摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8页 |
1. 绪论 | 第9-17页 |
1.1 植物蛋白亚细胞定位的常用技术 | 第9-10页 |
1.1.1 荧光蛋白融合定位法 | 第9页 |
1.1.2 免疫组织化学定位法 | 第9-10页 |
1.2 植物主要细胞器特异性表达蛋白的研究进展 | 第10-15页 |
1.2.1 细胞核 | 第10页 |
1.2.2 内质网 | 第10-11页 |
1.2.3 高尔基体 | 第11页 |
1.2.4 质体 | 第11-12页 |
1.2.5 线粒体 | 第12-13页 |
1.2.6 过氧化物酶体 | 第13-14页 |
1.2.7 液泡 | 第14页 |
1.2.8 细胞质膜 | 第14-15页 |
1.2.9 植物主要细胞器特异性表达蛋白鉴定的未来展望 | 第15页 |
1.3 本研究内容及意义 | 第15-17页 |
2. 材料与方法 | 第17-26页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 菌株、质粒 | 第17页 |
2.1.2 转化受体材料 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-26页 |
2.2.1 载体构建 | 第18-23页 |
2.2.2 植物表达载体导入农杆菌 | 第23页 |
2.2.3 农杆菌注射转化烟草瞬时表达 | 第23页 |
2.2.4 烟草原生质体提取 | 第23页 |
2.2.5 荧光和激光共聚焦显微镜观察 | 第23-24页 |
2.2.6 农杆菌介导水稻转化 | 第24页 |
2.2.7 转基因T_0代植株的检测 | 第24-26页 |
3. 结果与分析 | 第26-53页 |
3.1 定位于主要细胞器蛋白或基序编码序列的克隆 | 第26-28页 |
3.2 亚细胞定位特异序列-荧光蛋白融合表达载体构建 | 第28-35页 |
3.3 荧光蛋白融合表达结构瞬时表达分析 | 第35-40页 |
3.3.1 烟草表皮细胞的荧光蛋白表达 | 第35-36页 |
3.3.2 烟草叶肉细胞的原生质体观察 | 第36-40页 |
3.4 表达荧光蛋白融合结构水稻的创制 | 第40-53页 |
3.4.1 转基因水稻植株培育及鉴定 | 第40-42页 |
3.4.2 荧光蛋白融合结构在水稻细胞中的定位 | 第42-53页 |
4. 讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
附录1 主要试剂与仪器 | 第63-66页 |
附录2 实验方法 | 第66-75页 |
附录3 各种感受态的制备方法 | 第75-77页 |
附录4 测序比对结果 | 第77-122页 |
附录5 载体构建流程图 | 第122-136页 |