| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| ·油菜种子油脂合成的生化基础 | 第11-13页 |
| ·关键酶活性对油脂合成过程的影响 | 第11-12页 |
| ·关键代谢物质对油脂合成过程的影响 | 第12页 |
| ·关于油脂合途径的代谢调控研究 | 第12-13页 |
| ·基因工程技术在提高油菜含油量上的应用 | 第13-14页 |
| ·转基因手段 | 第13-14页 |
| ·反义RNA技术 | 第14页 |
| ·PPT蛋白研究现状 | 第14-18页 |
| ·质体内膜上的转运蛋白的种类 | 第14-15页 |
| ·PPT转运蛋白的功能研究 | 第15-17页 |
| ·拟南芥中PPT基因的研究进展 | 第17-18页 |
| ·侧翼序列克隆技术研究进展 | 第18-24页 |
| ·反向PCR技术 | 第19-20页 |
| ·热不对称交错PCR(TAIL-PCR) | 第20-21页 |
| ·外源接头PCR | 第21-22页 |
| ·质粒拯救法 | 第22-24页 |
| 2 甘蓝型油菜PEP转运蛋白BnPPT1基因的克隆及功能证 | 第24-46页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·生物材料 | 第24-25页 |
| ·酶和其他化学试剂 | 第25页 |
| ·主要方法 | 第25-33页 |
| ·BnPPT1基因的克隆 | 第25-29页 |
| ·BnPPT1序列分析、比对和进化树 | 第29页 |
| ·BnPPT1蛋白的亚细胞定位 | 第29-32页 |
| ·BnPPT1基因RNAi载体转化拟南芥 | 第32-33页 |
| ·过表达BnPPT1转化拟南芥同源基因AtPPT1基因缺失突变体 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-44页 |
| ·BnPPT1基因的克隆和序列分析 | 第33-35页 |
| ·BnPPT1蛋白序列比对及进化分析 | 第35-38页 |
| ·BnPPT1蛋白的亚细胞定位 | 第38-40页 |
| ·BnPPT1能有效干涉同源AtPPT1基因的表达 | 第40-43页 |
| ·BnPPT1过表达能回复拟南芥AtPPT1基因缺失突变体 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 3 甘蓝型油菜BnPPT1基因的遗传分析 | 第46-62页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·生物材料 | 第46页 |
| ·质粒和菌株 | 第46页 |
| ·酶和试剂 | 第46页 |
| ·主要方法 | 第46-51页 |
| ·BnPPT1基因组织表达分析 | 第46-47页 |
| ·油菜遗传转化 | 第47页 |
| ·转化植株的筛选鉴定 | 第47-48页 |
| ·含油量及脂肪酸成分的测定 | 第48页 |
| ·优化方法克隆高油材料侧翼序列 | 第48-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-60页 |
| ·BnPPT1基因的组织表达模式 | 第51页 |
| ·过表达BnPPT1转基因甘蓝型油菜的获得 | 第51-52页 |
| ·抗性检测及分子验证 | 第52-53页 |
| ·籽粒含油量及脂肪酸成分分析 | 第53-55页 |
| ·优化IPCR法能有效分离外源T-DNA侧翼序列 | 第55-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第75-76页 |
