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几种植原体病害病原分子鉴定与枣疯植原体imp基因克隆

摘要第4-5页
abstract第5页
第1章 前言第9-15页
    1.1 植原体的概述第9页
    1.2 植原体的分类第9-10页
    1.3 植原体检测技术的发展第10-13页
        1.3.1 植原体的常规检测方法第10-11页
        1.3.2 组织化学检测方法第11页
        1.3.3 电子显微镜观察第11页
        1.3.4 血清学检测第11页
        1.3.5 DNA-DNA分子杂交检测技术第11-12页
        1.3.6 PCR检测技术第12-13页
    1.4 植原体的基因组第13页
    1.5 免疫膜蛋白的研究进展第13-14页
    1.6 本研究的目的与意义第14-15页
第2章 植原体病害调查及检测第15-22页
    2.1 材料第15-17页
        2.1.1 样品第15-17页
        2.1.2 试剂第17页
    2.2 方法第17-18页
        2.2.1 植物样品DNA的提取第17页
        2.2.2 植原体16SrDNA序列的PCR扩增第17页
        2.2.3 PCR产物的纯化并克隆第17-18页
        2.2.4 PCR鉴定并测序第18页
    2.3 结果与分析第18-21页
        2.3.1 病株植物的症状第18-19页
        2.3.2 植原体PCR检测结果第19-20页
        2.3.3 基因比对分析第20-21页
    2.4 结论与讨论第21-22页
第3章 桑树丛枝(MWB)病原物的分子鉴定第22-33页
    3.1 材料第22页
    3.2 方法第22-24页
        3.2.1 植物样品DNA的提取第22页
        3.2.2 桑丛枝植原体基因PCR扩增第22-23页
        3.2.3 PCR产物的纯化、克隆与测序第23页
        3.2.4 序列分析第23-24页
    3.3 PCR结果与序列比对分析第24-29页
        3.3.1 PCR扩增结果第24页
        3.3.2 北京桑树丛枝植原体MWB与桑树萎缩植原体的16SrDNA序列比对分析第24-25页
        3.3.3 桑丛枝植原体MWB的16SrDNA基因序列分析第25-27页
        3.3.4 桑丛枝rp基因序列分析第27页
        3.3.5 桑丛枝tuf基因序列分析第27-28页
        3.3.6 桑丛枝secY基因序列分析第28-29页
    3.4 模拟RFLP分析第29-32页
        3.4.1 桑树丛枝16SrDNA基因模拟RELP分析第29-30页
        3.4.2 桑树丛枝rp基因模拟RELP分析第30-31页
        3.4.3 桑树丛枝tuf基因模拟RELP分析第31页
        3.4.4 桑树丛枝secY基因模拟RELP分析第31-32页
    3.5 结论与讨论第32-33页
第4章 引起枣疯病、丝棉木丛枝病、洋刺槐丛枝病和红花槐丛枝病的植原体多基因比较分析第33-40页
    4.1 材料第33-34页
        4.1.1 样品第33页
        4.1.2 试剂第33页
        4.1.3 引物第33-34页
    4.2 方法第34-35页
        4.2.1 植物样品DNA的提取第34页
        4.2.2 PCR扩增植原体基因第34页
        4.2.3 PCR产物的纯化、克隆与测序第34页
        4.2.4 序列聚类分析第34-35页
    4.3 结果与分析第35-38页
        4.3.1 PCR结果分析第35页
        4.3.2 四种植原体的16SrDNA基因系统进化树分析第35-36页
        4.3.3 四种植原体的rp基因系统进化树分析第36-37页
        4.3.4 四种植原体的secY基因系统进化树分析第37页
        4.3.5 四种植原体的himA基因序列比对结果第37-38页
        4.3.6 四种植原体的tmkB基因序列比对结果第38页
        4.3.7 四种植原体的imp序列比对结果第38页
    4.4 结论与讨论第38-40页
第5章 枣疯植原体免疫主导膜蛋白imp基因克隆与异源表达第40-45页
    5.1 材料第40页
    5.2 方法第40-42页
        5.2.1 枣疯植原体免疫主导膜蛋白Imp跨膜区预测第40页
        5.2.2 引物设计第40页
        5.2.3 枣疯植原体基因提取第40页
        5.2.4 枣疯植原体imp基因PCR扩增第40-41页
        5.2.5 枣疯植原体imp基因片段与T载体的连接、转化第41页
        5.2.6 异源表达载体的构建与鉴定第41-42页
        5.2.7 异源表达及蛋白纯化第42页
    5.3 结果分析第42-44页
        5.3.1 跨膜区的预测结果第42-43页
        5.3.2 PCR检测结果第43页
        5.3.3 植原体免疫主导膜蛋白imp基因原核表达第43页
        5.3.4 蛋白纯化第43-44页
    5.4 结论与讨论第44-45页
参考文献第45-51页
致谢第51-52页
附录第52-53页
个人简介第53页

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