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miRNA在CYP6CY3介导的桃蚜寄主适应性中功能研究

中文摘要第4-5页
Abstract第5-6页
英文缩写表第7-12页
第一章 前言第12-21页
    1.1 桃蚜概述第12-14页
        1.1.1 桃蚜的危害第12-13页
        1.1.2 桃蚜的生活史和发生规律第13页
        1.1.3 桃蚜的防治第13页
        1.1.4 桃蚜不同寄主适应性研究第13-14页
    1.2 细胞色素P450酶系第14-16页
        1.2.1 细胞色素P450酶系简介第14-15页
        1.2.2 CYP6家族的功能和重要性第15-16页
    1.3 MicroRNA特征与功能第16-19页
        1.3.1 生物体内miRNA的形成第16-17页
        1.3.2 生物体内miRNA的作用机制第17-19页
        1.3.3 miRNA的功能第19页
    1.4 研究意义第19-21页
第二章 桃蚜CYP6CY3基因功能验证第21-32页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 实验昆虫及寄主第21页
        2.1.2 试剂与仪器第21-22页
    2.2 试验方法第22-28页
        2.2.1 桃蚜亚种基因组DNA提取第22-23页
        2.2.2 桃蚜亚种总RNA提取第23页
        2.2.3 桃蚜亚种总RNA纯化第23-24页
        2.2.4 桃蚜亚种总RNA cDNA合成第24-25页
        2.2.5 实时荧光定量RCR第25-26页
        2.2.6 DsRNA的合成第26-28页
    2.3 实验结果第28-30页
        2.3.1 CYP6CY3在桃蚜亚种中的拷贝数第28-29页
        2.3.2 CYP6CY3在桃蚜亚种中的相对表达量第29页
        2.3.3 烟蚜敲除CYP6CY3后对烟碱耐受性第29-30页
    2.4 小结第30-31页
    2.5 讨论第31-32页
第三章 桃蚜microRNA表达谱的构建与信息分析以及筛选调控CYP6CY3基因表达的miRNA第32-51页
    3.1 实验材料第32-33页
        3.1.1 昆虫与寄主第32页
        3.1.2 主要试剂和仪器第32-33页
        3.1.3 测序公司第33页
    3.2 实验方法第33-38页
        3.2.1 桃蚜miRNA表达谱的构建与信息分析第33-35页
        3.2.2 qPCR筛选目的miRNA第35-38页
    3.3 实验结果第38-49页
        3.3.1 烟蚜miRNA表达谱的构建第38-43页
        3.3.2 样品miRNA靶标预测和分析第43-45页
        3.3.3 实时荧光定量PCR对目的miRNA的验证第45-49页
    3.4 小结第49页
    3.5 讨论第49-51页
第四章 miRNA与CYP6CY3表达的相关性验证第51-70页
    4.1 实验材料第51-52页
        4.1.1 实验昆虫和细胞第51页
        4.1.2 实验试剂与仪器第51-52页
    4.2 实验方法第52-62页
        4.2.1 烟蚜miRNA inhibitor/mimics的喂食第52-53页
        4.2.2 实时荧光定量PCR第53-54页
        4.2.3 pmirGLO表达载体构建第54-60页
        4.2.4 细胞转染第60-61页
        4.2.5 烟蚜对烟碱敏感度测定第61-62页
    4.3 实验结果第62-68页
        4.3.1 烟蚜miRNA inhibitor的喂食第62-63页
        4.3.2 烟蚜miRNA mimics的喂食第63-64页
        4.3.3 双荧光素酶报告和细胞转染实验结果第64-66页
        4.3.4 miRNA功能缺失/获得影响烟蚜对烟碱的敏感度第66-68页
    4.4 小结第68-69页
    4.5 讨论第69-70页
总结第70-71页
参考文献第71-80页
作者简介及在攻读学位期间发表的学术论文第80-81页
致谢第81-82页

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