| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-17页 |
| 1.1 温度是鱼类在水体中的重要影响因子 | 第12-13页 |
| 1.2 环境胁迫下鱼类皮肤的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 蛋白质二硫键异构酶(PDI)的研究简史 | 第14页 |
| 1.4 蛋白质二硫键异构酶(PDI)家族的分类 | 第14-16页 |
| 1.4.1 PDIA3 | 第14-15页 |
| 1.4.2 PDIA4 | 第15页 |
| 1.4.3 ERp44 | 第15页 |
| 1.4.4 ERp29 | 第15-16页 |
| 1.4.5 PDI家族的其它成员 | 第16页 |
| 1.5 PDI对大菱鲆应答高温胁迫的重要意义 | 第16-17页 |
| 第二章 基于大菱鲆皮肤组织转录组的抗逆基因的研究 | 第17-45页 |
| 2.1 转录组抗逆基因的筛选 | 第17-24页 |
| 2.1.1 皮肤组织取样及建库测序 | 第17页 |
| 2.1.2 文库构建及测序 | 第17页 |
| 2.1.3 原始序列数据处理 | 第17-18页 |
| 2.1.4 转录本拼接 | 第18页 |
| 2.1.5 基因功能注释 | 第18-21页 |
| 2.1.6 基因表达水平分析 | 第21-22页 |
| 2.1.7 基因差异表达分析 | 第22-23页 |
| 2.1.8 抗逆基因的筛选 | 第23-24页 |
| 2.2 大菱鲆PDIA3、PDIA6基因的克隆 | 第24-27页 |
| 2.2.1 材料 | 第25页 |
| 2.2.2 方法 | 第25-27页 |
| 2.3 大菱鲆PDIA3、PDIA6基因的生物信息学分析 | 第27-36页 |
| 2.3.1 生物信息学分析软件 | 第27-28页 |
| 2.3.2 大菱鲆PDIA3基因cDNA全长的获得和生物信息学分析 | 第28-32页 |
| 2.3.3 大菱鲆PDIA6基因cDNA全长的获得和生物信息学分析 | 第32-36页 |
| 2.4 大菱鲆皮肤组织转录组抗逆基因的组织表达分析 | 第36-44页 |
| 2.4.1 荧光定量PCR和数据统计与分析 | 第36页 |
| 2.4.2 各基因组织分布结果 | 第36-39页 |
| 2.4.3 各基因温度胁迫后组织表达变化结果 | 第39-42页 |
| 2.4.4 结果讨论 | 第42-44页 |
| 2.5 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 大菱鲆PDIA3基因的表达和功能验证 | 第45-52页 |
| 3.1 原核表达载体的构建 | 第45-49页 |
| 3.1.1 材料 | 第45页 |
| 3.1.2 方法 | 第45-49页 |
| 3.2 PDIA3的蛋白表达 | 第49-51页 |
| 3.2.1 重组质粒转化表达菌株 | 第49页 |
| 3.2.2 pET-28a-PDIA3在大肠杆菌中的诱导表达 | 第49-50页 |
| 3.2.3 SDS-PAGE凝胶电泳检测结果 | 第50页 |
| 3.2.4 优化实验 | 第50-51页 |
| 3.3 小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
