摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-16页 |
1 前言 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-29页 |
2.1 材料与仪器 | 第18-19页 |
2.1.1 菌株、细胞和主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.2 仪器设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-29页 |
2.2.1 细菌培养及LPS提取、纯化与鉴定 | 第19-20页 |
2.2.2 细胞培养 | 第20页 |
2.2.3 病例收集与处理 | 第20-21页 |
2.2.4 苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin ,H-E)染色检测样本的炎症浸润程度 | 第21页 |
2.2.5 免疫组织化学(Immunohistochemical,IHC)染色检测Hey2蛋白的表达 | 第21页 |
2.2.6 细胞转染 | 第21-22页 |
2.2.7 Real-time RT-PCR检测miR-146a-5p、IL-6、Hey2 m RNA相对表达量 | 第22-25页 |
2.2.8 ELISA检测IL-6 蛋白分泌情况 | 第25页 |
2.2.9 Western blot检测Hey2蛋白表达情况 | 第25-26页 |
2.2.10 双荧光素酶活性检测(Dual Luciferase Assay)验证miR-146a-5p与Hey23‘UTR结合情况 | 第26-27页 |
2.2.11 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,Ch IP)检测Hey2蛋白与IL-6 启动子的结合情况。 | 第27-28页 |
2.2.12 统计分析 | 第28-29页 |
3 实验结果 | 第29-44页 |
3.1 慢性根尖周炎组织中miR-146a-5p、Hey2的表达 | 第29-31页 |
3.1.1 H-E染色检测慢性根尖周炎组织中炎症浸润程度 | 第29页 |
3.1.2 免疫组织化学染色检测慢性根尖周炎组织中Hey2蛋白的表达 | 第29-30页 |
3.1.3 Real-Time RT-PCR检测慢性根尖周炎组织中miR-146a-5p、Hey2m RNA的相对表达量 | 第30-31页 |
3.2 miR-146a-5p与P.endodontalis LPS诱导MC3T3-E1细胞表达IL-6 呈负相关性16 | 第31-35页 |
3.2.1 不同质量浓度P.endodontalis LPS对MC3T3-E1细胞表达miR-146a-5p、IL-6 的影响 | 第31-32页 |
3.2.2 P.endodontalis LPS不同作用时间对MC3T3-E1细胞表达miR-146a-5p、IL-6 的影响 | 第32-34页 |
3.2.3 过表达/抑制miR-146a-5p对P.endodontalis LPS诱导MC3T3-E1细胞表达IL-6 的影响 | 第34-35页 |
3.3 miR-146a-5p靶向调控Hey2的机制研究 | 第35-39页 |
3.3.1 miR-146a-5p与Hey2靶向关系生物学信息预测结果 | 第35页 |
3.3.2 过表达/抑制miR-146a-5p对P.endodontalis LPS诱导MC3T3-E1细胞表达Hey2的影响 | 第35-36页 |
3.3.3 过表达Hey2对P.endodontalis LPS诱导MC3T3-E1细胞表达miR-146a-5p的影响 | 第36-38页 |
3.3.4 双荧光素酶活性检测实验验证miR-146a-5p与Hey23‘UTR结合情况 | 第38-39页 |
3.4 Hey2抑制P.endodontalis LPS诱导MC3T3-E1细胞表达IL-6 | 第39-44页 |
3.4.1 不同质量浓度P.endodontalis LPS对MC3T3-E1细胞表达Hey2的影响 | 第39页 |
3.4.2 P.endodontalis LPS不同作用时间对MC3T3-E1细胞表达Hey2的影响 | 第39-40页 |
3.4.3 过表达Hey2对P.endodontalis LPS诱导MC3T3-E1细胞表达IL-6 的影响 | 第40-41页 |
3.4.4 MC3T3-E1细胞中Hey2与IL-6 启动子结合情况 | 第41-44页 |
4 讨论 | 第44-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
本研究创新性的自我评价 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
综述 | 第59-76页 |
参考文献 | 第70-76页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
个人简历 | 第78页 |