中文摘要 | 第12-14页 |
ABSTRACT | 第14-16页 |
前言 | 第17-32页 |
参考文献 | 第25-32页 |
第一章 载体的制备与表征 | 第32-47页 |
1 试剂与仪器 | 第32-33页 |
1.1 试剂 | 第32页 |
1.2 仪器 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-36页 |
2.1 载体的制备 | 第33-34页 |
2.2 载体的表征 | 第34页 |
2.2.1 扫描电镜(SEM)观察 | 第34页 |
2.2.2 透射电镜(TEM)观察 | 第34页 |
2.2.3 比表面积及孔体积测试 | 第34页 |
2.3 二氧化硅载体(S1)、碳载体(C1)的胃肠刺激性评价 | 第34页 |
2.4 载体细胞毒性评价 | 第34-36页 |
2.4.1 溶液的配置 | 第34-35页 |
2.4.2 Caco-2细胞培养 | 第35-36页 |
2.4.3 四唑盐(MTT)法检测细胞存活率 | 第36页 |
3 结果与讨论 | 第36-44页 |
3.1 扫描电镜、透射电镜 | 第36-39页 |
3.1.1 载体(S1)的形貌 | 第36-37页 |
3.1.2 载体(S2)的形貌 | 第37页 |
3.1.3 载体(SBA-15)的形貌 | 第37-38页 |
3.1.4 载体(C1)的形貌 | 第38-39页 |
3.2 氮吸附 | 第39-41页 |
3.2.1 回执环结构分析 | 第39-40页 |
3.2.2 比表面积、孔容、孔径及形成机理分析 | 第40-41页 |
3.3 胃肠刺激性评价 | 第41-42页 |
3.4 细胞毒性评价 | 第42-44页 |
4 本章小结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
第二章 载抗原体系的制备与体外释放行为评价 | 第47-68页 |
1 试剂与仪器 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-56页 |
2.1 二喹啉甲酸(BCA)法体外测定蛋白浓度方法的建立 | 第48-50页 |
2.1.1 测定波长的选择 | 第48页 |
2.1.2 BCA法测定牛血清白蛋白(BSA)蛋白浓度 | 第48-49页 |
2.1.3 精密度、准确度 | 第49-50页 |
2.2 载抗原体系的制备与SEM和氮吸附观测 | 第50页 |
2.2.1 载抗原方法的选择 | 第50页 |
2.2.1.1 吸附法载抗原 | 第50页 |
2.2.1.2 反复冻融法载抗原 | 第50页 |
2.2.2 载抗原体系的形貌观察及结构参数测定 | 第50页 |
2.2.2.1 扫描电镜(SEM)观察 | 第50页 |
2.2.2.2 比表面积及孔体积测试 | 第50页 |
2.3 体外释放实验方法的建立 | 第50-53页 |
2.3.1 释放介质中测定波长的建立 | 第50-52页 |
2.3.2 释放介质中BSA标准曲线的制备 | 第52-53页 |
2.3.2.1 pH 1.2盐酸溶液中BSA标准曲线的制备 | 第52页 |
2.3.2.2 pH 6.8磷酸盐缓冲溶液中BSA标准曲线的制 | 第52-53页 |
2.3.3 抗原体外释放测定方法 | 第53页 |
2.4 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第53-56页 |
2.5 载体胃肠稳定性评价 | 第56页 |
3 结果与讨论 | 第56-65页 |
3.1 载抗原体系的形貌观察及结构参数测定 | 第56-59页 |
3.1.1 载抗原体系的形貌结构 | 第56-57页 |
3.1.2 载抗原体系的比表面积及比孔容 | 第57-59页 |
3.2 载药方法对抗原吸附量的比较 | 第59-62页 |
3.2.1 吸附法载药量测定 | 第59-60页 |
3.2.2 反复冻融法载药量测定 | 第60页 |
3.2.3 载药条件的优化 | 第60-62页 |
3.2.3.1 优化抗原与载体载药比例 | 第60-61页 |
3.2.3.2 优化吸附时间 | 第61-62页 |
3.3 载抗原体系的体外释放实验结果 | 第62-63页 |
3.4 SDS-PAGE考察BSA完整性 | 第63-64页 |
3.5 载体胃肠稳定性评价 | 第64-65页 |
4 本章小结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-68页 |
第三章 载抗原体系口服接种BALB/c小鼠免疫学实验研究 | 第68-87页 |
1 试剂与仪器 | 第68页 |
2 方法 | 第68-73页 |
2.1 免疫分组 | 第68页 |
2.2 免疫方案 | 第68-69页 |
2.3 样品采集 | 第69页 |
2.3.1 血清样品采集 | 第69页 |
2.3.2 唾液样品采集 | 第69页 |
2.3.3 肠洗液样品采集 | 第69页 |
2.4 ELISA实验条件的选择 | 第69-72页 |
2.4.1 ELISA实验试剂配制 | 第69-70页 |
2.4.2 辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠IgG稀释度的优化 | 第70页 |
2.4.3 辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠IgG1和IgG2a稀释度的优化 | 第70-71页 |
2.4.4 辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠IgA稀释度的优化 | 第71页 |
2.4.5 BSA包被浓度的优化 | 第71-72页 |
2.5 ELISA实验测定免疫后小鼠体内抗体 | 第72-73页 |
2.5.1 免疫小鼠血液中IgG滴度测定 | 第72-73页 |
2.5.2 免疫小鼠唾液、肠液IgA滴度测定 | 第73页 |
2.5.3 免疫小鼠IgG1、IgG2a测定 | 第73页 |
3 结果与讨论 | 第73-84页 |
3.1 ELISA实验条件的优化 | 第73-78页 |
3.1.1 辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgG稀释度的优化 | 第73-74页 |
3.1.2 辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgG1和IgG2a稀释度的优 | 第74-76页 |
3.1.3 辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgA稀释度的优化 | 第76-77页 |
3.1.4 BSA浓度的优化 | 第77-78页 |
3.2 小鼠免疫后抗体滴度检测 | 第78-84页 |
3.2.1 小鼠血清IgG滴度检测 | 第78-81页 |
3.2.2 小鼠肠液及唾液IgA滴度检测 | 第81-83页 |
3.2.3 免疫小鼠血液样品IgG1、IgG2a滴度测定 | 第83-84页 |
4 本章小结 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-87页 |
全文结论 | 第87-88页 |
论文研究的创新点、存在的不足及进一步研究的设想 | 第88-89页 |
附录1: 博士期间发表论文 | 第89-90页 |
附录2: 肝性脑病伴肝硬化腹水患者病历分析 | 第90-99页 |
附录3: 心脏舒张功能衰竭患者病例分析 | 第99-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
附件 | 第107-122页 |
学位论文自愿预先检测申请表 | 第122页 |