| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| ·概述 | 第10-11页 |
| ·国内外研究进展 | 第11-17页 |
| ·工业微生物中NADH 的代谢调控 | 第11-16页 |
| ·NADH 调控对碳中心代谢途径的影响 | 第16-17页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第17-20页 |
| ·调控胞内NADH 优化发酵过程中仍存在的问题 | 第17-18页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 高水平氧化还原电位加速T. glabrata 糖酵解速率 | 第20-30页 |
| ·前言 | 第20-21页 |
| ·材料与方法 | 第21-22页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第21页 |
| ·培养条件 | 第21页 |
| ·ORP 的测量 | 第21页 |
| ·代谢物分析方法 | 第21-22页 |
| ·酶活性的测定 | 第22页 |
| ·荧光定量PCR (qPCR) | 第22页 |
| ·结果 | 第22-27页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶不是控制糖酵解速率的因素 | 第22-24页 |
| ·溶氧浓度对糖酵解速率和丙酮酸产率的影响 | 第24页 |
| ·在低溶氧条件下,ORP 水平对核苷酸代谢的影响 | 第24-25页 |
| ·在低溶氧条件下,高ORP 水平对糖酵解途径的影响 | 第25-27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| ·本章小结 | 第28-30页 |
| 第三章 异源NAD~+/H 再生系统的构建及其对丙酮酸发酵的影响 | 第30-42页 |
| ·前言 | 第30-31页 |
| ·材料与方法 | 第31-34页 |
| ·菌株和质粒 | 第31页 |
| ·培养基和丙酮酸发酵条件 | 第31-32页 |
| ·质粒及重组菌株构建 | 第32-34页 |
| ·NAD~+/H 再生系统活性的测定 | 第34页 |
| ·葡萄糖、有机酸、核酸类物质、细胞浓度、乙醇和甘油的测定 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-39页 |
| ·NAD~+/H 再生系统的构建与验证 | 第34-35页 |
| ·NAD~+/H 再生系统在光滑球拟酵母细胞中的定位 | 第35-36页 |
| ·NAD~+/H 再生系统对丙酮酸发酵的影响 | 第36-38页 |
| ·NAD~+/H 再生系统对胞内核苷类物质的影响 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-42页 |
| 第四章 异源NAD~+/H 再生系统对丙酮酸合成途径的影响 | 第42-62页 |
| ·前言 | 第42-43页 |
| ·材料与方法 | 第43-46页 |
| ·菌株和质粒 | 第43页 |
| ·培养基及发酵条件 | 第43-44页 |
| ·分子生物学操作 | 第44-45页 |
| ·分析方法 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-56页 |
| ·表达谱芯片的转录组学分析 | 第46页 |
| ·基于iTRAQ 的蛋白质组学分析 | 第46-47页 |
| ·异源NAD~+/H 再生系统对葡萄糖转运系统的影响 | 第47-52页 |
| ·异源NAD~+/H 再生系统对糖酵解途径的影响 | 第52-54页 |
| ·异源NAD~+/H 再生系统对糖酵解分支途径的影响 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| ·CAGL0A017829 编码的葡萄糖转运蛋白不是控制糖酵解速率的主要因素 | 第56-57页 |
| ·不同亚细胞结构内NADH 调控对丙酮酸合成途径的影响 | 第57-58页 |
| ·不同水平的NADH 对丙酮酸合成途径的影响 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-62页 |
| 第五章 异源NAD~+/H 再生系统对丙酮酸分解途径的影响 | 第62-70页 |
| ·前言 | 第62页 |
| ·材料与方法 | 第62-63页 |
| ·菌株 | 第62-63页 |
| ·培养基和发酵条件 | 第63页 |
| ·分析方法 | 第63页 |
| ·结果 | 第63-67页 |
| ·异源NAD~+/H 再生系统对丙酮酸分解代谢途径基因表达的影响 | 第63-64页 |
| ·异源NAD~++/H 再生系统对丙酮酸分解代谢途径蛋白表达量和酶活性的影响 | 第64-66页 |
| ·异源NAD~+/H 再生系统对TCA 中间代谢物和氨基酸代谢的影响 | 第66页 |
| ·增加外源硫胺素浓度对TCA 中间代谢物和氨基酸代谢的影响 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-70页 |
| 第六章 高水平ATP 加速碳/氮源饥饿T. glabrata 恢复代谢能力 | 第70-79页 |
| ·前言 | 第70-71页 |
| ·材料与方法 | 第71-73页 |
| ·菌株 | 第71页 |
| ·培养基 | 第71页 |
| ·碳/氮源饥饿试验研究路线 | 第71-72页 |
| ·补加柠檬酸的丙酮酸发酵试验 | 第72页 |
| ·代谢物分析方法 | 第72-73页 |
| ·结果 | 第73-77页 |
| ·碳源/氮源饥饿对细胞代谢能力的影响 | 第73页 |
| ·碳源/氮源饥饿对胞内ATP 浓度的影响 | 第73-74页 |
| ·代谢能力与胞内ATP 浓度的关系 | 第74页 |
| ·亚磷酸浓度对T. glabrata PtxD 胞内ATP 浓度和代谢能力的影响 | 第74-75页 |
| ·补加柠檬酸加速营养饥饿T. glabrata CON 恢复代谢能力 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 论文创新点 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-97页 |
| 附录I:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第97页 |