| 摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-37页 |
| 1. L-天冬酰胺酶概述 | 第17-22页 |
| 1.1 L-天冬酰胺酶的来源、结构和作用机理 | 第17-19页 |
| 1.2 L-天冬酰胺酶的克隆表达 | 第19-20页 |
| 1.3 L-天冬酰胺酶的应用 | 第20-22页 |
| 2 酶的分子改造 | 第22-26页 |
| 2.1 理性设计 | 第23-24页 |
| 2.2 非理性设计 | 第24-25页 |
| 2.3 半理性设计 | 第25-26页 |
| 2.4 L-天冬酰胺酶的分子改造研究进展 | 第26页 |
| 3. 研究目的意义及内容 | 第26-28页 |
| 参考文献 | 第28-37页 |
| 第二章 地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶基因的克隆表达及其酶学性质研究 | 第37-55页 |
| 1 材料和方法 | 第37-45页 |
| 1.1 材料 | 第37-39页 |
| 1.2 方法 | 第39-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-51页 |
| 2.1 地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶基因的克隆 | 第45-46页 |
| 2.2 地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶基因的表达 | 第46-47页 |
| 2.3 重组酶的纯化与验证 | 第47页 |
| 2.4 重组酶酶学性质研究 | 第47-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 本章小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第三章 地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶的定向进化 | 第55-79页 |
| 1 材料和方法 | 第55-61页 |
| 1.1 材料 | 第55页 |
| 1.2 方法 | 第55-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-74页 |
| 2.1 易错PCR反应体系的优化 | 第61-64页 |
| 2.2 易错PCR突变文库的构建和高通量筛选 | 第64页 |
| 2.3 易错PCR筛选获得的高酶活突变体序列分析 | 第64-65页 |
| 2.4 DNA Shuffling突变文库的构建及筛选 | 第65-68页 |
| 2.5 突变酶的纯化与验证 | 第68-69页 |
| 2.6 野生型酶和突变酶酶学性质研究 | 第69-72页 |
| 2.7 突变体的序列分析 | 第72页 |
| 2.8 三维结构模拟及分析 | 第72-73页 |
| 2.9 突变酶圆二色谱分析 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 4 本章小结 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第四章 地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶的半理性设计及其酶学性质的研究 | 第79-97页 |
| 1 材料和方法 | 第79-84页 |
| 1.1 材料 | 第79-80页 |
| 1.2 方法 | 第80-84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-92页 |
| 2.1 突变酶基因的获得 | 第84-87页 |
| 2.2 突变酶活力的测定 | 第87-88页 |
| 2.3 突变酶的纯化与验证 | 第88-89页 |
| 2.4 突变酶的酶学性质分析 | 第89-91页 |
| 2.5 突变酶的三维模拟及分析 | 第91-92页 |
| 2.6 圆二色谱分析 | 第92页 |
| 3 讨论 | 第92-93页 |
| 4 本章小结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-97页 |
| 全文结论 | 第97-99页 |
| 论文创新点 | 第99-101页 |
| 硕士期间发表文章 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
