摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第14-22页 |
1.1 同种间体细胞核移植技术的研究进展 | 第14-15页 |
1.2 表观遗传修饰与核重编程 | 第15-18页 |
1.2.1 DNA甲基化 | 第15-16页 |
1.2.2 DNA甲基化抑制剂 | 第16页 |
1.2.3 组蛋白修饰 | 第16-17页 |
1.2.4 组蛋白去乙酰化抑制剂 | 第17-18页 |
1.3 体细胞克隆技术的应用 | 第18-21页 |
1.3.1 拯救濒危动物,保护遗传资源 | 第19页 |
1.3.2 体细胞核移植与治疗性克隆 | 第19-20页 |
1.3.3 利用SCNT技术生产基因工程猪 | 第20-21页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-35页 |
2.1 主要试剂 | 第22-23页 |
2.2 主要仪器 | 第23-24页 |
2.3 培养液 | 第24-26页 |
2.4 实验方法 | 第26-31页 |
2.4.1 猪成纤维细胞系的建立 | 第26-28页 |
2.4.2 猪供体细胞的准备 | 第28页 |
2.4.3 卵母细胞的体外成熟培养 | 第28页 |
2.4.4 体细胞核移植和胚胎移植 | 第28-29页 |
2.4.5 Hoechst33342染色和碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色 | 第29页 |
2.4.6 免疫荧光染色 | 第29-30页 |
2.4.7 TUNEL | 第30页 |
2.4.8 RT-PCR和Real-time PCR | 第30-31页 |
2.5 统计分析 | 第31-32页 |
2.6 实验方案 | 第32-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-75页 |
3.1 MGCD0103对猪SCNT胚胎发育能力的影响 | 第35-42页 |
3.1.1 MGCD0103对猪克隆胚胎的最佳处理浓度和处理时间 | 第35-37页 |
3.1.2 MGCD0103对猪克隆胚胎AcH3K9和AcH4K12的影响 | 第37-40页 |
3.1.3 MGCD0103对猪克隆胚胎体内发育的影响 | 第40-42页 |
3.2 PCI-24781对猪SCNT胚胎发育能力的影响 | 第42-50页 |
3.2.1 PCI-24781对猪克隆胚胎的最佳处理浓度和处理时间 | 第42-44页 |
3.2.2 PCI-24781对猪克隆胚胎AcH3K9和AcH4K12的影响 | 第44-47页 |
3.2.3 PCI-24781对猪克隆囊胚细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
3.2.4 PCI-24781对猪克隆胚胎体内发育的影响 | 第48-50页 |
3.3 M344对猪SCNT胚胎发育能力的影响 | 第50-56页 |
3.3.1 M344对猪克隆胚胎的最佳处理浓度和处理时间 | 第50-52页 |
3.3.2 M344对猪克隆胚胎AcH4K12的影响 | 第52-53页 |
3.3.3 M344对猪克隆囊胚细胞凋亡的影响 | 第53-54页 |
3.3.4 M344对猪克隆囊胚多能性基因表达的影响 | 第54-55页 |
3.3.5 M344对猪克隆胚胎体内发育的影响 | 第55-56页 |
3.4 Quisinostat对猪SCNT胚胎发育能力的影响 | 第56-63页 |
3.4.1 Quisinostat对猪克隆胚胎的最佳处理浓度和处理时间 | 第56-58页 |
3.4.2 Quisinostat对猪克隆胚胎AcH3K9的影响 | 第58-59页 |
3.4.3 Quisinostat对猪克隆囊胚POU5F1表达的影响 | 第59-60页 |
3.4.4 Quisinostat对猪克隆囊胚凋亡相关基因表达的影响 | 第60-61页 |
3.4.5 Quisinostat对猪克隆胚胎体内发育的影响 | 第61-63页 |
3.5 CI994对猪SCNT胚胎发育能力的影响 | 第63-75页 |
3.5.1 CI994对猪克隆胚胎的最佳处理浓度和处理时间 | 第63-65页 |
3.5.2 CI994对猪克隆胚胎AcH3K9和AcH4K12的影响 | 第65-69页 |
3.5.3 CI994对猪克隆囊胚5mC和POU5F1表达水平的影响 | 第69-71页 |
3.5.4 CI994对猪克隆囊胚细胞凋亡的影响 | 第71-73页 |
3.5.5 CI994对猪克隆囊胚多能性基因表达的影响 | 第73页 |
3.5.6 CI994对猪克隆胚胎体内发育的影响 | 第73-75页 |
第四章 讨论 | 第75-83页 |
4.1 MGCD0103在猪克隆胚胎发育过程中的作用 | 第75-76页 |
4.2 PCI-24781在猪SCNT胚胎发育过程中的影响 | 第76-78页 |
4.3 M344在猪核移植胚胎发育过程中的作用 | 第78-79页 |
4.4 Quisinostat在猪克隆胚胎发育过程中的影响 | 第79-81页 |
4.5 CI994在猪重构胚胎发育过程中的作用 | 第81-83页 |
第五章 结论 | 第83页 |
创新点 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
博士期间发表文章 | 第99-100页 |
缩略词表 | 第100页 |