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基于蛋白组学技术的马铃薯晚疫病菌PAMP诱导免疫反应机制解析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词第10-11页
1 前言第11-20页
    1.1 马铃薯与晚疫病第11页
    1.2 植物的双层免疫系统第11-12页
    1.3 胞内免疫(R基因抗性)的局限性第12-13页
    1.4 胞外免疫的重要性及优势第13-16页
    1.5 Elicitin诱导的信号途径第16-17页
    1.6 蛋白组学技术第17-19页
    1.7 本研究的目的与意义第19-20页
2 基于iTRAQ技术分析本氏烟草中INF1诱导的差异蛋白第20-34页
    2.1 前言第20页
    2.2 材料与方法第20-24页
        2.2.1 植物材料第20-21页
        2.2.2 菌株及载体第21页
        2.2.3 主要试剂及仪器第21页
        2.2.4 样品处理和iTRAQ蛋白组检测第21-22页
        2.2.5 关键基因的VIGS载体的构建第22页
        2.2.6 植物总RNA抽提及反转录cDNA的合成第22页
        2.2.7 定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)第22-24页
    2.3 结果与分析第24-31页
        2.3.1 INF1诱导后本氏烟草叶片形态变化第24页
        2.3.2 INF1诱导后差异表达蛋白鉴定与功能分析第24-28页
        2.3.3 利用VIGS技术对上调表达蛋白进行功能分析第28-31页
    2.4 讨论第31-34页
        2.4.1 参与信号转导/转录的蛋白第31页
        2.4.2 参与转运相关的蛋白第31-32页
        2.4.3 参与光合作用的蛋白第32页
        2.4.4 防御相关的蛋白第32-33页
        2.4.5 参与蛋白质合成相关的蛋白第33-34页
3 基于SWATH技术分析晚疫病菌PAMP诱导本氏烟中的差异蛋白第34-58页
    3.1 前言第34-36页
    3.2 材料与方法第36-42页
        3.2.0 材料与仪器第36-37页
        3.2.1 CF制备及烟草叶片注射第37页
        3.2.2 本氏烟叶片蛋白质的提取第37-38页
        3.2.3 蛋白质定量第38页
        3.2.4 总蛋白的酶切第38页
        3.2.5 酶解蛋白液的除盐干燥第38页
        3.2.6 第一维高pH反向(Reversed-phase)高效液相分离第38-39页
        3.2.7 参考质谱数据库的建立第39-40页
        3.2.8 SWATH数据采集第40-41页
        3.2.9 SWATH数据定性与定量分析第41-42页
    3.3 结果分析第42-57页
        3.3.1 CF诱导后本氏烟草叶片表型变化第42页
        3.3.2 SWATH中CF诱导本氏烟草中蛋白的鉴定第42-43页
        3.3.3 质谱数据主成分分析(PCA)第43-44页
        3.3.4 CF诱导本氏烟中的差异表达蛋白分析第44-46页
        3.3.5 差异蛋白聚类分析第46-47页
        3.3.6 差异蛋白GO注释分析第47-52页
        3.3.7 差异表达蛋白KEGG通路及表达模式分析第52-57页
    3.4 讨论第57-58页
参考文献第58-69页
附表1 部分通路差异蛋白列表第69-76页
致谢第76页

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