| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 引言 | 第10-27页 |
| 1 丙型肝炎及治疗 | 第10页 |
| 2 丙型肝炎病毒 | 第10-15页 |
| 2.1 病毒蛋白介绍 | 第11-14页 |
| 2.2 丙肝病毒生命周期 | 第14-15页 |
| 2.3 丙肝病毒与宿主因子 | 第15页 |
| 3 丙肝病毒受体 | 第15-17页 |
| 4 COPⅡ囊泡运输 | 第17-20页 |
| 4.1 COPⅡ的结构与组装 | 第17-18页 |
| 4.2 COPⅡ与货物识别 | 第18-20页 |
| 5 PI4P在丙肝病毒复制中的作用 | 第20-24页 |
| 5.1 PI4P | 第20-21页 |
| 5.2 病毒侵染条件下PI4P功能 | 第21-22页 |
| 5.3 PI4P效应蛋白 | 第22-24页 |
| 6 逆转运复合体Retromer在病毒中的作用 | 第24-26页 |
| 6.1 逆转运复合体Retromer | 第24-25页 |
| 6.2 逆转运复合体Retromer在病毒生命周期中的作用 | 第25-26页 |
| 7 科学问题的提出 | 第26-27页 |
| 7.1 COPⅡ调节丙肝病毒入侵 | 第26页 |
| 7.2 Retromer参与丙肝病毒复制 | 第26-27页 |
| 材料与方法 | 第27-54页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第27-36页 |
| 1.1 细胞及病毒 | 第27页 |
| 1.2 抗体 | 第27-29页 |
| 1.3 SiRNA以及qPCR引物 | 第29页 |
| 1.4 化学药品 | 第29-30页 |
| 1.5 生化试剂 | 第30页 |
| 1.6 细胞培养药品及相关试剂 | 第30-31页 |
| 1.7 试剂盒 | 第31页 |
| 1.8 常用溶液配方 | 第31-33页 |
| 1.9 实验仪器 | 第33-35页 |
| 1.10 实验耗材 | 第35-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-54页 |
| 2.1 细胞培养 | 第36-37页 |
| 2.2 分子克隆 | 第37-40页 |
| 2.3 点突变 | 第40-43页 |
| 2.4 Western blot | 第43-44页 |
| 2.5 蛋白的原核表达与纯化 | 第44-46页 |
| 2.6 GST pulldown | 第46页 |
| 2.7 免疫共沉淀 | 第46-47页 |
| 2.8 免疫荧光 | 第47-49页 |
| 2.9 qPCR | 第49-50页 |
| 2.10 细胞转染 | 第50-51页 |
| 2.11 RNA干扰 | 第51页 |
| 2.12 HCV感染性克隆病毒的扩增 | 第51-52页 |
| 2.13 假病毒包装 | 第52页 |
| 2.14 报告基因测量 | 第52-53页 |
| 2.15 COPⅡ细胞外重建实验 | 第53页 |
| 2.16 质谱鉴定 | 第53页 |
| 2.17 统计分析 | 第53-54页 |
| 研究结果及讨论 | 第54-97页 |
| 第一部分: 囊泡运输通路COPⅡ调节丙肝病毒入侵的机制研究 | 第54-79页 |
| 1 研究结果 | 第54-76页 |
| 1.1 鉴定Claudin-1与COPⅡ组分之间的相互作用 | 第54-60页 |
| 1.2 Sec24C调节细胞表面的Claudin-1水平 | 第60-63页 |
| 1.3 抑制COPⅡ削弱丙肝病毒入侵 | 第63-65页 |
| 1.4 分析Claudin-1与Sec24C之间的相互作用 | 第65-68页 |
| 1.5 Claudin-1通过其羧基端的酪氨酸-缬氨酸(YV)结合Sec24C | 第68-71页 |
| 1.6 分析claudin家族其他蛋白与Sec24C的相互作用 | 第71-73页 |
| 1.7 Claudin-1的酪氨酸-缬氨酸(YV)对于维持Claudin-1在细胞表面定位以及丙肝病毒入侵过程至关重要 | 第73-76页 |
| 2 第一部分讨论与展望 | 第76-78页 |
| 3 第一部分总结 | 第78-79页 |
| 第二部分: Retromer复合体在丙肝病毒复制过程中的功能研究 | 第79-97页 |
| 1 研究结果 | 第79-94页 |
| 1.1 Retromer组分Vps35与丙肝病毒蛋白NS5A存在相互作用 | 第79-82页 |
| 1.2 Vps35定位在丙肝病毒复制区域 | 第82-83页 |
| 1.3 Retromer组分Vps35与丙肝病毒复制区域的PI4P存在共定位 | 第83-84页 |
| 1.4 Retromer参与丙肝病毒复制 | 第84-89页 |
| 1.5 Retromer货物CIMPR参与丙肝病毒复制 | 第89-93页 |
| 1.6 CIMPR定位在丙肝病毒复制区域 | 第93-94页 |
| 2 第二部分讨论与展望 | 第94-96页 |
| 3 第二部分总结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 附录 | 第105-110页 |
| 1 缩略语表 | 第105-107页 |
| 2 相关病毒序列 | 第107-108页 |
| 2.1 NS5A(JFH1)核酸序列 | 第107页 |
| 2.2 NS5A(JFH1)蛋白序列 | 第107-108页 |
| 3 个人简历 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
