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多环芳烃菲降解人工双菌体系的构建及其代谢交流分析

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第1章 文献综述第7-19页
    1.1 多环芳烃污染物危害及治理方式第7-9页
        1.1.1 多环芳烃及其危害第7-8页
        1.1.2 多环芳烃污染物治理方式第8-9页
    1.2 多环芳烃微生物降解研究现状第9-12页
        1.2.1 微生物对多环芳烃的修复第9页
        1.2.2 混菌体系对多环芳烃的降解第9-10页
        1.2.3 微生物降解多环芳烃的机制及代谢途径第10-12页
    1.3 多环芳烃降解菌的分子生物学研究第12-14页
        1.3.1 多环芳烃降解基因及关键酶研究第12-14页
        1.3.2 基因工程菌的构建研究第14页
    1.4 人工构建混菌体系对污染物降解的研究进展第14-16页
        1.4.1 人工混菌体系的设计、构建第14-15页
        1.4.2 人工混菌体系对污染物降解的应用第15-16页
    1.5 本文的主要研究内容和技术路线第16-19页
        1.5.1 研究目的及内容第16-17页
        1.5.2 技术路线第17-19页
第2章 菲降解菌株分离、鉴定及降解基因克隆第19-33页
    2.1 材料与方法第19-27页
        2.1.1 试剂和仪器第19-22页
        2.1.2 材料与培养基第22页
        2.1.3 菲降解菌株筛选与分离第22-23页
        2.1.4 降解菌株降解能力测试第23-24页
        2.1.5 菌株形态学观察及16Sr RNA序列分析第24-26页
        2.1.6 降解相关基因的克隆及验证第26-27页
    2.2 结果与讨论第27-31页
        2.2.1 分离菌株对菲及其它碳源的降解能力第27-29页
        2.2.2 降解菌株形态学观察第29页
        2.2.3 16Sr RNA序列分析及系统发育树构建第29-30页
        2.2.4 catA2基因的序列测定与分析第30-31页
    2.3 小结第31-33页
第3章 降解PAHs的菲降解菌、大肠杆菌工程强化改造第33-51页
    3.1 材料与方法第33-43页
        3.1.1 实验菌种及试剂第33-35页
        3.1.2 主要仪器第35页
        3.1.3 引物设计第35-36页
        3.1.4 表达质粒的构建与转化第36-39页
        3.1.5 实时荧光定量PCR(qPCR)对基因表达情况测定第39-42页
        3.1.6 酶活实验第42页
        3.1.7 降解实验第42-43页
    3.2 结果与讨论第43-49页
        3.2.1 工程菌株基因验证及目的基因表达情况第43-45页
        3.2.2 工程菌株酶活测定及分析第45-46页
        3.2.3 不同微生物体系对菲的降解性能第46-49页
    3.3 小结第49-51页
第4章 大肠杆菌-假单胞菌共培养体系降解代谢分析第51-61页
    4.1 材料与方法第51-53页
        4.1.1 实验试剂及仪器第51-52页
        4.1.2 降解实验第52页
        4.1.3 代谢物检测及数据处理第52-53页
        4.1.4影响因子优化实验第53页
    4.2 结果与讨论第53-60页
        4.2.1 共培养体系降解特点分析第53-56页
        4.2.2 人工体系代谢物质检测与分析第56-58页
        4.2.3 共培养体系影响因子优化第58-60页
    4.3 小结第60-61页
第5章 结论与展望第61-63页
    5.1 结论第61页
    5.2 展望第61-63页
参考文献第63-71页
附录第71-75页
发表论文和参加科研情况说明第75-77页
致谢第77页

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