| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-31页 |
| 1.1 乳腺癌 | 第11-16页 |
| 1.1.1 乳腺癌的分类 | 第11页 |
| 1.1.2 乳腺癌的发病机制 | 第11-16页 |
| 1.1.2.1 突变基因与乳腺癌 | 第12-13页 |
| 1.1.2.1.1 BRCA1、BRCA2与乳腺癌 | 第12-13页 |
| 1.1.2.1.2 p53与乳腺癌 | 第13页 |
| 1.1.2.2 细胞信号通路与乳腺癌 | 第13-16页 |
| 1.1.2.2.1 WNT 信号通路与乳腺癌 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2.2 TGF-β 信号通路与乳腺癌 | 第14-15页 |
| 1.1.2.2.3 雌激素信号通路与乳腺癌 | 第15页 |
| 1.1.2.2.4. 胰岛素样生长因子信号通路与乳腺癌 | 第15-16页 |
| 1.2 囊泡运输 | 第16-29页 |
| 1.2.1 胞外分泌复合体Exocyst | 第16-18页 |
| 1.2.1.1 Exocyst 的组成 | 第16-17页 |
| 1.2.1.2 Exocyst 在细胞质膜上的锚定 | 第17-18页 |
| 1.2.3 Exocyst 的调控 | 第18-21页 |
| 1.2.3.1 小G蛋白对Exocyst的调节 | 第19-21页 |
| 1.2.3.1.1 Rab 家族对Exocyst的调节 | 第19页 |
| 1.2.3.1.2 Rho 家族对Exocyst的调节 | 第19-20页 |
| 1.2.3.1.3 Ral 家族对Exocyst的调节 | 第20-21页 |
| 1.2.3.2 激酶对Exocyst的调节 | 第21页 |
| 1.2.4 Exocyst 的功能 | 第21-24页 |
| 1.2.4.1 Exocyst 与细胞的极性建立 | 第21-22页 |
| 1.2.4.2 Exocyst 与细胞的侵袭、迁移 | 第22-23页 |
| 1.2.4.3 Exocyst 与细胞生长进程 | 第23-24页 |
| 1.2.4.4 Exocyst 与自噬 | 第24页 |
| 1.2.5 Exo70 | 第24-28页 |
| 1.2.5.1 Exo70 的结构 | 第24-25页 |
| 1.2.5.2 Exo70 的定位 | 第25-26页 |
| 1.2.5.3 Exo70 的功能 | 第26-28页 |
| 1.2.5.3.1 Exo70 在细胞分泌过程中的作用 | 第26页 |
| 1.2.5.3.2 Exo70 在动物细胞神经元生长中的作用 | 第26页 |
| 1.2.5.3.3 Exo70 在细胞葡萄糖摄取过程中的作用 | 第26-27页 |
| 1.2.5.3.4 Exo70 在细胞迁移过程中的功能 | 第27页 |
| 1.2.5.3.5 Exo70 在细胞侵袭过程中的作用 | 第27-28页 |
| 1.2.5.3.6 Exo70 参与mRNA剪接 | 第28页 |
| 1.2.6 Exo70 促进乳腺癌侵袭转移的机制 | 第28-29页 |
| 1.2.6.1 Exo70 作为Exocyst亚基促进乳腺癌的侵袭转移 | 第28-29页 |
| 1.2.6.2 Exo70 独立于Exocyst促进乳腺癌的侵袭转移 | 第29页 |
| 1.3 本论文的研究目的与研究意义 | 第29-31页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第31-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.1.1 细胞系、质粒 | 第31页 |
| 2.1.2 工具酶与抗体 | 第31-32页 |
| 2.1.3 主要试剂和耗材 | 第32-34页 |
| 2.1.3.1 细胞培养试剂 | 第33页 |
| 2.1.3.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.2 主要溶液的配制 | 第34-37页 |
| 2.2.1 细胞培养液 | 第34-35页 |
| 2.2.2 细胞裂解液 | 第35页 |
| 2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳相关溶液 | 第35-36页 |
| 2.2.4 DNA 琼脂糖凝胶电泳相关溶液 | 第36页 |
| 2.2.5 质粒提取相关溶液 | 第36-37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-41页 |
| 2.3.1 分子实验 | 第37-39页 |
| 2.3.1.1 过表达质粒的构建 | 第37-38页 |
| 2.3.1.2 缺失突变体质粒的构建 | 第38-39页 |
| 2.3.1.3 突变质粒的构建 | 第39页 |
| 2.3.4 提取质粒DNA | 第39-41页 |
| 2.3.4.1 小量提取质粒DNA (碱裂解法) | 第39-40页 |
| 2.3.4.2 中量提取质粒DNA | 第40-41页 |
| 2.4 细胞水平实验 | 第41-49页 |
| 2.4.1 细胞的复苏 | 第41页 |
| 2.4.2 细胞的培养与传代 | 第41-42页 |
| 2.4.3 细胞的冻存 | 第42页 |
| 2.4.4 细胞转染 | 第42-43页 |
| 2.4.4.1 PEI转染293T细胞: | 第42页 |
| 2.4.4.2 Lipo2000 转染231细胞: | 第42-43页 |
| 2.4.5 蛋白水平实验 | 第43-47页 |
| 2.4.5.2 免疫共沉淀实验 | 第46-47页 |
| 2.4.6 Transwell实验 | 第47页 |
| 2.4.7 数据分析 | 第47-49页 |
| 第三章 实验结果 | 第49-55页 |
| 3.1 EXO70自身结合强于其他亚基 | 第49-50页 |
| 3.2 EXO70自身聚合的关键区段 | 第50-53页 |
| 3.2.1 氨基端影响Exo70自身聚合的序列 | 第50-51页 |
| 3.2.2 羧基端端影响Exo70自身聚合的序列 | 第51-52页 |
| 3.2.3 影响Exo70自身聚合的精确序列 | 第52-53页 |
| 3.3 EXO70自身聚合的关键序列对乳腺癌细胞迁移的影响 | 第53-55页 |
| 第四章 小结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
