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日本七鳃鳗ⅠκB基因CDS区克隆,信息学分析及LPS作用后表达差异

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-19页
   ·NF-κB 系统各成员的结构及其功能第9-11页
     ·NF-κB 家族的结构第9-10页
     ·IκB 的生物学特征及其活性调节第10-11页
       ·IκB 家族第10-11页
   ·NF-κB 的信号转导机制及活性调节第11-13页
     ·NF-κB 的激活过程第11-13页
     ·NF-κB 的活性调节第13页
   ·NF-κB 与肿瘤第13-16页
     ·NF-κB 的抗凋亡机制第13-14页
     ·NF-κB 诱发肿瘤的机制第14页
     ·NF-κB 与肾肿瘤第14-15页
     ·NF-κB 与前列腺癌第15页
     ·NF-κB 与胃癌第15-16页
     ·NF-κB 与胰腺癌第16页
     ·NF-κB 与乳腺癌第16页
   ·靶向NF-κB 的治疗第16-17页
     ·抑制IκB 的降解或增加其合成第16-17页
     ·减少NF-κB 的合成或抑制其与κB 序列的结合第17页
     ·抑制IκK 的形成及活性第17页
   ·结语第17-19页
2 重组日本七鳃鳗IκB 的基因克隆第19-30页
   ·材料第19页
   ·方法第19-26页
     ·序列分析及引物设计第19-20页
     ·七鳃鳗白细胞的分离第20页
     ·总RNA 提取第20页
     ·3’RACE 实验第20-22页
     ·5’RACE 实验第22-26页
   ·结果第26-29页
     ·七鳃鳗白细胞RNA 提取结果第26页
     ·3’RACE Inner PCR 反应结果第26-27页
     ·3’RACE Inner PCR 产物纯化结果第27页
     ·测序结果第27-28页
     ·5’RACE Inner PCR 反应结果第28页
     ·5’RACE Inner PCR 反应产物测序结果第28页
     ·序列拼接分析结果第28页
     ·验证实验RT-PCR 反应产物结果第28-29页
     ·RT-PCR 产物测序结果第29页
   ·讨论第29-30页
3 日本七鳃鳗IκB 生物信息学分析第30-40页
   ·对Lj-IκB 蛋白系统进化的分析第30-32页
   ·对Lj-IκB 蛋白一级结构预测分析第32-35页
     ·Lj-IκB 蛋白理化性质的分析第32-33页
     ·Lj-IκB 蛋白疏水性分析第33页
     ·Lj-IκB 跨膜区结构预测第33-34页
     ·Lj-IκB 蛋白卷曲螺旋的预测第34-35页
   ·Lj-IκB 蛋白二级结构的预测第35-36页
   ·Lj-IκB 蛋白氨基酸motif 分析第36页
   ·Lj-IκB 蛋白结构域分析第36-37页
   ·Lj-IκB 蛋白信号肽及亚细胞定位分析第37-38页
   ·Lj-IκB 蛋白修饰位点的预测分析第38页
   ·Lj-IκB 蛋白三维结构分析第38-39页
   ·讨论第39-40页
4 Real Time PCR 检测LPS 作用前后Lj-IκB 表达差异第40-48页
   ·材料第40页
   ·方法第40-44页
     ·LPS 刺激日本七鳃鳗第40页
     ·组织器官提取及白细胞的分离第40-41页
     ·组织器官及白细胞总RNA 的提取第41页
     ·总RNA 反转录成cDNA 第一链第41页
     ·七鳃鳗管家基因GAPDH 引物合成及cDNA 电泳检测第41-42页
     ·RT-PCR 方法检测Lj-IκB 在各个组织器官中是否表达第42-43页
     ·探针法进行实时定量PCR 实验第43-44页
   ·结果第44-46页
     ·各个组织器官总RNA 提取质量第44页
     ·GADPH 检测cDNA 有效性第44-45页
     ·Lj-IκB 在各个组织器官中表达第45页
     ·实时定量标准曲线第45-46页
     ·Real-Time PCR 结果第46页
   ·讨论第46-48页
5 全文总结第48-49页
   ·主要结论第48页
   ·创新点第48页
   ·需要继续研究的问题第48-49页
参考文献第49-54页
附录第54-57页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第57-58页
致谢第58页

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