| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 引言 | 第12-32页 |
| 1 氨酰tRNA合成酶在生命中的功能 | 第13-16页 |
| 2 氨酰tRNA合成酶的进化 | 第16-21页 |
| 3 氨酰tRNA合成酶抑制剂的研究现状 | 第21-28页 |
| 4 甲硫氨酰tRNA合成酶研究现状 | 第28-32页 |
| 本课题拟解决的科学问题 | 第32-34页 |
| 本课题研究内容和意义 | 第34-36页 |
| 1 重组蛋白的获得和生化研究 | 第34页 |
| 2 结核分枝杆菌MetRS的晶体学研究 | 第34-35页 |
| 3 结核分枝杆菌MetRS的结构分析及突变验证 | 第35-36页 |
| 第一章 结核分枝杆菌MetRS重组蛋白质的制备和生化研究 | 第36-56页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第36-38页 |
| 1.1.1 材料 | 第36-37页 |
| 1.1.2 仪器 | 第37-38页 |
| 1.2 方法 | 第38-43页 |
| 1.2.1 MetRS氨基酸序列分析 | 第38页 |
| 1.2.2 MetRS基因的克隆 | 第38-39页 |
| 1.2.3 MetRS重组蛋白的表达筛选 | 第39-40页 |
| 1.2.4 MetRS重组蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| 1.2.5 重组蛋白质的活性测定 | 第41-42页 |
| 1.2.6 MetRS酶反应动力学分析 | 第42-43页 |
| 1.3 结果 | 第43-52页 |
| 1.3.1 MetRS的多序列比对及聚类分析 | 第43页 |
| 1.3.2 结核分枝杆菌MetRS重组表达载体的构建筛选 | 第43-46页 |
| 1.3.3 结核分枝杆菌MetRS重组蛋白的制备 | 第46-48页 |
| 1.3.4 结核分枝杆菌MetRS重组蛋白质的活性鉴定 | 第48页 |
| 1.3.5 底物甲硫氨酸K_m常数 | 第48-50页 |
| 1.3.6 底物ATP K_m常数 | 第50-51页 |
| 1.3.7 MetRS酶反应动力学比较 | 第51-52页 |
| 1.4 讨论 | 第52-56页 |
| 第二章 结核分枝杆菌MetRS晶体学研究 | 第56-74页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第56-57页 |
| 2.2 方法 | 第57-61页 |
| 2.2.1 MetRS配体选择 | 第57页 |
| 2.2.2 晶体生长条件筛选 | 第57-58页 |
| 2.2.3 晶体生长条件优化 | 第58-59页 |
| 2.2.4 晶体的冻存条件优化 | 第59页 |
| 2.2.5 晶体数据收集 | 第59页 |
| 2.2.6 晶体数据处理和结构的解析 | 第59-61页 |
| 2.3 结果 | 第61-70页 |
| 2.3.1 FTS实验结果 | 第61-62页 |
| 2.3.2 Unligend MtMetRS结晶及衍射 | 第62-65页 |
| 2.3.3 MtMetRS:Met-AMP复合物结晶及衍射 | 第65-68页 |
| 2.3.4 衍射数据的处理及结构优化 | 第68-70页 |
| 2.4 讨论 | 第70-74页 |
| 第三章 结核分枝杆菌MetRS结构分析及验证 | 第74-88页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第74页 |
| 3.2 方法 | 第74-75页 |
| 3.2.1 MtMetRS结构分析 | 第74-75页 |
| 3.2.2 MetRS分子模型分析 | 第75页 |
| 3.2.3 突变体实验 | 第75页 |
| 3.3 结果 | 第75-86页 |
| 3.3.1 不同物种MetRS的比较 | 第75-76页 |
| 3.3.2 MtMetRS整体结构模型 | 第76-79页 |
| 3.3.3 底物诱导的MetRS构象变化 | 第79-80页 |
| 3.3.4 MetRS结合中间产物的差异 | 第80-81页 |
| 3.3.5 MetRS保守性分析 | 第81-82页 |
| 3.3.6 MetRS核酸结合环的稳定性分析 | 第82-83页 |
| 3.3.7 MtMetRS疏水表面分析 | 第83-85页 |
| 3.3.8 突变实验分析 | 第85-86页 |
| 3.4 讨论 | 第86-88页 |
| 结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-102页 |
| 附录 缩略词表 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 个人简历及发表文章 | 第105页 |
