中文摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-24页 |
1.1 传染性胰坏死病病毒病原学特征 | 第13-15页 |
1.1.1 传染性胰坏死病病毒形态学特征及理化特性 | 第13页 |
1.1.2 传染性胰坏死病病毒分离与培养特性 | 第13-14页 |
1.1.3 传染性胰坏死病病毒分子生物特性 | 第14-15页 |
1.2 传染性胰坏死病病毒流行病学研究进展 | 第15-16页 |
1.3 传染性胰腺坏死病的检测方法 | 第16-18页 |
1.3.1 常规检测方法 | 第16-17页 |
1.3.2 分子学检测法 | 第17页 |
1.3.3 免疫学检测方法 | 第17-18页 |
1.4 胶体金免疫层析技术 | 第18-22页 |
1.4.1 胶体金免疫层析技术原理 | 第18页 |
1.4.2 胶体金免疫层析技术特点 | 第18-19页 |
1.4.3 胶体金免疫层析技术的应用 | 第19-22页 |
1.5 研究目的与意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-34页 |
2.1 试验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 菌种 | 第24页 |
2.1.2 细胞与病毒 | 第24页 |
2.1.3 试验动物 | 第24页 |
2.1.4 主要试剂 | 第24-26页 |
2.1.5 主要实验仪器设备 | 第26-27页 |
2.2 试验方法 | 第27-34页 |
2.2.1 IPNV抗体腹水的制备及纯化 | 第27页 |
2.2.2 兔抗IPNV VP2蛋白多克隆抗体的制备与纯化 | 第27-28页 |
2.2.3 抗IPNV单克隆抗体与抗IPNV VP2多抗血清Western Blot鉴定 | 第28-29页 |
2.2.4 胶体金的制备 | 第29页 |
2.2.5 免疫胶体金探针的制备 | 第29-30页 |
2.2.5.1 标记前抗体蛋白的预处理 | 第29-30页 |
2.2.5.2 免疫胶体金探针的制备 | 第30页 |
2.2.5.3 免疫胶体金探针的纯化与检测 | 第30页 |
2.2.6 试纸条的组装 | 第30-31页 |
2.2.7 胶体金试纸条各项条件的优化 | 第31-32页 |
2.2.8 试纸条性能测试 | 第32-34页 |
3 结果 | 第34-47页 |
3.1 IPNV单抗腹水的制备和纯化结果 | 第34页 |
3.2 兔抗IPNV VP2蛋白多克隆抗体的制备与纯化结果 | 第34-36页 |
3.2.1 兔抗IPNV VP2蛋白的表达结果 | 第34-35页 |
3.2.2 兔抗IPNV VP2蛋白的纯化结果 | 第35-36页 |
3.3 抗IPNV单克隆抗体与抗IPNV VP2多抗血清Western Blot鉴定结果 | 第36-37页 |
3.4 胶体金质量评价 | 第37-38页 |
3.5 免疫胶体金探针的制备 | 第38-40页 |
3.5.1 胶体金吸附抗体蛋白最佳pH值的确定 | 第38页 |
3.5.2 抗体结合胶体金最适蛋白量的确定 | 第38-39页 |
3.5.3 免疫胶体金探针的检测 | 第39-40页 |
3.6 胶体金试纸条各项条件的优化结果 | 第40-44页 |
3.6.1 最佳玻璃纤维素膜的选择结果 | 第40页 |
3.6.2 最佳硝酸纤维素膜的选择结果 | 第40-41页 |
3.6.3 最佳样品垫的选择结果 | 第41页 |
3.6.4 最佳吸收垫的选择结果 | 第41页 |
3.6.5 玻璃纤维素膜处理液的选择结果 | 第41-42页 |
3.6.6 样品垫处理液的选择结果 | 第42页 |
3.6.7 检测线、质控线包被液的选择结果 | 第42-43页 |
3.6.8 硝酸纤维素膜封闭液的选择结果 | 第43页 |
3.6.9 硝酸纤维素膜封闭时间的选择结果 | 第43-44页 |
3.6.10 试纸条结果的判定 | 第44页 |
3.7 试纸条性能检测结果 | 第44-47页 |
3.7.1 特异性实验检测结果 | 第44-45页 |
3.7.2 敏感性实验检测结果 | 第45页 |
3.7.3 稳定性实验检测结果 | 第45-46页 |
3.7.4 重复性实验检测结果 | 第46页 |
3.7.5 临床样品检测结果 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-52页 |
4.1 胶体金试纸条显色原理 | 第47页 |
4.2 影响胶体金质量的因素 | 第47-48页 |
4.3 胶体金pH值的调节 | 第48页 |
4.4 试纸条的制备 | 第48-49页 |
4.4.1 试纸条材料的选择 | 第48-49页 |
4.4.2 试纸条制作各种用量的确定 | 第49页 |
4.4.3 试纸条的组装和保存 | 第49页 |
4.5 关于试纸条优化过程中假阳性结果问题 | 第49-52页 |
4.5.1 电荷的影响 | 第50页 |
4.5.2 离子强度的影响 | 第50页 |
4.5.3 表面活性剂、变性剂的影响 | 第50页 |
4.5.4 封闭液的影响 | 第50-51页 |
4.5.5 NC膜处理液的影响 | 第51页 |
4.5.6 样品垫处理液的影响 | 第51-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63页 |