摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第10-18页 |
1.1 概述 | 第10-14页 |
1.1.1 鹿茸的概述 | 第10-11页 |
1.1.2 鹿茸的功效与禁忌 | 第11页 |
1.1.3 鹿茸的蛋白成分 | 第11页 |
1.1.4 常见蛋白提取方法 | 第11-13页 |
1.1.5 鹿茸多肽的生物学活性 | 第13页 |
1.1.6 鹿茸的抗炎活性 | 第13-14页 |
1.1.7 鹿茸多肽的抗炎机理 | 第14页 |
1.1.8 凯氏定氮法 | 第14页 |
1.2 炎症的机制 | 第14-16页 |
1.2.1 炎症 | 第14-15页 |
1.2.2 炎症反应及抗炎细胞模型 | 第15-16页 |
1.2.3 炎症模型评估方法 | 第16页 |
1.3 鹿茸多肽提取方法 | 第16-17页 |
1.3.1 蛋白酶的应用 | 第16页 |
1.3.2 生物酶水解法 | 第16-17页 |
1.3.3 生物酶水解法优点 | 第17页 |
1.4 本课题来源意义 | 第17-18页 |
第2章 实验部分 | 第18-28页 |
2.1 提取 | 第18-19页 |
2.1.1 材料 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
2.2 鹿茸多肽提取方法 | 第19-21页 |
2.2.1 提取原理 | 第19-20页 |
2.2.2 超声法提取鹿茸蛋白 | 第20页 |
2.2.3 CO_2超临界提取法提取鹿茸蛋白 | 第20页 |
2.2.4 鹿茸蛋白的测定 | 第20-21页 |
2.3 鹿茸蛋白水解方法 | 第21-24页 |
2.3.1 蛋白酶水解原理 | 第21页 |
2.3.2 碱性蛋白酶水解鹿茸蛋白 | 第21页 |
2.3.3 胃蛋白酶水解鹿茸蛋白 | 第21页 |
2.3.4 中性蛋白酶水解鹿茸蛋白 | 第21-22页 |
2.3.5 复合蛋白酶水解鹿茸蛋白 | 第22页 |
2.3.6 甲醛滴定法测定鹿茸多肽 | 第22页 |
2.3.7 SDS-PAGE前期溶液配制 | 第22-23页 |
2.3.8 鹿茸多肽SDS-PAGE凝胶电泳 | 第23-24页 |
2.4 鹿茸多肽抗炎效果检测 | 第24-26页 |
2.4.1 抗炎模型原理 | 第24页 |
2.4.2 细胞复苏 | 第24页 |
2.4.3 细胞传代 | 第24页 |
2.4.4 细胞冻存 | 第24-25页 |
2.4.5 MTT实验 | 第25页 |
2.4.6 NIH3T3体外细胞抗炎模型构建 | 第25页 |
2.4.7 PGE2分泌量检测 | 第25-26页 |
2.5 鹿茸单体蛋白功能鉴定 | 第26-27页 |
2.5.1 鹿茸多肽凝胶层析 | 第26-27页 |
2.5.2 凝胶层析法对单一蛋白的筛选 | 第27页 |
2.5.3 鹿茸单一蛋白MTT实验 | 第27页 |
2.5.4 鹿茸单一蛋白抗炎细胞模型构建 | 第27页 |
2.6 鹿茸单一蛋白的测序 | 第27-28页 |
第3章 结果与讨论 | 第28-47页 |
3.1 鹿茸多肽提取工艺研究 | 第28-30页 |
3.1.1 凯氏定氮 | 第28-29页 |
3.1.2 超声提取法提取鹿茸蛋白 | 第29页 |
3.1.3 CO_2超临界提取方法提取鹿茸蛋白 | 第29-30页 |
3.1.4 超声法和CO_2超临界提取法比较 | 第30页 |
3.2 鹿茸蛋白酶解工艺研究 | 第30-39页 |
3.2.1 碱性蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响 | 第30-31页 |
3.2.2 胃蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响 | 第31-32页 |
3.2.3 中性蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度对蛋白水解度的影响 | 第32页 |
3.2.4 胰蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响 | 第32-33页 |
3.2.5 复合蛋白酶在不同鹿茸多肽浓度下对蛋白水解度的影响 | 第33页 |
3.2.6 碱性蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响 | 第33-34页 |
3.2.7 胃蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响 | 第34-35页 |
3.2.8 中性蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响 | 第35页 |
3.2.9 胰蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响 | 第35-36页 |
3.2.10 复合蛋白酶在不同温度下对蛋白水解度的影响 | 第36页 |
3.2.11 碱性蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响 | 第36-37页 |
3.2.12 胃蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响 | 第37-38页 |
3.2.13 中性蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响 | 第38页 |
3.2.14 胰蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响 | 第38-39页 |
3.2.15 复合蛋白酶在不同时间对蛋白水解度的影响 | 第39页 |
3.3 鹿茸多肽抗炎效果检测 | 第39-42页 |
3.4 复合酶酶解下鹿茸多肽SDS-PAGE凝胶电泳 | 第42-43页 |
3.5 单一多肽抗炎效果检测 | 第43-46页 |
3.5.1 凝胶层析法对单一蛋白的筛选 | 第43页 |
3.5.2 单一多肽MTT实验结果 | 第43-46页 |
3.6 讨论 | 第46-47页 |
第4章 结论 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-63页 |
作者简介 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第64页 |