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光滑球拟酵母发酵生产丙酮酸中NADH的生理功能解析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 绪论第10-20页
   ·概述第10-11页
   ·国内外研究进展第11-17页
     ·工业微生物中NADH 的代谢调控第11-16页
     ·NADH 调控对碳中心代谢途径的影响第16-17页
   ·本论文主要研究内容第17-20页
     ·调控胞内NADH 优化发酵过程中仍存在的问题第17-18页
     ·本论文的主要研究内容第18-20页
第二章 高水平氧化还原电位加速T. glabrata 糖酵解速率第20-30页
   ·前言第20-21页
   ·材料与方法第21-22页
     ·菌株第21页
     ·培养基及相关溶液第21页
     ·培养条件第21页
     ·ORP 的测量第21页
     ·代谢物分析方法第21-22页
     ·酶活性的测定第22页
     ·荧光定量PCR (qPCR)第22页
   ·结果第22-27页
     ·3-磷酸甘油醛脱氢酶不是控制糖酵解速率的因素第22-24页
     ·溶氧浓度对糖酵解速率和丙酮酸产率的影响第24页
     ·在低溶氧条件下,ORP 水平对核苷酸代谢的影响第24-25页
     ·在低溶氧条件下,高ORP 水平对糖酵解途径的影响第25-27页
   ·讨论第27-28页
   ·本章小结第28-30页
第三章 异源NAD~+/H 再生系统的构建及其对丙酮酸发酵的影响第30-42页
   ·前言第30-31页
   ·材料与方法第31-34页
     ·菌株和质粒第31页
     ·培养基和丙酮酸发酵条件第31-32页
     ·质粒及重组菌株构建第32-34页
     ·NAD~+/H 再生系统活性的测定第34页
     ·葡萄糖、有机酸、核酸类物质、细胞浓度、乙醇和甘油的测定第34页
   ·结果与讨论第34-39页
     ·NAD~+/H 再生系统的构建与验证第34-35页
     ·NAD~+/H 再生系统在光滑球拟酵母细胞中的定位第35-36页
     ·NAD~+/H 再生系统对丙酮酸发酵的影响第36-38页
     ·NAD~+/H 再生系统对胞内核苷类物质的影响第38-39页
   ·本章小结第39-42页
第四章 异源NAD~+/H 再生系统对丙酮酸合成途径的影响第42-62页
   ·前言第42-43页
   ·材料与方法第43-46页
     ·菌株和质粒第43页
     ·培养基及发酵条件第43-44页
     ·分子生物学操作第44-45页
     ·分析方法第45-46页
   ·结果第46-56页
     ·表达谱芯片的转录组学分析第46页
     ·基于iTRAQ 的蛋白质组学分析第46-47页
     ·异源NAD~+/H 再生系统对葡萄糖转运系统的影响第47-52页
     ·异源NAD~+/H 再生系统对糖酵解途径的影响第52-54页
     ·异源NAD~+/H 再生系统对糖酵解分支途径的影响第54-56页
   ·讨论第56-59页
     ·CAGL0A017829 编码的葡萄糖转运蛋白不是控制糖酵解速率的主要因素第56-57页
     ·不同亚细胞结构内NADH 调控对丙酮酸合成途径的影响第57-58页
     ·不同水平的NADH 对丙酮酸合成途径的影响第58-59页
   ·本章小结第59-62页
第五章 异源NAD~+/H 再生系统对丙酮酸分解途径的影响第62-70页
   ·前言第62页
   ·材料与方法第62-63页
     ·菌株第62-63页
     ·培养基和发酵条件第63页
     ·分析方法第63页
   ·结果第63-67页
     ·异源NAD~+/H 再生系统对丙酮酸分解代谢途径基因表达的影响第63-64页
     ·异源NAD~++/H 再生系统对丙酮酸分解代谢途径蛋白表达量和酶活性的影响第64-66页
     ·异源NAD~+/H 再生系统对TCA 中间代谢物和氨基酸代谢的影响第66页
     ·增加外源硫胺素浓度对TCA 中间代谢物和氨基酸代谢的影响第66-67页
   ·讨论第67-68页
   ·本章小结第68-70页
第六章 高水平ATP 加速碳/氮源饥饿T. glabrata 恢复代谢能力第70-79页
   ·前言第70-71页
   ·材料与方法第71-73页
     ·菌株第71页
     ·培养基第71页
     ·碳/氮源饥饿试验研究路线第71-72页
     ·补加柠檬酸的丙酮酸发酵试验第72页
     ·代谢物分析方法第72-73页
   ·结果第73-77页
     ·碳源/氮源饥饿对细胞代谢能力的影响第73页
     ·碳源/氮源饥饿对胞内ATP 浓度的影响第73-74页
     ·代谢能力与胞内ATP 浓度的关系第74页
     ·亚磷酸浓度对T. glabrata PtxD 胞内ATP 浓度和代谢能力的影响第74-75页
     ·补加柠檬酸加速营养饥饿T. glabrata CON 恢复代谢能力第75-77页
   ·讨论第77-78页
   ·本章小结第78-79页
结论第79-80页
论文创新点第80-81页
致谢第81-82页
参考文献第82-97页
附录I:作者在攻读博士学位期间发表的论文第97页

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