摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
材料与方法 | 第9-22页 |
1 实验材料 | 第9-13页 |
1.1 实验器材 | 第9-10页 |
1.2 配方及试剂 | 第10-11页 |
1.3 实验动物 | 第11页 |
1.4 样本 | 第11页 |
1.5 常用软件及数据库 | 第11-13页 |
2 实验方法 | 第13-22页 |
2.1 小鼠体重、体长的测定 | 第13页 |
2.2 fat-1转基因小鼠的鉴定 | 第13-14页 |
2.2.1 DNA提取 | 第13页 |
2.2.2 普通PCR反应 | 第13-14页 |
2.3 荧光定量PCR | 第14-16页 |
2.3.1 RNA的提取 | 第14页 |
2.3.2 cDNA的合成 | 第14页 |
2.3.3 实时荧光定量PCR | 第14-16页 |
2.4 免疫荧光实验 | 第16-17页 |
2.4.1 冰冻切片制备 | 第16页 |
2.4.2 免疫荧光染色 | 第16-17页 |
2.5 肝脏组织油红O染色 | 第17页 |
2.5.1 肝脏组织冰冻切片制作 | 第17页 |
2.5.2 油红O染色步骤 | 第17页 |
2.6 透射电镜检查 | 第17-18页 |
2.7 蛋白印迹Westernblotting | 第18-21页 |
2.7.1 蛋白样品的制备 | 第18页 |
2.7.2 蛋白样品浓度测定 | 第18页 |
2.7.3 蛋白变性 | 第18-19页 |
2.7.4 Westernblotting | 第19-21页 |
2.8 ELISA | 第21页 |
2.9 数据处理 | 第21-22页 |
结果 | 第22-30页 |
1 基因鉴定结果 | 第22页 |
2 体重与体长测量结果 | 第22-23页 |
3 油红O对肝脏冰冻切片染色结果 | 第23页 |
4 下丘脑趋化因子、炎症因子的相对表达量 | 第23-25页 |
5 下丘脑电镜观察自噬小体结果 | 第25页 |
6 下丘脑免疫荧光定位自噬蛋白 | 第25-27页 |
7 Westernbloting检测P62、ATG7、LC3Ⅱ/Ⅰ结果分析 | 第27-28页 |
8 外周脂肪组织炎症因子相对表达量 | 第28-29页 |
9 ELISA对外周脂肪组织炎症因子的检测 | 第29-30页 |
讨论 | 第30-32页 |
结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-35页 |
综述 | 第35-45页 |
综述参考文献 | 第41-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
缩略词表 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |