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酶解法提取鹿茸多肽及其抗炎活性研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第1章 绪论第10-18页
    1.1 概述第10-14页
        1.1.1 鹿茸的概述第10-11页
        1.1.2 鹿茸的功效与禁忌第11页
        1.1.3 鹿茸的蛋白成分第11页
        1.1.4 常见蛋白提取方法第11-13页
        1.1.5 鹿茸多肽的生物学活性第13页
        1.1.6 鹿茸的抗炎活性第13-14页
        1.1.7 鹿茸多肽的抗炎机理第14页
        1.1.8 凯氏定氮法第14页
    1.2 炎症的机制第14-16页
        1.2.1 炎症第14-15页
        1.2.2 炎症反应及抗炎细胞模型第15-16页
        1.2.3 炎症模型评估方法第16页
    1.3 鹿茸多肽提取方法第16-17页
        1.3.1 蛋白酶的应用第16页
        1.3.2 生物酶水解法第16-17页
        1.3.3 生物酶水解法优点第17页
    1.4 本课题来源意义第17-18页
第2章 实验部分第18-28页
    2.1 提取第18-19页
        2.1.1 材料第18页
        2.1.2 实验试剂第18-19页
        2.1.3 实验仪器第19页
    2.2 鹿茸多肽提取方法第19-21页
        2.2.1 提取原理第19-20页
        2.2.2 超声法提取鹿茸蛋白第20页
        2.2.3 CO_2超临界提取法提取鹿茸蛋白第20页
        2.2.4 鹿茸蛋白的测定第20-21页
    2.3 鹿茸蛋白水解方法第21-24页
        2.3.1 蛋白酶水解原理第21页
        2.3.2 碱性蛋白酶水解鹿茸蛋白第21页
        2.3.3 胃蛋白酶水解鹿茸蛋白第21页
        2.3.4 中性蛋白酶水解鹿茸蛋白第21-22页
        2.3.5 复合蛋白酶水解鹿茸蛋白第22页
        2.3.6 甲醛滴定法测定鹿茸多肽第22页
        2.3.7 SDS-PAGE前期溶液配制第22-23页
        2.3.8 鹿茸多肽SDS-PAGE凝胶电泳第23-24页
    2.4 鹿茸多肽抗炎效果检测第24-26页
        2.4.1 抗炎模型原理第24页
        2.4.2 细胞复苏第24页
        2.4.3 细胞传代第24页
        2.4.4 细胞冻存第24-25页
        2.4.5 MTT实验第25页
        2.4.6 NIH3T3体外细胞抗炎模型构建第25页
        2.4.7 PGE2分泌量检测第25-26页
    2.5 鹿茸单体蛋白功能鉴定第26-27页
        2.5.1 鹿茸多肽凝胶层析第26-27页
        2.5.2 凝胶层析法对单一蛋白的筛选第27页
        2.5.3 鹿茸单一蛋白MTT实验第27页
        2.5.4 鹿茸单一蛋白抗炎细胞模型构建第27页
    2.6 鹿茸单一蛋白的测序第27-28页
第3章 结果与讨论第28-47页
    3.1 鹿茸多肽提取工艺研究第28-30页
        3.1.1 凯氏定氮第28-29页
        3.1.2 超声提取法提取鹿茸蛋白第29页
        3.1.3 CO_2超临界提取方法提取鹿茸蛋白第29-30页
        3.1.4 超声法和CO_2超临界提取法比较第30页
    3.2 鹿茸蛋白酶解工艺研究第30-39页
        3.2.1 碱性蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响第30-31页
        3.2.2 胃蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响第31-32页
        3.2.3 中性蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度对蛋白水解度的影响第32页
        3.2.4 胰蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响第32-33页
        3.2.5 复合蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响第33页
        3.2.6 碱性蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响第33-34页
        3.2.7 胃蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响第34-35页
        3.2.8 中性蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响第35页
        3.2.9 胰蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响第35-36页
        3.2.10 复合蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响第36页
        3.2.11 碱性蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响第36-37页
        3.2.12 胃蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响第37-38页
        3.2.13 中性蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响第38页
        3.2.14 胰蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响第38-39页
        3.2.15 复合蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响第39页
    3.3 鹿茸多肽抗炎效果检测第39-42页
    3.4 复合酶酶解下鹿茸多肽SDS-PAGE凝胶电泳第42-43页
    3.5 单一多肽抗炎效果检测第43-46页
        3.5.1 凝胶层析法对单一蛋白的筛选第43页
        3.5.2 单一多肽MTT实验结果第43-46页
    3.6 讨论第46-47页
第4章 结论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-54页
附录第54-63页
作者简介第63-64页
攻读硕士学位期间研究成果第64页

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