基因的表达量分析 | 第37-40页 |
| 4.2.2 对转化子多糖产量检测 | 第40-41页 |
| 4.2.3 转化子生物量的测定 | 第41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-45页 |
| 4.3.1 转化子RNA的提取 | 第41-42页 |
| 4.3.2 香菇多糖产量测定 | 第42-43页 |
| 4.3.3 香菇葡聚糖合成酶基因半定量结果 | 第43页 |
| 4.3.4 香菇多糖红外光谱分析 | 第43-44页 |
| 4.3.5 转化子的生物量测定 | 第44-45页 |
| 4.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| Abstract | 第53-54页 |
| 附件一 | 第55-56页 |
