摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 绪论 | 第11-15页 |
1.1 UV-B和植物的生长发育 | 第11页 |
1.2 UV-B受体UVR8的研究进展 | 第11-12页 |
1.3 UV-B辐射与其他环境因子的复合作用 | 第12-13页 |
1.4 UV-B辐射与ABA | 第13-14页 |
1.5 研究的目的意义 | 第14-15页 |
2 白桦BpUVR8基因的克隆与生物信息学分析 | 第15-25页 |
2.1 材料 | 第15页 |
2.2 方法 | 第15-18页 |
2.2.1 白桦组培苗总RNA的提取 | 第15页 |
2.2.2 白桦cDNA的合成 | 第15-16页 |
2.2.3 BpUVR8基因全长序列cDNA的克隆 | 第16-18页 |
2.2.4 生物信息学分析 | 第18页 |
2.3 结果与分析 | 第18-24页 |
2.3.1 白桦BpUVR8基因核酸组成成分分析 | 第18-19页 |
2.3.2 氨基酸的理化性质分析 | 第19页 |
2.3.3 白桦BpUVR8蛋白的一级结构预测 | 第19-20页 |
2.3.4 蛋白质二级结构分析 | 第20页 |
2.3.5 蛋白质的三级结构分析 | 第20-21页 |
2.3.6 基因同源进化分析 | 第21-24页 |
2.4 讨论 | 第24页 |
2.5 本章小结 | 第24-25页 |
3 白桦BpUVR8基因的表达模式分析 | 第25-33页 |
3.1 材料 | 第25页 |
3.2 方法 | 第25-29页 |
3.2.1 白桦BpUVR8基因的组织表达模式分析 | 第25页 |
3.2.2 UV-B诱导白桦BpUVR8基因的表达分析 | 第25页 |
3.2.3 白桦BpUVR8基因的非生物胁迫及信号诱导表达分析 | 第25页 |
3.2.4 白桦总RNA的提取及浓度测定 | 第25页 |
3.2.5 反转录cDNA的合成 | 第25-26页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR | 第26页 |
3.2.7 白桦BpUVR8基因亚细胞定位的研究 | 第26-29页 |
3.3 结果与分析 | 第29-32页 |
3.3.1 BpUVR8基因的组织表达模式分析 | 第29页 |
3.3.2 不同月份白桦叶片中BpUVR8的表达分析 | 第29-30页 |
3.3.3 UV-B诱导白桦BpUVR8基因的表达分析 | 第30页 |
3.3.4 白桦BpUVR8基因的非生物胁迫及信号诱导表达分析 | 第30-31页 |
3.3.5 白桦BpUVR8蛋白的亚细胞定位 | 第31-32页 |
3.4 讨论 | 第32页 |
3.5 本章小结 | 第32-33页 |
4 白桦BpUVR8基因启动子的克隆与分析 | 第33-40页 |
4.1 材料 | 第33页 |
4.2 方法 | 第33-35页 |
4.2.1 白桦基因组DNA的提取 | 第33页 |
4.2.2 启动子生物信息学分析 | 第33-34页 |
4.2.3 启动子活性及非生物胁迫诱导响应分析 | 第34-35页 |
4.3 结果与分析 | 第35-38页 |
4.3.1 白桦BpUVR8基因启动子序列元件分析 | 第35-37页 |
4.3.2 白桦BpUVR8启动子在烟草中的表达活性 | 第37页 |
4.3.3 非生物胁迫下白桦BpUVR8基因启动子的表达活性 | 第37-38页 |
4.4 讨论 | 第38-39页 |
4.5 本章小结 | 第39-40页 |
5 白桦BpUVR8基因在拟南芥uvr8突变体中的功能互补 | 第40-51页 |
5.1 材料 | 第40页 |
5.2 方法 | 第40-46页 |
5.2.1 质粒的提取 | 第40页 |
5.2.2 白桦BpUVR8基因的载体构建 | 第40-42页 |
5.2.3 转基因植物材料的获得 | 第42-43页 |
5.2.4 拟南芥阳性植株的鉴定 | 第43页 |
5.2.5 拟南芥相关指标的测定 | 第43-44页 |
5.2.6 酵母双杂交 | 第44-46页 |
5.3 结果与分析 | 第46-49页 |
5.3.1 转基因拟南芥植株的DNA检测 | 第46页 |
5.3.2 转基因拟南芥植株的半定量RT-PCR分析 | 第46-47页 |
5.3.3 白桦BpUVR8基因与拟南芥uvr8突变体的功能互补 | 第47-48页 |
5.3.4 白桦BpUVR8蛋白与BpCOP1蛋白互作 | 第48-49页 |
5.4 讨论 | 第49-50页 |
5.5 本章小结 | 第50-51页 |
6 白桦BpUVR8基因在ABA信号通路中的作用 | 第51-63页 |
6.1 材料 | 第51页 |
6.2 方法 | 第51-54页 |
6.2.1 拟南芥的培养 | 第51页 |
6.2.2 BpUVR8基因过表达转基因拟南芥的ABA表型分析 | 第51-52页 |
6.2.3 生理生化指标的测定 | 第52页 |
6.2.4 在低剂量的UV-B下35S::BpUVR8/WT转基因拟南芥对ABA的响应 | 第52-53页 |
6.2.5 基因表达 | 第53页 |
6.2.6 白桦BpUVR8基因在白桦中对ABA的响应 | 第53-54页 |
6.3 结果与分析 | 第54-61页 |
6.3.1 白桦BpUVR8基因异源过表达拟南芥植株对ABA敏感性增加 | 第54-56页 |
6.3.2 35S::BpUVR8/WT转基因拟南芥相对电导率及MDA的含量升高 | 第56-57页 |
6.3.3 35S::BpUVR8/WT转基因拟南芥超氧阴离子的含量升高 | 第57-58页 |
6.3.4 在低剂量的UV-B下35S::BpUVR8/转基因拟南芥对ABA的响应 | 第58-59页 |
6.3.5 BpUVR8基因调节ABA响应基因和转录因子HY5的表达 | 第59-60页 |
6.3.6 BpUVR8调控白桦中ABA响应基因和转录因子HY5的表达。 | 第60-61页 |
6.4 讨论 | 第61-62页 |
6.5 本章小结 | 第62-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |