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白桦UV-B受体BpUVR8基因的克隆及功能研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第11-15页
    1.1 UV-B和植物的生长发育第11页
    1.2 UV-B受体UVR8的研究进展第11-12页
    1.3 UV-B辐射与其他环境因子的复合作用第12-13页
    1.4 UV-B辐射与ABA第13-14页
    1.5 研究的目的意义第14-15页
2 白桦BpUVR8基因的克隆与生物信息学分析第15-25页
    2.1 材料第15页
    2.2 方法第15-18页
        2.2.1 白桦组培苗总RNA的提取第15页
        2.2.2 白桦cDNA的合成第15-16页
        2.2.3 BpUVR8基因全长序列cDNA的克隆第16-18页
        2.2.4 生物信息学分析第18页
    2.3 结果与分析第18-24页
        2.3.1 白桦BpUVR8基因核酸组成成分分析第18-19页
        2.3.2 氨基酸的理化性质分析第19页
        2.3.3 白桦BpUVR8蛋白的一级结构预测第19-20页
        2.3.4 蛋白质二级结构分析第20页
        2.3.5 蛋白质的三级结构分析第20-21页
        2.3.6 基因同源进化分析第21-24页
    2.4 讨论第24页
    2.5 本章小结第24-25页
3 白桦BpUVR8基因的表达模式分析第25-33页
    3.1 材料第25页
    3.2 方法第25-29页
        3.2.1 白桦BpUVR8基因的组织表达模式分析第25页
        3.2.2 UV-B诱导白桦BpUVR8基因的表达分析第25页
        3.2.3 白桦BpUVR8基因的非生物胁迫及信号诱导表达分析第25页
        3.2.4 白桦总RNA的提取及浓度测定第25页
        3.2.5 反转录cDNA的合成第25-26页
        3.2.6 实时荧光定量PCR第26页
        3.2.7 白桦BpUVR8基因亚细胞定位的研究第26-29页
    3.3 结果与分析第29-32页
        3.3.1 BpUVR8基因的组织表达模式分析第29页
        3.3.2 不同月份白桦叶片中BpUVR8的表达分析第29-30页
        3.3.3 UV-B诱导白桦BpUVR8基因的表达分析第30页
        3.3.4 白桦BpUVR8基因的非生物胁迫及信号诱导表达分析第30-31页
        3.3.5 白桦BpUVR8蛋白的亚细胞定位第31-32页
    3.4 讨论第32页
    3.5 本章小结第32-33页
4 白桦BpUVR8基因启动子的克隆与分析第33-40页
    4.1 材料第33页
    4.2 方法第33-35页
        4.2.1 白桦基因组DNA的提取第33页
        4.2.2 启动子生物信息学分析第33-34页
        4.2.3 启动子活性及非生物胁迫诱导响应分析第34-35页
    4.3 结果与分析第35-38页
        4.3.1 白桦BpUVR8基因启动子序列元件分析第35-37页
        4.3.2 白桦BpUVR8启动子在烟草中的表达活性第37页
        4.3.3 非生物胁迫下白桦BpUVR8基因启动子的表达活性第37-38页
    4.4 讨论第38-39页
    4.5 本章小结第39-40页
5 白桦BpUVR8基因在拟南芥uvr8突变体中的功能互补第40-51页
    5.1 材料第40页
    5.2 方法第40-46页
        5.2.1 质粒的提取第40页
        5.2.2 白桦BpUVR8基因的载体构建第40-42页
        5.2.3 转基因植物材料的获得第42-43页
        5.2.4 拟南芥阳性植株的鉴定第43页
        5.2.5 拟南芥相关指标的测定第43-44页
        5.2.6 酵母双杂交第44-46页
    5.3 结果与分析第46-49页
        5.3.1 转基因拟南芥植株的DNA检测第46页
        5.3.2 转基因拟南芥植株的半定量RT-PCR分析第46-47页
        5.3.3 白桦BpUVR8基因与拟南芥uvr8突变体的功能互补第47-48页
        5.3.4 白桦BpUVR8蛋白与BpCOP1蛋白互作第48-49页
    5.4 讨论第49-50页
    5.5 本章小结第50-51页
6 白桦BpUVR8基因在ABA信号通路中的作用第51-63页
    6.1 材料第51页
    6.2 方法第51-54页
        6.2.1 拟南芥的培养第51页
        6.2.2 BpUVR8基因过表达转基因拟南芥的ABA表型分析第51-52页
        6.2.3 生理生化指标的测定第52页
        6.2.4 在低剂量的UV-B下35S::BpUVR8/WT转基因拟南芥对ABA的响应第52-53页
        6.2.5 基因表达第53页
        6.2.6 白桦BpUVR8基因在白桦中对ABA的响应第53-54页
    6.3 结果与分析第54-61页
        6.3.1 白桦BpUVR8基因异源过表达拟南芥植株对ABA敏感性增加第54-56页
        6.3.2 35S::BpUVR8/WT转基因拟南芥相对电导率及MDA的含量升高第56-57页
        6.3.3 35S::BpUVR8/WT转基因拟南芥超氧阴离子的含量升高第57-58页
        6.3.4 在低剂量的UV-B下35S::BpUVR8/转基因拟南芥对ABA的响应第58-59页
        6.3.5 BpUVR8基因调节ABA响应基因和转录因子HY5的表达第59-60页
        6.3.6 BpUVR8调控白桦中ABA响应基因和转录因子HY5的表达。第60-61页
    6.4 讨论第61-62页
    6.5 本章小结第62-63页
结论第63-64页
参考文献第64-71页
攻读学位期间发表的学术论文第71-72页
致谢第72-73页

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