| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第9-27页 |
| 1 MAPK信号通路 | 第9-17页 |
| 1.1 Ras/Raf/MEK/ERK信号通路简介 | 第9-14页 |
| 1.2 Ras/Raf/MEK/ERK对细胞周期进程调控 | 第14-15页 |
| 1.3 Ras/Raf/MEK/ERK级联反应调控凋亡 | 第15页 |
| 1.4 Ras/Raf/MEK/ERK和人类肿瘤 | 第15-17页 |
| 2 BRAF-ERK通路作为治疗靶点 | 第17-23页 |
| 2.1 BRAF抑制剂 | 第17-19页 |
| 2.2 MEK抑制剂 | 第19页 |
| 2.3 联合用药 | 第19-20页 |
| 2.4 BRAFi耐药机制 | 第20-23页 |
| 3 恶性黑色素瘤的表观遗传学 | 第23-27页 |
| 3.1 DNA甲基化与黑色素瘤 | 第23页 |
| 3.2 组蛋白修饰与黑色素瘤 | 第23-26页 |
| 3.3 miRNA与黑色素瘤 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-40页 |
| 1. 细胞来源及培养条件 | 第27页 |
| 2. 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第27-29页 |
| 3. 实时荧光定量逆转录PCR | 第29-30页 |
| 4. 质粒构建及逆转录病毒包装、感染 | 第30-36页 |
| 5. CCK8法检测细胞活性 | 第36页 |
| 6. 小分子化合物库筛选 | 第36页 |
| 7. 细胞克隆形成活性(CFA)检测 | 第36-37页 |
| 8. 试剂信息表 | 第37页 |
| 9. 抗体信息表 | 第37-38页 |
| 10. 引物信息表 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-59页 |
| 第一部分 表观遗传化合物库筛选确定组蛋白H3K4me3修饰参与调控BRAFV~(600E)突变的肿瘤对BRAFi抵抗 | 第40-48页 |
| 第二部分 在BRAFi抵抗的细胞中RAF/ERK通路失去了对MLL/LEDGF调控 | 第48-52页 |
| 1 Menin-MLL复合物参与BRAFi获得性抵抗 | 第48-50页 |
| 2 Menin-MLL复合物参与BRAFi内源性抵抗 | 第50-52页 |
| 第三部分 SPRY4、DUSP6负反馈调控Ras-Raf信号通路介导BRAFi抵抗 | 第52-55页 |
| 第四部分 MI-3作为BRAFi的增敏剂提高BRAFi活性 | 第55-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-62页 |
| 1 靶向H3K4me3修饰的小分子抑制剂MI-3可以有效的抑制BRAFV600E突变的肿瘤细胞活性 | 第59页 |
| 2 对BRAFi敏感性不同的细胞中Raf-ERK通路对MLL/LEDGF调控规律不同 | 第59-61页 |
| 3 MI-3和BRAFi联合机制探索 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
