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传染性胰腺坏死病毒胶体金免疫层析试纸条的研制

中文摘要第10-11页
英文摘要第11-13页
1 前言第13-24页
    1.1 传染性胰坏死病病毒病原学特征第13-15页
        1.1.1 传染性胰坏死病病毒形态学特征及理化特性第13页
        1.1.2 传染性胰坏死病病毒分离与培养特性第13-14页
        1.1.3 传染性胰坏死病病毒分子生物特性第14-15页
    1.2 传染性胰坏死病病毒流行病学研究进展第15-16页
    1.3 传染性胰腺坏死病的检测方法第16-18页
        1.3.1 常规检测方法第16-17页
        1.3.2 分子学检测法第17页
        1.3.3 免疫学检测方法第17-18页
    1.4 胶体金免疫层析技术第18-22页
        1.4.1 胶体金免疫层析技术原理第18页
        1.4.2 胶体金免疫层析技术特点第18-19页
        1.4.3 胶体金免疫层析技术的应用第19-22页
    1.5 研究目的与意义第22-24页
2 材料与方法第24-34页
    2.1 试验材料第24-27页
        2.1.1 菌种第24页
        2.1.2 细胞与病毒第24页
        2.1.3 试验动物第24页
        2.1.4 主要试剂第24-26页
        2.1.5 主要实验仪器设备第26-27页
    2.2 试验方法第27-34页
        2.2.1 IPNV抗体腹水的制备及纯化第27页
        2.2.2 兔抗IPNV VP2蛋白多克隆抗体的制备与纯化第27-28页
        2.2.3 抗IPNV单克隆抗体与抗IPNV VP2多抗血清Western Blot鉴定第28-29页
        2.2.4 胶体金的制备第29页
        2.2.5 免疫胶体金探针的制备第29-30页
            2.2.5.1 标记前抗体蛋白的预处理第29-30页
            2.2.5.2 免疫胶体金探针的制备第30页
            2.2.5.3 免疫胶体金探针的纯化与检测第30页
        2.2.6 试纸条的组装第30-31页
        2.2.7 胶体金试纸条各项条件的优化第31-32页
        2.2.8 试纸条性能测试第32-34页
3 结果第34-47页
    3.1 IPNV单抗腹水的制备和纯化结果第34页
    3.2 兔抗IPNV VP2蛋白多克隆抗体的制备与纯化结果第34-36页
        3.2.1 兔抗IPNV VP2蛋白的表达结果第34-35页
        3.2.2 兔抗IPNV VP2蛋白的纯化结果第35-36页
    3.3 抗IPNV单克隆抗体与抗IPNV VP2多抗血清Western Blot鉴定结果第36-37页
    3.4 胶体金质量评价第37-38页
    3.5 免疫胶体金探针的制备第38-40页
        3.5.1 胶体金吸附抗体蛋白最佳pH值的确定第38页
        3.5.2 抗体结合胶体金最适蛋白量的确定第38-39页
        3.5.3 免疫胶体金探针的检测第39-40页
    3.6 胶体金试纸条各项条件的优化结果第40-44页
        3.6.1 最佳玻璃纤维素膜的选择结果第40页
        3.6.2 最佳硝酸纤维素膜的选择结果第40-41页
        3.6.3 最佳样品垫的选择结果第41页
        3.6.4 最佳吸收垫的选择结果第41页
        3.6.5 玻璃纤维素膜处理液的选择结果第41-42页
        3.6.6 样品垫处理液的选择结果第42页
        3.6.7 检测线、质控线包被液的选择结果第42-43页
        3.6.8 硝酸纤维素膜封闭液的选择结果第43页
        3.6.9 硝酸纤维素膜封闭时间的选择结果第43-44页
        3.6.10 试纸条结果的判定第44页
    3.7 试纸条性能检测结果第44-47页
        3.7.1 特异性实验检测结果第44-45页
        3.7.2 敏感性实验检测结果第45页
        3.7.3 稳定性实验检测结果第45-46页
        3.7.4 重复性实验检测结果第46页
        3.7.5 临床样品检测结果第46-47页
4 讨论第47-52页
    4.1 胶体金试纸条显色原理第47页
    4.2 影响胶体金质量的因素第47-48页
    4.3 胶体金pH值的调节第48页
    4.4 试纸条的制备第48-49页
        4.4.1 试纸条材料的选择第48-49页
        4.4.2 试纸条制作各种用量的确定第49页
        4.4.3 试纸条的组装和保存第49页
    4.5 关于试纸条优化过程中假阳性结果问题第49-52页
        4.5.1 电荷的影响第50页
        4.5.2 离子强度的影响第50页
        4.5.3 表面活性剂、变性剂的影响第50页
        4.5.4 封闭液的影响第50-51页
        4.5.5 NC膜处理液的影响第51页
        4.5.6 样品垫处理液的影响第51-52页
5 结论第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-63页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第63页

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