| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 海洋无脊椎动物幼虫附着变态的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.1 海洋无脊椎动物个体发育 | 第11页 |
| 1.1.2 海洋无脊椎动物幼体变态研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 IIS信号通路与细胞增殖的关系 | 第12-15页 |
| 1.2.1 细胞增殖的概念 | 第12页 |
| 1.2.2 细胞增殖的特征 | 第12页 |
| 1.2.3 细胞增殖的检测法 | 第12-14页 |
| 1.2.4 IIS信号通路与细胞增殖的关系 | 第14-15页 |
| 1.3 IIS信号通路与细胞凋亡的关系 | 第15-18页 |
| 1.3.1 细胞凋亡的概念 | 第15页 |
| 1.3.2 细胞凋亡的特征 | 第15页 |
| 1.3.3 细胞凋亡检测方法 | 第15-17页 |
| 1.3.4 IIS信号通路与细胞凋亡的关系 | 第17-18页 |
| 1.4 胰岛素诱导蛋白基因的研究进展 | 第18页 |
| 1.5 胰岛素降解酶基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第19页 |
| 1.7 主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-43页 |
| 2.1 材料 | 第20-26页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器和试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制方法 | 第21-23页 |
| 2.1.4 引物 | 第23-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-43页 |
| 2.2.1 杂色鲍各组织总RNA的提取(RDP法) | 第26页 |
| 2.2.2 基因组DNA的去除与cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| 2.2.3 SMART-RACE技术获取基因全长 | 第27-30页 |
| 2.2.4 割胶纯化目的片段并连接载体 | 第30-31页 |
| 2.2.5 感受态细胞的转化、筛选及测序 | 第31-32页 |
| 2.2.6 目的基因的生物信息学分析 | 第32页 |
| 2.2.7 HdIGFBP7和HdMIRP的原核表达 | 第32-35页 |
| 2.2.8 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第35-36页 |
| 2.2.9 Ni亲和层析法纯化外源蛋白 | 第36-37页 |
| 2.2.10 目的蛋白抗体的制备 | 第37页 |
| 2.2.11 酶联免疫分析(ELISA) | 第37页 |
| 2.2.12 亲贝的培养繁育及样品采集 | 第37-38页 |
| 2.2.13 实时荧光定量PCR及数据分析 | 第38-39页 |
| 2.2.14 杂色鲍幼虫RNA干扰实验 | 第39-40页 |
| 2.2.15 杂色鲍幼虫诱导实验 | 第40-41页 |
| 2.2.16 整胚原位杂交 | 第41-43页 |
| 第3章 结果 | 第43-77页 |
| 3.1 杂色鲍各组织总RNA的抽提结果 | 第43页 |
| 3.2 目的基因的扩增结果 | 第43-44页 |
| 3.3 HdINSIG2生物信息学分析 | 第44-49页 |
| 3.3.1 HdINSIG2cDNA序列分析 | 第44-46页 |
| 3.3.2 同源分析与系统发育分析 | 第46-48页 |
| 3.3.3 HdINSIG2三级结构预测 | 第48-49页 |
| 3.4 HdIDE生物信息学分析 | 第49-58页 |
| 3.4.1 HdIDEcDNA序列分析 | 第49-52页 |
| 3.4.2 同源分析与系统发育分析 | 第52-56页 |
| 3.4.3 HdIDE三级结构预测 | 第56-58页 |
| 3.5 HdPCNA生物信息学分析 | 第58-62页 |
| 3.5.1 HdPCNAcDNA序列分析 | 第58-59页 |
| 3.5.2 同源分析与系统发育分析 | 第59-61页 |
| 3.5.3 蛋白质三级结构预测 | 第61-62页 |
| 3.6 HdH3生物信息学分析 | 第62-66页 |
| 3.6.1 HdH3cDNA序列分析 | 第62-63页 |
| 3.6.2 同源分析与系统发育分析 | 第63-65页 |
| 3.6.3 蛋白质三级结构预测 | 第65-66页 |
| 3.7 重组表达载体的构建 | 第66-67页 |
| 3.8 原核表达与蛋白纯化 | 第67页 |
| 3.9 ELISA间接测定抗体效价 | 第67-68页 |
| 3.10 dsRNA的制备 | 第68-69页 |
| 3.11 RNAi对幼虫发育的影响 | 第69页 |
| 3.12 诱导对幼虫发育的影响 | 第69-70页 |
| 3.13 幼虫发育过程中基因表达情况 | 第70-73页 |
| 3.14 幼虫在RNAi和诱导刺激下凋亡和增殖基因的原位表达 | 第73-77页 |
| 第4章 讨论 | 第77-81页 |
| 4.1 HdINSIG2在幼虫变态过程中的作用分析 | 第77-78页 |
| 4.2 HdIDE在幼虫变态过程中的作用分析 | 第78-79页 |
| 4.3 HdIGFBP7与HdMIRP在变态过程中的作用分析 | 第79-81页 |
| 第5章 总结与展望 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 在学期间科研成果情况 | 第90页 |
