中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
本论文主要创新点 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-28页 |
1.1 蛋白翻译后修饰 | 第11-18页 |
1.1.1 磷酸化 | 第11-12页 |
1.1.2 泛素化 | 第12-14页 |
1.1.3 两者关系 | 第14-16页 |
1.1.4 识别与检测 | 第16-18页 |
1.2 上转化纳米粒子及其应用 | 第18-21页 |
1.3 HER2及其功能 | 第21-22页 |
1.4 本论文目标与主要工作 | 第22-24页 |
参考文献 | 第24-28页 |
第二章 特定蛋白上磷酸化和泛素化同时原位成像 | 第28-51页 |
2.1 引言 | 第28-29页 |
2.2 实验部分 | 第29-34页 |
2.2.1 材料和试剂 | 第29-30页 |
2.2.2 仪器 | 第30页 |
2.2.3 PEI包裹的上转换纳米材料合成 | 第30-31页 |
2.2.4 A30-COOH修饰的上转化纳米材料合成 | 第31页 |
2.2.5 适配体功能化的上转换纳米材料合成 | 第31页 |
2.2.6 分子S1的合成 | 第31页 |
2.2.7 分子S2的合成 | 第31-33页 |
2.2.8 分子Cy3-pTag的合成 | 第33页 |
2.2.9 细胞培养 | 第33页 |
2.2.10 流式细胞分析 | 第33页 |
2.2.11 共聚焦成像 | 第33-34页 |
2.2.12 双LRET成像 | 第34页 |
2.3 结果与讨论 | 第34-46页 |
2.3.1 方案设计 | 第34-35页 |
2.3.2 UCNP的合成与功能化 | 第35-37页 |
2.3.2.1 透射电子显微镜表征 | 第35-36页 |
2.3.2.2 其他表征 | 第36-37页 |
2.3.3 UCNP上适配体的负载量 | 第37-38页 |
2.3.4 单激发双LRET体系能量受体选择 | 第38页 |
2.3.5 单激发双LRET体系体内验证 | 第38-41页 |
2.3.6 Cy3-pTag的合成及表征 | 第41页 |
2.3.7 Cy3-pTag和Cy5.5-UbA与细胞孵育浓度和时间优化 | 第41-42页 |
2.3.8 适配体Apt的特异性验证 | 第42-43页 |
2.3.8.1 流式细胞法 | 第42-43页 |
2.3.8.2 激光共聚焦显微成像法 | 第43页 |
2.3.9 Apt-UCNP与HER2阳性细胞的特异性结合 | 第43-44页 |
2.3.10 基于单激发双LRET的不同细胞HER2上的磷酸化和泛素化成像 | 第44-45页 |
2.3.11 HER2上磷酸化和泛素化相对定量 | 第45-46页 |
2.4 结论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |