| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 琼胶 | 第10-11页 |
| 1.2 琼胶降解菌 | 第11-12页 |
| 1.3 琼胶酶 | 第12-15页 |
| 1.3.1 琼胶酶的分类 | 第12页 |
| 1.3.2 琼胶酶的酶学性质 | 第12-14页 |
| 1.3.3 琼胶酶的基因克隆研究 | 第14页 |
| 1.3.4 琼胶酶的应用 | 第14-15页 |
| 1.4 染色体步移及其应用 | 第15-16页 |
| 1.5 本论文的研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 琼胶降解菌的分离筛选与培养 | 第17-26页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第17页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂及引物 | 第17-19页 |
| 2.1.4 溶液的配制 | 第19页 |
| 2.1.5 培养基 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 琼胶降解菌的筛选 | 第19-20页 |
| 2.2.2 革兰氏染色 | 第20页 |
| 2.2.3 抗生素敏感性 | 第20页 |
| 2.2.4 16S rDNA鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-25页 |
| 2.3.1 琼胶降解菌的分离纯化 | 第21-22页 |
| 2.3.2 革兰氏染色结果 | 第22页 |
| 2.3.3 菌株的抗生素敏感性 | 第22-23页 |
| 2.3.4 16S rDNA目标片段的克隆结果 | 第23页 |
| 2.3.5 16S rDNA目的片段的序列分析 | 第23-24页 |
| 2.3.6 系统发育树的构建 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-26页 |
| 3 琼胶降解菌FG4中间保守片段的克隆 | 第26-33页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第26-28页 |
| 3.1.1 菌株 | 第26页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.4 PCR引物 | 第27-28页 |
| 3.1.5 培养基 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.2.1 细菌DNA的提取 | 第28页 |
| 3.2.2 PCR扩增引物的设计 | 第28页 |
| 3.2.3 保守区域片段的PCR扩增 | 第28-29页 |
| 3.2.4 回收、连接与转化 | 第29页 |
| 3.2.5 重组质粒的鉴定与序列的测定 | 第29页 |
| 3.2.6 序列分析 | 第29-30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-32页 |
| 3.3.1 FG4中间保守区域序列的克隆结果 | 第30页 |
| 3.3.2 FG4中间保守区域的序列分析 | 第30-31页 |
| 3.3.3 基因片段Neighbour-Joining系统进化树的构建 | 第31-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-33页 |
| 4 琼胶降解菌FG4基因侧翼序列的克隆 | 第33-49页 |
| 4.1 实验材料及仪器 | 第33-35页 |
| 4.1.1 菌株 | 第33页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第33页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第33-34页 |
| 4.1.4 PCR引物 | 第34-35页 |
| 4.1.5 培养基 | 第35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35-41页 |
| 4.2.1 细菌DNA的提取 | 第35页 |
| 4.2.2 染色体步移引物的设计 | 第35-36页 |
| 4.2.3 FG4基因5'端序列的扩增 | 第36-38页 |
| 4.2.4 FG4基因3'端序列的扩增 | 第38-40页 |
| 4.2.5 回收、连接与转化 | 第40页 |
| 4.2.6 重组质粒的鉴定与序列的测定 | 第40页 |
| 4.2.7 琼胶降解菌FG4基因的序列和结构分析 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-47页 |
| 4.3.1 FG4基因5'端序列的克隆结果 | 第41页 |
| 4.3.2 FG4基因3'端序列的克隆结果 | 第41-42页 |
| 4.3.3 FG4基因5'端序列的序列分析 | 第42-43页 |
| 4.3.4 FG4基因3'端序列的序列分析 | 第43页 |
| 4.3.5 FG4基因片段DNA拼接序列的序列分析 | 第43-45页 |
| 4.3.6 琼胶降解菌“agaFG4-B”基因的结构分析 | 第45-46页 |
| 4.3.7 agaFG4-B基因Neighbour-Joining系统进化树的构建 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-49页 |
| 5 总结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 缩略语表 | 第56-57页 |
| 攻读硕士研究生期间发表的论文 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
