| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-20页 |
| 1.1 多梳蛋白家族(PcG) | 第14页 |
| 1.2 PRC1复合体 | 第14-15页 |
| 1.3 PRC2复合体 | 第15-18页 |
| 1.3.1 EZH2 | 第16-17页 |
| 1.3.2 PCL1 | 第17页 |
| 1.3.3 PCL3 | 第17-18页 |
| 1.4 β-catenin的泛素化降解概述 | 第18-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| 2.1 研究背景、目的及意义 | 第20页 |
| 2.2 研究内容及技术路线 | 第20-22页 |
| 2.2.1 研究内容 | 第20-21页 |
| 2.2.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 第3章 PHF19在胶质母细胞瘤及正常胶质细胞中的表达 | 第22-34页 |
| 3.1 材料与仪器试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-30页 |
| 3.2.1 溶液配制 | 第23-25页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第25-26页 |
| 3.2.3 免疫组织化学染色(IHC) | 第26-27页 |
| 3.2.4 实时荧光定量RT-PCR | 第27-28页 |
| 3.2.5 Westernbolt实验 | 第28-30页 |
| 3.3 实验结果分析 | 第30-32页 |
| 3.3.1 数据库分析PHF19对胶质母细胞瘤预后结果 | 第30-31页 |
| 3.3.2 PHF19在胶质母细胞瘤病人组织及细胞系中的表达 | 第31-32页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第32-34页 |
| 第4章 PHF19对胶质母细胞瘤细胞增殖及周期的影响 | 第34-50页 |
| 4.1 材料与仪器试剂 | 第34-37页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第35-37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-44页 |
| 4.2.1 干涉载体构建 | 第37-39页 |
| 4.2.2 超纯质粒提取 | 第39页 |
| 4.2.3 慢病毒的构建 | 第39页 |
| 4.2.4 慢病毒感染细胞 | 第39-40页 |
| 4.2.5 MTT实验 | 第40页 |
| 4.2.6 BrdU染色 | 第40页 |
| 4.2.7 软琼脂单克隆形成检测 | 第40-41页 |
| 4.2.8 Westernblot | 第41-42页 |
| 4.2.9 原位注射 | 第42-43页 |
| 4.2.10 H&E染色 | 第43页 |
| 4.2.11 免疫组织化学染色(IHC) | 第43-44页 |
| 4.2.12 统计分析 | 第44页 |
| 4.3 结果讨论 | 第44-47页 |
| 4.3.1 干涉PHF19后对细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.2 PHF19干涉后恢复PHF19检测细胞的增殖及成瘤能力影响 | 第45-46页 |
| 4.3.3 PHF19对胶质母细胞瘤单克隆形成能力的影响 | 第46页 |
| 4.3.4 PHF19对胶质母细胞瘤体内成瘤能力的影响 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第47-50页 |
| 第5章 PHF19对胶质母细胞瘤的迁移侵袭能力的影响 | 第50-56页 |
| 5.1 材料与试剂仪器 | 第50-51页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第50页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第50-51页 |
| 5.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 5.2.1 Transwell实验 | 第51页 |
| 5.2.2 WesternBlot实验 | 第51-53页 |
| 5.3 实验结果 | 第53-54页 |
| 5.3.1 PHF19影响胶质细胞瘤的迁移侵袭能力 | 第53-54页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第54-56页 |
| 第6章 PHF19对β-Catenin的影响 | 第56-70页 |
| 6.1 材料与试剂仪器 | 第56-58页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第58页 |
| 6.2 实验方法 | 第58-65页 |
| 6.2.1 慢病毒感染细胞 | 第58页 |
| 6.2.2 MTT实验 | 第58-59页 |
| 6.2.3 WesternBlot实验 | 第59-60页 |
| 6.2.4 Transwell实验 | 第60-62页 |
| 6.2.5 核质分离实验 | 第62页 |
| 6.2.6 蛋白周转率实验 | 第62页 |
| 6.2.7 体外泛素化实验 | 第62-63页 |
| 6.2.8 荧光定量PCR | 第63页 |
| 6.2.9 ChIP实验 | 第63-65页 |
| 6.2.10 双荧光素酶报告实验 | 第65页 |
| 6.2.11 添加XAV-939抑制剂 | 第65页 |
| 6.2.12 Westernblot实验 | 第65页 |
| 6.3 结果与分析 | 第65-69页 |
| 6.3.1 PHF19通过β-Catenin通路影响胶质母细胞瘤的增殖 | 第65-67页 |
| 6.3.2 PHF19通过SIAH1来影响β-Catenin的泛素化降解 | 第67-68页 |
| 6.3.3 PHF19结合到SIAH1的启动子 | 第68-69页 |
| 6.4 讨论与小结 | 第69-70页 |
| 第7章 全文总结 | 第70-74页 |
| 7.1 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 硕士期间论文发表情况以及参加课题研究 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
