摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第14-21页 |
1.1 鸡痘病毒 | 第14-17页 |
1.1.1 鸡痘病毒的生物学特性 | 第14-15页 |
1.1.2 鸡痘病毒的致病性 | 第15页 |
1.1.3 鸡痘病毒的基因组 | 第15-17页 |
1.1.4 重组鸡痘病毒的研究进展 | 第17页 |
1.2 泛素化修饰 | 第17-18页 |
1.3 痘病毒对泛素系统的调控的研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 痘病毒编码的Ankyrin/PRANC蛋白 | 第19页 |
1.3.2 痘病毒编码的N1R/p28泛素连接酶 | 第19-20页 |
1.3.3 鸡痘病毒泛素系统相关基因 | 第20页 |
1.4 本研究目的意义 | 第20-21页 |
第二章 FPV ORF150编码蛋白与Ub相互作用的初步鉴定 | 第21-45页 |
2.1 材料与仪器 | 第21-23页 |
2.1.1 细胞和质粒 | 第21页 |
2.1.2 SPF鸡胚 | 第21页 |
2.1.3 实验试剂 | 第21页 |
2.1.4 试剂及其配制 | 第21-23页 |
2.1.5 实验仪器 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-34页 |
2.2.1 pCAGGS-150-Flag的载体构建与鉴定 | 第23-28页 |
2.2.2 pCAGGS-HA-Ub-His的载体构建与鉴定 | 第28-32页 |
2.2.3 pCAGGS-150-Flag和pCAGGS-HA-Ub-His的表达 | 第32-33页 |
2.2.4 免疫共沉淀 | 第33-34页 |
2.2.5 激光共聚焦 | 第34页 |
2.3 实验结果 | 第34-43页 |
2.3.1 pCAGGS-150-Flag的载体构建与鉴定 | 第34-36页 |
2.3.2 pCAGGS-HA-Ub-His的载体构建与鉴定 | 第36-39页 |
2.3.3 ORF150、Ub的表达 | 第39-40页 |
2.3.4 免疫共沉淀 | 第40-41页 |
2.3.5 激光共聚焦 | 第41-43页 |
2.4 讨论 | 第43-45页 |
第三章 重组鸡痘病毒rFPV-Δ150的构建与鉴定 | 第45-63页 |
3.1 材料与仪器 | 第45页 |
3.1.1 毒株和质粒 | 第45页 |
3.1.2 主要试剂 | 第45页 |
3.1.3 试剂及其配制 | 第45页 |
3.1.4 主要仪器 | 第45页 |
3.2 实验方法 | 第45-52页 |
3.2.1 转移载体质粒pUC18-FPV150R-LPE-L的构建 | 第45-50页 |
3.2.2 重组病毒rFPV-Δ150-EGFP的构建、筛选与鉴定 | 第50-51页 |
3.2.3 重组病毒rFPV-Δ150的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
3.2.4 重组病毒rFPV-Δ150-EGFP和rFPV-Δ150的遗传稳定性鉴定 | 第52页 |
3.3 实验结果 | 第52-61页 |
3.3.1 转移载体质粒pUC18-FPV150R-LPE-L的构建与鉴定 | 第52-54页 |
3.3.2 重组病毒rFPV-Δ150-EGFP的蚀斑纯化与鉴定 | 第54-56页 |
3.3.3 重组病毒rFPV-Δ150的蚀斑纯化与鉴定 | 第56-58页 |
3.3.5 重组病毒rFPV-Δ150-EGFP和rFPV-Δ150的遗传稳定性评价 | 第58-61页 |
3.4 讨论 | 第61-63页 |
第四章 FPV150蛋白与Ub相互作用的进一步探讨 | 第63-71页 |
4.1 材料与仪器 | 第63页 |
4.1.1 实验试剂 | 第63页 |
4.1.2 实验仪器 | 第63页 |
4.2 实验方法 | 第63-65页 |
4.2.1 FPV和rFPV-Δ150对Ub转录水平的影响 | 第63-64页 |
4.2.2 Ub对FPV和rFPV-Δ150复制的影响 | 第64-65页 |
4.3 实验结果 | 第65-68页 |
4.3.1 FPVNX10和rFPV-Δ150对Ub转录水平的影响 | 第65-66页 |
4.3.2 Ub对FPV和rFPV-Δ150复制的影响 | 第66-68页 |
4.4 讨论 | 第68-71页 |
第五章 全文结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80-82页 |
作者简历 | 第82页 |