摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第1章 前言 | 第9-15页 |
1.1 植原体的概述 | 第9页 |
1.2 植原体的分类 | 第9-10页 |
1.3 植原体检测技术的发展 | 第10-13页 |
1.3.1 植原体的常规检测方法 | 第10-11页 |
1.3.2 组织化学检测方法 | 第11页 |
1.3.3 电子显微镜观察 | 第11页 |
1.3.4 血清学检测 | 第11页 |
1.3.5 DNA-DNA分子杂交检测技术 | 第11-12页 |
1.3.6 PCR检测技术 | 第12-13页 |
1.4 植原体的基因组 | 第13页 |
1.5 免疫膜蛋白的研究进展 | 第13-14页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第14-15页 |
第2章 植原体病害调查及检测 | 第15-22页 |
2.1 材料 | 第15-17页 |
2.1.1 样品 | 第15-17页 |
2.1.2 试剂 | 第17页 |
2.2 方法 | 第17-18页 |
2.2.1 植物样品DNA的提取 | 第17页 |
2.2.2 植原体16SrDNA序列的PCR扩增 | 第17页 |
2.2.3 PCR产物的纯化并克隆 | 第17-18页 |
2.2.4 PCR鉴定并测序 | 第18页 |
2.3 结果与分析 | 第18-21页 |
2.3.1 病株植物的症状 | 第18-19页 |
2.3.2 植原体PCR检测结果 | 第19-20页 |
2.3.3 基因比对分析 | 第20-21页 |
2.4 结论与讨论 | 第21-22页 |
第3章 桑树丛枝(MWB)病原物的分子鉴定 | 第22-33页 |
3.1 材料 | 第22页 |
3.2 方法 | 第22-24页 |
3.2.1 植物样品DNA的提取 | 第22页 |
3.2.2 桑丛枝植原体基因PCR扩增 | 第22-23页 |
3.2.3 PCR产物的纯化、克隆与测序 | 第23页 |
3.2.4 序列分析 | 第23-24页 |
3.3 PCR结果与序列比对分析 | 第24-29页 |
3.3.1 PCR扩增结果 | 第24页 |
3.3.2 北京桑树丛枝植原体MWB与桑树萎缩植原体的16SrDNA序列比对分析 | 第24-25页 |
3.3.3 桑丛枝植原体MWB的16SrDNA基因序列分析 | 第25-27页 |
3.3.4 桑丛枝rp基因序列分析 | 第27页 |
3.3.5 桑丛枝tuf基因序列分析 | 第27-28页 |
3.3.6 桑丛枝secY基因序列分析 | 第28-29页 |
3.4 模拟RFLP分析 | 第29-32页 |
3.4.1 桑树丛枝16SrDNA基因模拟RELP分析 | 第29-30页 |
3.4.2 桑树丛枝rp基因模拟RELP分析 | 第30-31页 |
3.4.3 桑树丛枝tuf基因模拟RELP分析 | 第31页 |
3.4.4 桑树丛枝secY基因模拟RELP分析 | 第31-32页 |
3.5 结论与讨论 | 第32-33页 |
第4章 引起枣疯病、丝棉木丛枝病、洋刺槐丛枝病和红花槐丛枝病的植原体多基因比较分析 | 第33-40页 |
4.1 材料 | 第33-34页 |
4.1.1 样品 | 第33页 |
4.1.2 试剂 | 第33页 |
4.1.3 引物 | 第33-34页 |
4.2 方法 | 第34-35页 |
4.2.1 植物样品DNA的提取 | 第34页 |
4.2.2 PCR扩增植原体基因 | 第34页 |
4.2.3 PCR产物的纯化、克隆与测序 | 第34页 |
4.2.4 序列聚类分析 | 第34-35页 |
4.3 结果与分析 | 第35-38页 |
4.3.1 PCR结果分析 | 第35页 |
4.3.2 四种植原体的16SrDNA基因系统进化树分析 | 第35-36页 |
4.3.3 四种植原体的rp基因系统进化树分析 | 第36-37页 |
4.3.4 四种植原体的secY基因系统进化树分析 | 第37页 |
4.3.5 四种植原体的himA基因序列比对结果 | 第37-38页 |
4.3.6 四种植原体的tmkB基因序列比对结果 | 第38页 |
4.3.7 四种植原体的imp序列比对结果 | 第38页 |
4.4 结论与讨论 | 第38-40页 |
第5章 枣疯植原体免疫主导膜蛋白imp基因克隆与异源表达 | 第40-45页 |
5.1 材料 | 第40页 |
5.2 方法 | 第40-42页 |
5.2.1 枣疯植原体免疫主导膜蛋白Imp跨膜区预测 | 第40页 |
5.2.2 引物设计 | 第40页 |
5.2.3 枣疯植原体基因提取 | 第40页 |
5.2.4 枣疯植原体imp基因PCR扩增 | 第40-41页 |
5.2.5 枣疯植原体imp基因片段与T载体的连接、转化 | 第41页 |
5.2.6 异源表达载体的构建与鉴定 | 第41-42页 |
5.2.7 异源表达及蛋白纯化 | 第42页 |
5.3 结果分析 | 第42-44页 |
5.3.1 跨膜区的预测结果 | 第42-43页 |
5.3.2 PCR检测结果 | 第43页 |
5.3.3 植原体免疫主导膜蛋白imp基因原核表达 | 第43页 |
5.3.4 蛋白纯化 | 第43-44页 |
5.4 结论与讨论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
附录 | 第52-53页 |
个人简介 | 第53页 |